A new series of methotrexate analogues was prepared in which the ${\beta}-position$ of the glutamic acid moiety is substituted by the aryl groups. The glutamic acid moiety was modified in order to enhance the lipophilic property. Reaction of N-acetylglicine ester[1] with ethyl 3-arylacrylate derivatives[2] produced trans-3-aryl-2-carboxy-5-pyrrolidone derivatives[3], which were hydrolyzed to give ${\beta}-aryl-glutamic$ acid derivatives[4]. The compounds[4] were treated with the p-aminobenzoic acid moiety and then with the pteridine ring moiety to give ${\beta}-arylmethotrexate$ derivatives[6,7]. These compounds were tested for antibacterial activity against Streptococcus faecium and for antitumor activity against murine leukemias and against human tumor cell lines in vitro. Several compounds showed significant antibacterial activity.
섬유소 기질로부터 L-lysine을 생산할 목적으로 Cellulomonas flavigena에 Brevibacterium flavum 및 Corynebacterium glutamicum을 각각 이속간 원형질체 융합을 하여 융합조건과 융합체의 성질을 조사하였다. 각각의 parental protoplast를 동량으로 혼합한 후 30% PEG 6000으로 3$0^{\circ}C$, 30분간 융합시킨 결과 1.9$\times$$10^{-6}$~2.1$\times$$10^{-6}$의 융합빈도를 얻었고, 134주의 융합체 중 유전적 안정화가 판명되고 CMC 기질로부터 L-lysine 생성능이 인정된 FCB 3 및 FCC 19를 최종 선별하였다. FCB 3 및 FCC 19는 친주보다 DNA 함량이 높을 분 아니라 G+C 함량도 융합전 친주의 G+C 총함량의 약 1/2에 해당하여 반수체로서 안정화되어 있었으며, 그리고 친주와 반대로 CMC 자화능이 있어 CMC로부터 L-lysine을 배지 중에 축적하였다.
박테리오파지 T7 gene 2.5 단백질은 single-stranded DNA 결합 단백질로 박태리오파지 T7의 DNA복제, 재조합, 및 수선에 필수적으로 요구된다. Gene 2.5 protein은 T7의 DNA 합성과 성장에 필수적인 단백질이다. Gene 2.5 Protein이 중요시 되는 이유는 이 단백질이 T7의 다른 복제 필수단백질인 T7의 다른 복제 필수단백질인 T7 DNA polymerase 와 gene 4 protein(helicase/primase)와 서로 상호작용할 것으로 제안되었기 때문이다. (Kim and Richardson, J. Biol. Chem., 1992;1994). 이 단백질의 단백질 상호작용을 가능하게 하는 domain은 carboxyl-terminal domain일 것으로 여러 실험에서 대두되었기에, 이 domain의 특성을 파악하기 위해 야생형과 변이체 gene 2.5 단백질들을 각각 GST에 융합한후 fusion 단백질을 정제하였다. 정제된 이 융합 단백질들의 carboxyl-terminal domain이 T7 복제 단백질들과 상호작용을 조사하는지를 조사하기 위해 affinity chromatography로 이용하였다. 실험 결과, 아생형 GST-gene 2.5 융합단잭질(GST-2.5 (WT))는 T7 DNA polymerase 와 상호작용을 하였지만. 변이형 융합단백질(GST-2.5$\Delta$21C)는 interaction을 하지 못했다. 이 결과는 carbohyl-terminal domain이 단백질-단백질 상호작용을 하는데 직접적으로 관여하는 것을 증명하였다. 또한,GST2.5(WT)는 gene 4 protein(helicase/primase)와 직접 상호작용을 하나. GST2.5$\Delta$21C는 상호작용을 하지 못하는 것으로 나타났다. 따라서 gene 4 proteins와의 상호작용에도 gene 2.5 protein의 carboxyl-terminal domain이 직접 관여 한다는 것이 증명되었다. 이상의 결과에서 gene 2.5 protein은 박테리오파지 T7 의 유전자 목제 시 단백질-단백질 상호작용에 관혀아며, 특히 gene 2.5 protein의 carboxyl-terminal domain이 이러한 상호작용에 직접적으로 관여하는 domain이라는 것을 알 수가 있었다.
An analytic method was developed for the quantitation of $\Delta$$^{9}-$ tetrahydrocannabinol (THC) and 11-nor-9-carboxy THC (THC-COOH) in human hair. After hair samples were pulverized using Freezer Mill, deuterated internal standards were added and digested in 1 N NaOH at $100^{\circ}C$ water bath for 30 min. Digest solutions were extracted by 5 ml hexane:ethyl acetate (90:10) after acidification with acetic acid. The organic phase was evaporated under N 2 and derivatized by BSTFA (with 1% TMCS) at $85^{\circ}C$ for 45 min. The derivatized solution was separated on HP-5MS column ($30m{\times}0.25mm{\times}0.25mm$) and detected using EI-GC-MS with selective ion monitoring mode. The assay of calibration was ranged from 5 to 100 ng/50 mg hair ($r^2$>0.99) for THC and THC-COOH. Within and between-run precision were calculated at 6, 30, 60 ng/50 mg hair with coefficients of variation less than 11%. Within and between run accuracies at the same concentrations were$\pm$14% and $\pm$30% of target for both analytes, respectively. Absolute and relative recovery at 10 and 100 ng were 60∼91%. The method was used to detect and quantify THC and THC-COOH in cannabis abuser's hairs (N = 16) and SRM (N=5, THC 1 ng/mg, NIST). We detected THC and THC-COOH in only one hair sample. In SRM, % accuracy was 93% (range 86∼103%) and precision (% CV) was 8.14. We began to set up a quantitative analysis of THC and THC-COOH using EI-GC-MS. Continuously, we need to modify and develop this method in order to apply for identification in cannanbis users' hair.
농산폐기물을 이용할 목적으로 8점의 시료에서 xylanase생산성이 우수한 두개의 균주를 선발하여 동정하였다 선정된 두 균주에 대해 xylanase의 생산 최적조건효소의 제 특성을 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. Xylanase생산에 우수한 균주로 Aspergillus niger-1701과 Aspergillus niger-430 두 균주를 선발하였다. 2. 두 균주 모두 배양시 pH $5.0{\sim}6.0$에서 배양 2일째에 최고의 효소역가를 나타내었다. 3. Aspergillus niger-1701균주에 대해서는 배양시 첨가한 C.M.C.가 21%, $NH_4H_2PO_4$가 19%, C.S.L.이 20%의 효소생산 증가를 나타냈으며 기타 탄소원, 질소원, 인산염, 생장요소, 무기염류 등은 큰 영향을 미치지 않았다. 4. Aspergillus niger-430균주에 대해서는 배양시 첨가한 탄소원, 질소원, 인산염, 생장요소, 무기염류 등이 효소생산에 큰 영향을 미치지 않았다. 5. 선정된 두 균주가 생산한 xylanase의 효소작용 최적 조건은 다음과 같다. pH:5.0 온도 : $60^{\circ}C$, 효소농도 : 33.3%(전용액중), 기질농도 : 2%, 효소작용시간 : 3 hrs. 6. 효소작응 최적조건에서 xylan최고 분해율은 95%였다.
34종의 Hexachlorophene유도체가 합성되었으며 그 각각의 화합물에 대하여 항균성시험이 행해졌다. 검정균은 세종류의 세균과 무좀균(백성균)을 포함한 5종류의 진균류이다. 시험결과는 1. 2,2'-Methylene bis [$\alpha$-(3,4,6-trichlorophenoxy)-$\beta$-(N,N-diethylamino) propionic acid] 및 2,2'-methylene bis [$\alpha$-3,4,6-trichlorophenoxy)-$\beta$-(N,N-dimethylamino) propionic acid] 는 Sta. aureus와 B.subtilis에 대해 강한 항균작용을 나타냈다. 2. 2,2'-methylene bis [$\alpha$-(3,4,6-trichlorophenoxy)-$\beta$-(m-hydroxy-p-carbozyphenylarnino ) propionic acid]는 특히 진균류의 생장저해작용이 강하며 Trichophyton rubrum 및 Microsporum gypseum에는 2 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$의 농도에서 항균성을 가지며, Epidermophyton floccosum Aspergillus niger 및 Aspergillus oryzae에 대해서는 1 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$의 농도에서 항균성을 나타냄으로서 Hexachlorophene 항균성의 10배 내지 50배의 항균력을 가진다. 3. 34종류의 합성물질중 원 Hexachlorophene에 비해 5종류의 진균류에 대해 부분적으로나마 강한 항균력을 나타내는 물질은 23종류였고 3종류의 세균에 대해선 13종류였다.
Objectives The purpose of this study was to evaluate the effect of Jeopgolsan (JGS) extract on anti-oxidant, anti-inflammatory activities in RAW 264.7 cells and on factors related with fracture healing in skull fractured rat. Methods Experimental animals were divided into four groups: normal group without any treatment (Normal), contral group were treated orally with distilled water (Control), Experimental group were treated orally with JGS at a concentration of 200 mg/kg/day (JGS 200) and Experimental group were treated orally with JGS at a concentration of 200 mg/kg/day (JGS 400). Rats in each group except the normal group were induced fractures in the skull. The 1,1-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity and 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid (ABTS) radical scavenging activity were measured to evaluate antioxidant activity. The production of nitric oxide (NO), $interleukin-1{\beta}$ ($IL-1{\beta}$), interleukin-6 (IL-6) and tumor necrosis $factor-{\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$) in the RAW 264.7 cells were measured to evaluate anti-inflammatory activity. The production of osteocalcin calcitonin, carboxy-terminal telepeptides of type II collagen (CTX II), transforming growth $factor-{\beta}$ ($TGF-{\beta}$), bone morphogenetic protein-2 (BMP-2), Insulin and alkaline phosphatase (ALP) in serum of rats were measured to evaluate the effects of fracture healing at 0, 2, 4, and 6th week. X-rays were taken every 3 week from 0 to 6th week to evaluate fracture healing effect. Results 1. No cytotoxicity was observed. 2. DPPH and ABTS radical scavenging activity were increased in a concentration dependent manner, indicating anti-oxidant effect. 3. NO, $IL-1{\beta}$, IL-6, and $TNF-{\alpha}$ were not significantly changed, indicating no anti-inflammatory effect. 4. Osteocalcin, Calcitonin, $TGF-{\beta}$ and ALP were significantly increased in the experimental groups. 5. CTX II, insulin were significantly decreased in the expermental groups. 6. Radiologic examination showed that union of fracture was promoted. Conclusions From above results, JGS showed significant results in factors related with fracture healing and radiologic examination. Threfore, JGS is expected to be effective in the treatment of fracture.
식빵의 식감향상과 노화 방지에 hydrocolloid의 첨가가 미치는 영향을 파악하기 위해 5종의 hydrocolloid(xanthan gum, guar gum, sodium alginate, k-carrageenan, CMC)를 첨가량을 달리하여 식빵을 제조하고, 시료반죽의 호화특성과 제조 식빵의 관능평가를 실시하였다. 또한 선정된 2종의 hydrocolloid(CMC, k-carrageenan)첨가 식빵의 노화속도와 유형을 파악하고자 저장기간에 따른 경도변화를 Avrami 식으로 분석하고 또한 DSC thermogram 분석도 실시하였다. 대조군에 비해 hydrocolloids 첨가군이 전반적으로 호화개시온도가 하강하였고, 최고 점도는 증가하였다. 노화의 지표로 사용되는 치반점도(setback)와 강하점도(breakdown)은 hydrocolloids 첨가 시 특히 CMC(0.6%, 1%), xanthan gum(1%), k-carrageenan(1%) 첨가 시 낮게 나타나 노화 지연효과를 추측할 수 있었다. 관능평가에서 1% 첨가 시에는 관능적 경도가 대조군에 비해 유의적으로 높게 나타나서 노화 측정 실험에서 제외하였다. 그 외 색상 강도와 뒷맛 강도에서 대조군과 첨가군의 유의적 차이는 나타나지 않았다. 제조된 식빵시료의 제조 후 15일간 경과 시의 경도 변화에서는 CMC와 k-carrageenan 첨가 시료의 경우 대조군에 비해 경도의 증가폭이 낮게 나타나 식빵의 경도 증가를 억제하는 것을 확인할 수 있었다. Avrami 모형에 의한 초기 경도를 고려한 비율로 노화도를 계산하면 대조군이 3.3배, CMC는 3.2배, k-carrageenan은 2.8배의 경도 증가폭을 나타내 k-carrageenan 첨가군의 노화비율이 낮은 것으로 나타났다. DSC 측정에서도 저장기간에 따른 엔탈피의 증가폭이 k-carrageenan 첨가군이 가장 낮은 수준을 나타내 경도 측정 및 Avrami 모형과 일치하는 결과를 나타냈다. 향후 제빵 시 노화 지연 효과를 위해 좀 더 다양한 첨가 수준에서의 노화 속도와 유형을 파악하는 것이 필요하리라 여겨진다.
Ha, Su-Min;Hwang, Shin;Park, Jin Young;Lee, Young-Joo;Kim, Ki-Hun;Song, Gi-Won;Jung, Dong-Hwan;Yu, Yun-Suk;Kim, Jinpyo;Lee, Kyoung-Jin;Tak, Eunyoung;Park, Yo-Han;Lee, Sung-Gyu
Annals of Surgical Treatment and Research
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제95권6호
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pp.303-311
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2018
Purpose: OncoHepa test is a multigene expression profile test developed for assessment of hepatocellular carcinoma (HCC) prognosis. Multiplication of ${\alpha}$-FP, des-${\gamma}$-carboxy prothrombin (DCP) and tumor volume (TV) gives the ${\alpha}$-FP-DCP-volume (ADV) score, which is also developed for assessment of HCC prognosis. Methods: The predictive powers of OncoHepa test and ADV score were validated in 35 patients who underwent curative hepatic resection for naïve solitary HCCs ${\leq}5cm$. Results: Median tumor diameter was 3.0 cm. Tumor recurrence and patient survival rates were 28.6% and 100% at 1 year, 48.6% and 82.9% at 3 years, and 54.3% and 71.4% at 5 years, respectively. The site of first tumor recurrence was the remnant liver in 18, lung in 1, and the peritoneum in 1. All patients with HCC recurrence received locoregional treatment. OncoHepa test showed marginal prognostic significance for tumor recurrence and patient survival. ADV score at 4log also showed marginal prognostic difference with respect to tumor recurrence and patient survival. Combination of these 2 tests resulted in greater prognostic significance for both tumor recurrence (P = 0.046) and patient survival (P = 0.048). Conclusion: Both OncoHepa test and ADV score have considerably strong prognostic power, thus individual and combined findings of OncoHepa test and ADV score will be helpful to guide postresection surveillance in patients with solitary HCCs ${\leq}5cm$.
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