• BMB Reports
• /
• 제56권11호
• /
• pp.618-623
• /
• 2023

Most cancer cells utilize glucose at a high rate to produce energy and precursors for the biosynthesis of macromolecules such as lipids, proteins, and nucleic acids. This phenomenon is called the Warburg effect or aerobic glycolysis- this distinct characteristic is an attractive target for developing anticancer drugs. Here, we found that Phosphofructokinase-1 (PFK-1) is a substrate of the Protein Phosphatase 4 catalytic subunit (PP4C)/PP4 regulatory subunit 1 (PP4R1) complex by using immunoprecipitation and in vitro assay. While manipulation of PP4C/PP4R1 does not have a critical impact on PFK-1 expression, the absence of the PP4C/PP4R1 complex increases PFK-1 activity. Although PP4C depletion or overexpression does not cause a dramatic change in the overall glycolytic rate, PP4R1 depletion induces a considerable increase in both basal and compensatory glycolytic rates, as well as the oxygen consumption rate, indicating oxidative phosphorylation. Collectively, the PP4C/PP4R1 complex regulates PFK-1 activity by reversing its phosphorylation and is a promising candidate for treating glycolytic disorders and cancers. Targeting PP4R1 could be a more efficient and safer strategy to avoid pleiotropic effects than targeting PP4C directly.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제32권1호
• /
• pp.72-77
• /
• 2004

본 연구진은 토양미생물의 배양액으로부터 cyclin-dependent kinase 저해활성의 Toyocamycin을 분리하였으며 〔16〕, 화학적 전합성을 통하여 활성이 개선된 유도체인 신물질 MCS-5A를 합성하였다〔3〕. 이 MCS-5A를 이용한 항암 기전규명을 위한 연구를 통하여 , human promyelocytic leukemia cell(HL-60)에서 MCS-5A에 의해 cyclin-dependent kinase inhibitor p16$^{INK4A}$ 단백질의 발현증가가 암세포의 세포주기 억제와 동시에 HL-60 cell희 세포사멸을 유도하는 것을 확인하였다(data not shown). 그러나 HL-60 cell의 경우와는 달리 non small cell lung cancer cell(NSCLC)인 A549 cell(p16$^{INK4A}$ 결핍 세포주)에 MCS-5A를 처리할 경우에는 전혀 세포사멸이 유도되지 않았다. 따라서 MCS-5A에 의한 HL-60 cell에서의 세포사멸 유도는 발암억제 유전자인 P16$^{INK4A}$의 세포 내 발현 및 존재 여부에 의해 좌우되는 것으로 판단되었다. 이러한 배경에서 본 연구는 p16$^{INK4A}$.의 기존에 알려진 세포주기 억제를 유발하는 cyclin-dependent kinase inhibitor(CKI)로서의 역할 뿐 아니라, p16$^{INK4A}$ 유전자가 세포사멸을 유도할 수 있다는 새로운 기능을 규명하기 위하여 다음의 연구를 시도하였다. 즉 $p^{INK4A}$ 결핍 세포주인 A549(-p16/+p53)와 H1299(-pl6/-p53) 그리고 p16$^{INK4A}$ 함유 세포주인 HeLa(+p16/+p53)세포에 외부로부터 p16$^{INK4A}$ 유전자를 도입시켜, 각 세포주에서의 세포사멸 유도 여부를 비교하고자 하였다. 우선 wild-type p16$^{INK4A}$ 유전자를 가진 HeLa cell에서 총 RNA를 추출하여, 역전사 반응으로 cDNA를 만들고, PCR을 통해 p16$^{INK4A}$ 유전자를 증폭하였다. pcDNA3.1/His is A vector에 p16$^{INK4A}$ 유전자를 끼워 넣고 competent cell (XL1-Blue)에 형질 전환하여 cloning한 후, p16$^{INK4A}$ clone을 다량으로 추출하였다. 위에 언급한 각각의 cell line에 p16$^{INK4A}$유전자를 농도(0, 1, 5, 10$\mu\textrm{g}$)별로 transfection 시킨 후, p16 단백질을 일정 시간 동안(12시간) 발현시킨 뒤, TUNEL등의 분석을 통해 세포사멸이 유도되는지를 확인하였으며, 또한 Western blot 분석을 통하여 p16단백질과 세포사멸 유도 인자인 caspase 3의 발+현 양상을 확인하였다. 연구 결과, Western blot을 통해 transfection시킨 p16/INK4A/유전자의 농도에 따라 각각의 cell line에서 Pro-caspase 3의 감소함을 관찰할 수 있었고, TUNEL분석을 통해 A549및 HeLa cell에서 세포사멸이 유도됨을 확인할 수 있었다 특히 A549(-p16/+p53)와 HeLa cell(+p16/+p53)에서는 TUNEL 분석 및 Western blot을 통한 pro-caspase 3의 caspase 3로의 전환 등을 통해 세포사멸이 발생하였음을 확연하게 확인할 수 있었으나, 반면 H1299(-pl6/-p53) cell에서는 단지 Western blot을 통한 pro-caspase 3의 활성화만을 통해 간접적으로 세포사멸을 확인 할 수 있었다. 또한 p53이 결핍된 H1299(-pl6/-p53)세포주에서의 $^{INK4A}$ 에 의한 세포사멸 유도는 p53 비의존적으로 작용한다는 사실을 확인할 수 있었다. 결론적으로 발암억제 유전자인 $^{INK4A}$ 는 CKI로서의 기능뿐 아니라, 세포사별 유도와도 밀접하게 관련되어 있으며, 이 기능은 발암 억제 유전자인 p53과는 독립적으로 작용한다는 사실을 확인하였다. 세포사멸 유도 기전연구에서 $p16^{INK4A}$ 가 세포사멸을 유도하는 기전에 대해서는 아직 명확하게 밝혀진 바는 없으며, 현재 본 연구실에서 다양한 실험을 통해 연구가 진행 중이다.

• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제41권4호
• /
• pp.181-188
• /
• 2003

A new species of Acanthamoeba was isolated from a freshwater fish in Korea and tentatively named Acanthamoeba sp. YM-4 (Korean isolate YM-4). The trophozoites were $11.0-23.0{\;}{\mu\textrm{m}}$ in length and had hyaline filamentous projections. Cysts were similar to those of A. culbertsoni and A. royreba, which were previously designated as Acanthamoeba group III. Acanthamoeba YM-4 can survive at $40^{\circ}C$, and its generation time was 19.6 hr, which was longer than that of A. culbertsoni. In terms of the in vitro cytotoxicity of lysates, Acanthamoeba YM-4 was weaker than A. culbertsoni, but stronger than A. polyphaga. On the basis of the mortality of experimentally infected mice, Acanthamoeba YM-4 was found to be highly virulent. The isoenzymes profile of Acanthamoeba YM-4 was similar to that of A. royreba. An anti-Acanthamoeba YM-4 monoclonal antibody, McAY7, was found to react only with Acanthamoeba YM-4, and not with A. culbertsoni. Random amplified polymorphic DNA marker analysis and RFLP analysis of mitochondrial DNA and of 18S small subunit ribosomal RNA, placed Acanthamoeba YM-4 in a separate cluster on the basis of phylogenetic distances. Thus the Acanthamoeba Korean isolate YM-4 was identified as a new species, and assigned as Acanthamoeba sohi.

• Archives of Pharmacal Research
• /
• 제27권4호
• /
• pp.407-414
• /
• 2004

The expression of CYP3A4 gene is induced by a variety of structurally unrelated xenobiotics including the antibiotic rifampicin, pregnenolone 16-carbonitrile (PCN), and endogenous hormones, that might mediate through steroid and xenobiotic receptor (SXR) system. The molecular mechanisms underlying regulation of CYP3A4 gene expression have not been understood. In order to gain the insight of the molecular mechanism of CYP3A4 gene expression, study has been undertaken to investigate if the histone deacetylation is involved in the regulation of CYP3A4 gene expression by proximal promoter in human hepatoma HepG2 cells. Also we have investigated to see if SXR is involved in the regulation of CYP3A4 proximal promoter activity in human hepatoma HepG2 cells. HepG2 cells were transfected with a plasmid PCYP3A4-Luc containing ${\~}1kb$ of the CYP3A4 proximal promoter region (-863 to +64 bp) in front of a reporter gene, luciferase, in the presence or absence of pSAP-SXR. In HepG2 cells, CYP3A4 inducers, such as rifampicin, PCN and RU486 showed minimal stimulation of CYP3A4 proximal promoter activity in the absence of SXR and histone deacetylase (HDAC) inhibitors. 4-Dimethylamino-H-[4-(2-hydroxycarbamoylvinyl)benzyl]benzamide (IN2001), a new class HDAC inhibitor significantly increased CYP3A4 proximal promoter activity over untreated control cells and rifampicin concomitant treatment with IN2001 increased further CYP3A4 proximal promoter activity that was stimulated by IN2001 The results of this study demon-strated that both HDAC inhibitors and SXR are essential to increase of CYP3A4 proximal promoter activity by CYP3A4 inducers such as PCN, rifampicin, and RU486. Especially SXR seems to be important for the dose dependent response of CYP3A4 inducing chemicals to stimulate CYP3A4 proximal promoter activity. Also this data suggested that HDAC inhibitors seemed to facilitate the CYP3A4 proximal promoter to be activated by chemicals.

• 한국세라믹학회지
• /
• 제40권9호
• /
• pp.859-866
• /
• 2003

칼슘설포알루미네이트계 팽창시멘트는 수화하여 ettringite, monosulfate 등의 수화물을 생성하여 경화체의 수축을 보삼함으로써, 균열 발생을 방지한다. 본 실험에서는 칼슘설포알루미네이트계 팽창시멘트의 수화특성을 규명하기 위하여 화학성법으로 3CaO.$3A1_2$$O_3$.$CaSO_4$($C_4$$A_3$S)을 제조하였으며, $C_4$$A_3$S-Ca(OH)$_2$-CaSO$_4$.2$H_2O$-C$_3$A계의 수화특성을 알아보았다. 화학성법에 의해 $1300^{\circ}C$에서 잘 발달한 $C_4$$A_3$S를 제조할 수 있었고, $C_4$A$_3$S-Ca(OH)$_2$-CaSO$_4$.2$H_{2}O$계의 주요수화 생성물은 ettringite이었으며, $C_4$A$_3$S-Ca(OH)$_2$-CaSO$_4$.$2H_2O$-C$_3$A는 수화초기에 ettringe를 생성하였다가 석고가 소비되면서 monosulfate로 전이하였다.

• 대한영상의학회지
• /
• 제83권6호
• /
• pp.1312-1326
• /
• 2022

목적 진행성 위암의 인접 장기 침범을 결정함에 있어 우측와위 CT의 추가적 가치를 살펴보았다. 대상과 방법 병리학적으로 입증된 T4a (p4a), 외과적 그리고 병리학적으로 입증된 T4b (sT4b, pT4b) 위암 환자 중 좌후사위 및 우측와위 자세가 포함된 프로토콜의 CT를 촬영한 환자 총 728명이 포함되었다. 2명의 영상의학과 전문의가 2주 간격으로 각각 우측와위 CT 없이, 우측와위 CT와 함께 좌후사위 CT를 분석하여 5점 척도를 사용하여 T 병기를 평가하고 종양과 인접 장기 사이의 "미끄러짐 징후"의 존재를 기록했다. 결과 564명의 환자(77.4%)가 pT4a로 진단되었다. 65명(8.9%)과 99명(13.6%)의 환자가 각각 pT4b, sT4b로 진단되었다. 좌후사위 CT 단독 분석에 비하여 우측와위 CT가 추가되었을 때, T4b와 T4a를 구별하기 위한 곡선 아래 면적(area under the curve; 이하 AUC) 값이 두 검토자 모두에서 유의하게 증가했다(Ps < 0.001). 하위집단분석에서 T4a와 췌장을 침범한 T4b 위암을 구별하기 위한 AUC 값 역시 두 검토자 모두에서 증가했다(Ps < 0.050). 관찰자 간 일치도 역시 향상되었다(가중 카파 계수, 0.296-0.444). 결론 진행위암에서 인접 장기 침범을 판단함에 있어, 우측와위 CT가 추가되었을 때 좌후사위 CT 단독 분석에 비해 더 높은 AUC 값과 관찰자 간 일치도를 보임으로써 추가적 가치가 있었다.

• 한국정보과학회논문지:컴퓨팅의 실제 및 레터
• /
• 제9권5호
• /
• pp.578-587
• /
• 2003

DSTM (Dual Stack Transition Mechanism)은 현재 주목받고 있는 IPv4/IPv6 연동기술로 서 터널링 방식을 적용한 기술중의 하나이다. DSTM은 fevers (IPv4-over-lPv6) 터널링과 임시 글로벌 IPv4 주소의 할당방식을 적용하여 IPv4와 IPv6간의 연결성을 지원한다. TEP (Tunnel End Point)는 DSTM 도메인과 인터넷망의 경계 라우터로서 4over6 터널링 패킷의 캡슐화와 복원기능을 적용하여 양방향 통신을 제공한다. 본 논문에서는 기본적인 IPv6 프로토콜 표준안의 내용을 기술하였으며 DSTM에서의 요구사항을 만족하는 TEP 데몬 프로그램을 설계하고 구현하였다. TEP 데몬은 DSTM 노드로부터 전송되는 4over6 패킷을 분석하여 동적으로 4over6 터널링 인터페이스를 구성하여 DSTM 노드와 IPv4-only 노드간에 통신을 가능하게 한다. 최종적으로 구현된 TEP를 적용한 시험망을 구성하고 성능을 측정하여 결과를 제시하였다. 이러한 결과를 통하여 구현된 TEP 데몬이 DSTM 서비스에 적합한 성능을 제공 할 수 있음을 확인하였다.

• 약학회지
• /
• 제48권4호
• /
• pp.254-260
• /
• 2004

Structure-activity relationship studies of allylamine type of antimycotics were carried out to evaluate the effect of naphthyl and methyl portion of naftifine. Compounds with 2,4-difluorophenyl( 2a-5a), 2,5-difluorophenyl(2b-5b), 4-ethylphenyl(2c-5c), 2-hydroxyphenyl(2d-5d) and 2-methylnaphthyl(2e-5e) instead of naphthyl group with hydrogen(3a-3e), methyl(4a-4e), and ethyl(5a-5e) in the place of methyl in naftifine were synthesized and tested their in vitro anti-fungal activity against five different fungi. Eight compounds( 3a, 4a, 5a, 3d, 4d, 4d, 5d, 3e, and 4e) showed significant anti-fungal activity against T. mentagroPhytes. (E)-N-(3-Phenyl-2-propenyl)-2- hydroxy-benzenemethaneamine( 3d) displayed moderate antifungal activity against all five different fungi.

• Archives of Pharmacal Research
• /
• 제27권4호
• /
• pp.415-421
• /
• 2004

Cytochrome P450 3A4 (CYP3A4) is the most abundant CYPs in human liver, comprising approximately $30\%$ of the total liver CYPs contents and is involved in the metabolism of more than $60\%$ of currently used therapeutic drugs. However, the molecular mechanisms underly-ing regulation of CYP3A4 gene expression have not been understood. Thus, this study has been carried out to gain the insight of the molecular mechanism of CYP3A4 gene expression, investigating if the histone deacetylation is involved in the regulation of CYP3A4 gene expression by proximal promoter. Also SXR was investigated to see if they were involved in the regulation of CYP3A4 proximal promoter activity. Hepa-1 cells were transfected with a plasmid containing ${\~}1kb$ of the human CYP3A4 proximal promoter region (863 to +64 bp) cloned in front of a reporter gene, luciferase, in the presence or absence of SXR. Transfected cells were treated with CYP3A4 inducers such as rifampicin, PCN and RU 486, in order to examine the regulation of CYP3A4 gene expression in the presence or absence of trichostatin A (TSA). In Hepa-1 cells, CYP3A4 inducers increased modestly the luciferase activity when TSA was co-treated, but this increment was not enhanced by SXR cotransfection. Taken together, these results indicated that the inhibition of histone deacetylation was required to SXR-mediated increase in CYP3A4 proximal promoter region when rifampicin, or PCN was treated. Further a trans-activation by SXR may demand other species-specific transcription factors.

• 대한화학회지
• /
• 제49권4호
• /
• pp.426-430
• /
• 2005