각 균주에 대하여 씀바귀 분말 시료들이 독성을 나타내지 않는 범위에서 강력한 발암물질로써 직접 변이원으로 사용된 $MNNG(0.4{\mu}g/plate)$의 경우 S. typhymurium TA100 균주에서 시료농도 $100{\mu}g/plate$에서 메탄올 추출물이 84.51%로 가장 높은 억제효과가 나타났으며, $4NQO(0.15{\mu}g/plate)$에 대한 S. typhymurium TA98 균주에서 시료농도 $100{\mu}g/plate$에서는 물 분획물이 86.73%로 가장 높은 억제효과를 나타내었다 또한, TA100균주의 경우에는 부탄올 분획물에서 88.93%로 가장 높은 억제효과를 나타내었다. 간접변이원인 B(a)P를 사용한 실험에서 TA98 균주에서는 메탄올 추출물이 86.98%로 가장 높은 억제효과를 보였으며, TA100 균주에서는 부탄올 분획물이 75.35%로 가장 높은 억제효과를 나타냈다. 암세포주(A549, Hep3B, MCF-7)에 대한 씀바귀 분말의 증식 억제효과를 알아보기 위하여 실험한 결과, 폐암세포주인 A549세포에서는 핵산 분획물$(500{\mu}g/ml)$이 87.91%로 가장 높은 억제효과를 나타내었으며, 간암 세포주인 Hep3B 에서는 핵산 분획물$(375{\mu}g/ml)$이 70.64%로 가장 높은 억제효과를 나타냈다. 유방암 세포주인 MCF-7에서도 핵산 분획물$(375{\mu}g/ml)$이 82.89%로 가장 높은 억제효과를 보였으며, 인간 정상 간세포 293에 대해서는 24% 이하의 생육억제율을 보였다. 이는 암세포주에 대한 높은 억제효과에 비해 정상세포에 대해서는 비교적 낮은 증식 억제효과를 나타냄을 알 수 있었다.
메밀 국수의 주 재료인 메밀분의 함량을 60%와 70%로 다르게 하여 건면, 압출면 그리고, 생면의 추출물을 조제하여 항돌연변이원성과 세포독성 효과를 조사하였다. 세포독성 효과를 알아보기 위해서 A549, Hep3B, MCF-7, AGS와 HeLa를 사용하였다. 이들 시료의 추출물의 암세포 성장 억제효과를 조사한 결과, 메밀 생면은 자궁암세포에서 68.5%의 높은 억제 활성을 나타내었으며 압출면의 경우는 위암세포에서 75.7%의 억제율을 나타내었다. 건면의 경우는 폐암 세포에서 80%의 높은 억제효과를 나타내었다. 그리고 돌연 변이성 및 항돌연변이 활성은 S. Typhimurium TA98과 TA100 균주를 이용한 돌연변이성 실험 결과 메밀면 자체에는 돌연변이성이 없었으며, 항돌연변이원성 실험에서는 직접변이원인 MNNG$(0.4{\mu}g/place)$의 경우 TA100 균주에서 시료농도 $160{\mu}g/place$에서 메밀분 70% 혼합분 생면 추출물의 경우 41%의 억제효과를 나타내었으며 4NQO$(0.15{\mu}g/place)$에 대해서는 같은 시료농도에서 TA98 균주에 대해서 43%의 억제 효과를 나타내었다. 그리고 메밀분 70% 혼합분 압출면의 경우 28%의 낮은 효과를 보였으나 S. Typhimurium TA98 균주에서는 같은 시료농도에서 45%의 억제효과를 나타내었으며 공시 시료 모두 농도 의존적으로 억제하는 것으로 나타났다.
엉겅퀴 부위별 메탄을 추출 수율을 구한 결과 뿌리 및 잎 추출물은 10% 정도의 수율을 보였으나 줄기 추출물은 2.8%의 낮은 수율을 보였다. 항산화활성 실험 결과 부위별 ethyl acetate 분획물과 butanol분획물에서 강한 항산화 활성을 보였으며, 특히 뿌리의 ethyl acetate 분획물$(RC_{50}:11{\mu}g/m{\ell})$과 butanol 분획물$(RC_{50}:14{\mu}g/m{\ell})$, 잎의 butanol 분획물$(RC_{50}:15{\mu}g/m{\ell})$에서 대조구인 ${\alpha}-tocopherol(RC_{50}:12{\mu}g/m{\ell})$이나 $BHA(RC_{50}:14{\mu}g/m{\ell})$정도의 항산화활성을 보였다. 곰팡이에 대한 포자발아 억제시험에서는 전반적으로 물분획물에서 우수한 활성을 나타냈다. Yeasts에 대한 실험에서는 ethyl acetate 분획물에서 대조구와 유사한 활성을 나타냈다. 박테리아에 대한 항균시험은 역시 ethyl acetate 분획물에서 활성을 나타냈다. Ames test결과 $MNNG(0.4{\mu}g/plate)$의 경우 S. typhimurium TA100 균주에서 시료농도 $1000{\mu}g/plate$에서 핵산 분획물이 88.18%로 가장 높은 억제효과가 나타났다. $4NQO(0.15{\mu}g/plate)$에 대한 S. typhymurium TA98 균주에서 시료농도 $1000{\mu}g/plate$에서는 엉겅퀴 뿌리 추출물 및 에칠아세테이트 분획물이 77, 75.8%의 억제효과를 나타냈으며, TA100 균주에서도 엉겅퀴 뿌리 추출물 및 에칠아세테이트 분획물이 72.5, 74.3%의 억제효과를 나타냈다. $Trp-P-1(0.15{\mu}g/plate)$을 사용한 S. typhimurium TA98 균주에서는 시료농도 $1000{\mu}g/plate$에서 엉겅퀴 뿌리 추출물$(1000{\mu}g/plate)$에서 82.25%의 가장 높은 억제효과를 보였으며, TA100균주의 경우, 시료농도 $1000{\mu}g/plate$에서 부탄을 분획물에서 77.75%의 가장 높은 억제효과를 보였다. 엉겅퀴 뿌리 추출물 및 용매 극성을 이용한 분획물을 대상으로 암세포주에 대한 증식 억제 효과를 실험한 결과, A549, Hep3B, MCF-7 세포주에서 메탄올 추출물이 가장 우수한 억제효과를 나타내었으며 인간유래의 정상 간세포 293에 대하여 시료농도에 따른 세포독성 효과는$1000{\mu}g/ml$ 시료 첨가 시 암세포에 대하여 대부분 60% 전후의 억제율을 보이는데 반해 293에 대해서는 25% 이하의 생육억제율을 보였다. 이는 암세포에 대한 높은 억제효과에 비해 정상세포에 대해서는 비교적 낮은 독성효과를 나타냄을 알 수 있었다.
Synthesized 5-arylamino-2-methyl-4,7-dioxobenzothiazoles 3a-3o were evaluated for modulation of NAD(P)H: quinone oxidoreductase (NQOl) activity with the cytosolic fractions derived from cultured human lung cancer cells and their cytotoxicity in cultured several human solid cancer cell lines. The 4,7-dioxobenzothiazoles affected the reduction potential by NQOl activity and showed a potent cytotoxic activity against human cancer cell lines. The tested compounds 3a, 3b, 3g, 3h, 3n and 3o were considered as more potent cytotoxic agents, and comparable modulators of NQOl activity.
This study was performed to examine the antimutagenic and cytotoxic effects of potato vinegar and commercial vinegars(cider, brown rice, persimmon vinegars) on Salmonella typhimurium TA98, TA100 and cancer cell lines using Ames test and cytotoxicity assay, respectively. In Ames test, all vinegars did notexhibit any mutagenicity , but showed substantial inhibitory effects against N- methyl - N -nitro - N- nitrosog -uanidine(MNNG) , 4-nitroquinoline-1-oxide(4NQO), 3-amino-1,4-dimethyl-5H-pyrido(4,3-b)indol(Trp-P-1)and benzo( $\alpha$ )pyrene(B( $\alpha$ )P). The number of revertants per plate decreased significantly when these vinegars(80 ug/plate) were added to the assay system using TA100 strain. Especially, potato vinegar(80 ug/plate) showed high inhibition rate of 69.9% against mutagenicity of B( $\alpha$ )P on TA100 strain. In the cytotoxicity assay, these vinegars also showed prominent cytotoxic activity against human cancer cell lines. Potato vinegar(10 ug/well) showed the strongest cytotoxic effect against HT1080 (fibrosacoma cell) andK562 ( myelogenous leukemia) at the same concentration when compared with other vinegars.
Kim, Youn-Jung;Song, Mi-Kyung;Song, Mee;Ryu, Jae-Chun
Molecular & Cellular Toxicology
/
제3권4호
/
pp.231-237
/
2007
Exposure to DNA-damaging agents can elicit a variety of stress-related responses that may alter the expression of genes associated with numerous biological pathways. We used 19 k whole human genome chip to detect gene expression profiles and potential signature genes in human normal hepatocytes (THLE-3) by treatment of five direct acting mutagens, furylfuramide (AF-2), N-nitroso-N-methylurea (MNU), methylmethanesulfonate (MMS), 4-nitroquinoline-N-oxide (4-NQO) and 2-nitrofluorene (2NF) of the $IC_{20}$ concentration for 3 h. Fifty one up-regulated common genes and 45 down-regulated common genes above 1.5-fold by five direct-acting mutagens were identified by clustering analysis. Many of these changed genes have some association with apoptosis, control of cell cycle, regulation of transcription and signal transduction. Genes related to these functions, as TP73L, E2F5, MST016, SOX5, MAFB, LIF, SII3, TFIIS, EMR1, CYTL1, CX3CR1 and RHOH are up-regulated. Down-regulated genes are ALOX15B, xs155, IFITM1, BATF, VAV2, CD79A, DCDC2, TNFSF8 and KOX8. We suggest that gene expression profiling on mutagens by toxicogenomic analysis affords promising opportunities to reveal potential new mechanistic markers of genotoxicity.
The antimutagenic and cytotoxic activities of ethanol and water extracts from Rubus coreanum were investigated in this study. Their antimutagenic activities were measured by the Ames test and their cytotoxic activities were evaluated by the growth inhibition of cancer cells via the 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) assay and the sulforhodamine B (SRB) assay. In the results, the inhibition rates of the ethanol and water extracts toward mutagenicity induced by 4-NQO were 95.0% and 93.6% at 5 mg/plate, respectively, while their inhibition rates against mutagenicity induced by sodium azide were 27.2% and 40.8%, respectively. According to MTT assay, the cytotoxicity values of the ethanol extract against Hep3B and HeLa cells were 67.2% and 68.5%, respectively, and the values for the water extract were 65.8% and 66.4%, respectively. In the SRB assay, the ethanol and water extracts inhibited over 60% of cancer cell growth. In conclusion, both the ethanol and water extracts of Rubus coreanum offer potentially good antimutagenic and anticancer effects.
The antimutagenic and anticancer activities of glycoprotein(GP) and chondroitin sulfate(CS) from sea cucumbers were studied using Ames mutagenicity test and human cancer cells culture test. The GP's inhibitory effect toward aflatoxin B1(AFB1) and 3, 2'-dimethyl-4-amino-biphenyl(DMAB) increased with the higher added concentrations up to 5% level(w/w) regardless fractionation methods. The GP from sea cucumbers through DEAE-cellulose column chromatography showed an inhibitory effect ranged from 84 to 98%, and the maximum antimutagenicities resulted in red sea cucumber with 98% (AFB1) and 95% (DMAB). But 5% level of CS from various sea cucumbers had an inhibitory effect toward those both indirect mutagens ranged from 79% to 85%. However, in case of direct mutagens(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine, MNNG and 4-nitroquinoline-1-oxide, 4-NQO), the GP's inhibitory effect was 55∼78% and the CS had a low inhibitory effect(58∼70%) at the added level of 5%. The GP from sea cucumbers exhibited the strong inhibitory effects with 89∼95% and 82∼92% on the growth of HT-29 human crcinoma cells and AZ-521 human gastric cancer cells (at 5% level).
한국산 주목나무의 부위별 항함효과를 규명하기 위하여 주목나무의 잎, 수피, 그리고 뿌리 부분으로 나누어 알코올 추출물을 제조한 후 변이원성 및 항돌연변이 원성 실험과 인간 암세포주를 이용한 세포성 장 억제효과를 검토하였다. 실험결과 세부분의 에탄올 추출물 수율은 30%정도였다. Bacillus subtillus Hl7 및 M45균주를 이용한 rec-assay와 Salmonella typhimurium TA98 및 TA100 두균주를 이용한 Ames tes에서도 공시 시료 모두 농도 증가에 관계없이 변이원성은 없었다. 그리고 직접 변이 원인 MNNG를 이용한 항돌연변이원성 실험에서는 TA100에서 3가지 추출물 모두 50$\mu\textrm{g}$/plate 첨가시 98%이상의 강한 항돌연변이원성을 나타내었고 4NQO에 대한 억제효과에서는 TA98 및 TA100 모두 두균주에서 98% 이상의 강한 억제효과를 나타내었다. 간접변이원인 Trp-P-1에 대한 돌연변이원성 억제효과에서는 3가지 추출물 투여시 73~89%의 억제효과를 나타내었으며 B(a)P에 대해서는 16~60%의 억제활성을 나타내었으며 그중 뿌리 추출물이 가장 강하였다. 한편 정상간암세포인 WRL68에 대한 세포독성 실험결과 $0.5$\mu\textrm{g}$/{\mu}\ell의$ 농도에서 22~36%의 낮은 세포독성을 나타내었으나, 간암세포인 Hep3B에 $대해서는0.5$\mu\textrm{g}$/{\mu}\ell$ 투여시 잎 추출물 72%, 수피 추출물 87% 그리고 뿌리 추출물이 90%의 강한 세포독성을 나타내었다.
쌀을 cooking, steaming, parching 등의 가공처리 형태로서 밥, 백설기, 미싯가루를 제조하여 methanol로 추출한 후 돌연변이 억제활성의 유지여부를 조사하기 위하여 Salmonella typhimurium reversion assay로 조사하고 SOS Chromotest로 확인하였다. S. typhimurium reversion assay에 대하여 직접변이원 4NQO로 유도한 frameshift type 돌연변이의 경우 $46%{\sim}100%$의 억제효과를 나타내었으며 억제활성이 투여농도에 비례하였다. Base substitution type 돌연변이의 경우는 각 가공물의 용매 추출물에서 억제활성이 미약하거나 서의 효과를 발견할 수 없었다. 간접변이원의 경우는 직접변이원과 비교하여 모든 처리구에서 억제효과가 관찰되었다. Trp-p-1으로 유도된 frameshift type 돌연변이의 경우 $75{\sim}100%$의 활성을 나타내었으며 $AFB_1$으로 유도된 base substitution type 돌연변이의 경우는 $66{\sim}87%$의 활성을 보여 직접변이원보다 억제활성이 높았다. SOS chromotest에 대하여는 4NQO로 유도된 돌연변이의 경우 억제활성이 없었으며 Trp-p-2로 유도된 돌연변이의 경우는 19-67%의 억제활성으로 S. typhimurium reversion assay와 같은 경향이 나타남을 확인하였다. 쌀의 항변이원성 물질은 rice-cooking, steaming, parching 등의 가공처리에 의해 억제활성이 소실되지 않아 가공 안정성이 있는 물질인 것으로 조사되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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