Rph1 and Gisl are damage-responsive repressors involved in PHR1 expression. They have two $C_{2}$H/ sub 2/ zinc finger motifs as putative DNA binding domains and N-terminal conserved domain with unknown function. They are also found in the human retinoblastoma binding protein 2 and the mouse jumonji- encoded protein. The repressors are able to bind to A $G_{4}$ sequence within a 39-bp sequence called upstream repressing sequence of PHR1 promoter (UR $S_{PHR1}$) responsible for the damage-response of PHR1. We report here that Rph1 is predominantly localized in the nucleus as examined by fluorescence microscopic analysis with GFP-Rph1 fusion protein. On the basis of the fact that the A $G_{4}$ sequence that is recognized by Rph1 and Gisl is also recognized by Msn2 and Msn4 in a process of stress response, we a1so tried to examine the in vivo function of A $G_{4}$ and the role of Msn2 and Msn4 in PHR1 expression. Our results demonstrate that Msn2 and Msn4 are actually required for the basal transcription of PHR1 expression but not for its damage induction. When A $G_{4}$ sequence was inserted into the minimal promoter of the cyc1-LacZ reporter, the increased LacZ expression was observed indicating its involvement in transcriptional activation. The data suggest that the A $G_{4}$ is primarily required for basal transcriptional activation of PHR1 or CYC1 promoter through the possible involvement of Msn2 and Msn4. However, since the A $G_{4}$ is also involved in the repression of PHR1 via Rphl and Gisl, it is proposed that A $G_{4}$ functions as either URS or upstream activating sequence (UAS) depending on the promoter context.t.
Amorphous $BaTi_4O_9$ ($BT_4$) film was deposited on Pt/Si substrate by RF magnetron sputter and their dielectric properties and electrical properties are investigated. A cross sectional SEM image and AFM image of the surface of the amorphous $BT_4$ film deposited at room temperature showed the film was grown well on the substrate. The amorphous $BT_4$ film had a large dielectric constant of 32, which is similar to that of the crystalline $BT_4$ film. The leakage current density of the $BT_4$ film was low and a Poole-Frenkel emission was suggested as the leakage current mechanism. A positive quadratic voltage coefficient of capacitance (VCC) was obtained for the $BT_4$ film with a thickness of <70 nm and it could be due to the free carrier relaxation. However, a negative quadratic VCC was obtained for the films with a thickness ${\geq}96nm$, possibly due to the dipolar relaxation. The 55 nm-thick $BT_4$ film had a high capacitance density of $5.1fF/{\mu}m^2$ with a low leakage current density of $11.6nA/cm^2$ at 2 V. Its quadratic and linear VCCs were $244ppm/V^2$ and -52 ppm/V, respectively, with a low temperature coefficient of capacitance of $961ppm/^{\circ}C$ at 100 kHz. These results confirmed the potential suitability of the amorphous $BT_4$ film for use as a high performance metal-insulator-metal (MIM) capacitor.
The biocontrol agent Serratia plymuthica A21-4 was selected and proved as an excellent inhibitor of Phytophthora blight of pepper through in vitro and in vivo experiments in previous studies. To enhance the colonizing density of S. plymuthica A21-4 on plant root and rhizosphere soil, some soil conditions might effect on the colonization of the bacteria were examined. The results obtained from the study indicated that the soils containing more sand were favorable to root colonization of S. plymuthica A21-4. Organic amendment such as 3% maize straw(w/w) was helpful to colonize the bacteria in root and soil. The soil temperature about $20^{\circ}C$, water content around 40%, and soil pH near to neutral or slightly acidic, were optimum condition for the colonization of S. plymuthica A21-4 in the rhizosphere soil and roots of pepper. In addition, existence of indigenous biotic entities was beneficial to the colonization of S. plymuthica A21-4.
The purpose of this study was to carry out radiocarbon dating using a wiggle match, of wooden boards and grains from the Mado shipwreck No. 4, which was excavated from Mado in Taean-gun, Chungcheongnam-do. The result of the wiggle matching for four decennial tree-ring samples of the stern plank produced a ${\pm}2{\sigma}$ radiocarbon date (95.4% confidence interval) of A.D. 1337-1356 or A.D. 1412-1429. The grains produced a ${\pm}2{\sigma}$ radiocarbon date (95.4% confidence interval) of A.D. 1415-1455. This indicated that the Mado shipwreck No. 4 belonged to the early or middle of the 15th century. These radiocarbon dating results correlate with the date that was speculated by archaeologists according to the ship's structure and ceramic style.
Journal of the Korean Society of Manufacturing Technology Engineers
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v.7
no.6
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pp.141-148
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1998
A loader is construction & road or agricultural machinery for lifting, moving, and mixing. This study deals with the agricultural mini loader for stock raising farming. The performance of the machine is established by pulling power, working lifting capacity, and minimum circling radius, etc. Also, driving easiness and endurance are very important in manufacturing. Thus, this study has developed the loader with the 4-wheel driving equipment by gear transmission, the 4-wheel steering equipment by power handle steering type, and the equipment making four wheels touch simultaneously on the rugged ground. The developed loader having these functions was very fit in a small cattle shed or a rugged ground. This study is divided into two parts; (I) development of 4WS transmission and (II) construction of the loader by 4WS system and other equipments.
A disintegrin and metalloprotease with thrombospondin domains (ADAMTS) are a member of peptidase and involved in processing of von Willebrand factor as well as cleavage of aggrecan, versican, brevican and neurocan. Among 19 subfamilies of human ADAMTS, ADAMTS-4 is a zinc-binding metalloprotease and is a famous therapeutic target for arthritis. It has been reported that a flavonoid luteolin shows inhibitory activity against ADMATS-4. In this study, we verified that luteolin is a potent inhibitor of ADAMTS-4 and probed the molecular basis of its action. On the basis of a docking study, we proposed a binding model between luteolin and ADAMTS-4 in which 3',4'-dihydroxyl groups in luteolin formed hydrogen bonding with ADMATS-4 and these interactions are important for its inhibitory activity against ADAMTS-4.
The present study aimed to investigate the function of translationally controlled tumor protein (TCTP) in the regulation of Oct4 in mouse embryonic carcinoma P19 cells and mouse J1 embryonic stem (ES) cells. The mRNA level of endogenous TCTP in somatic cells was 2-4 folds higher than that in pluripotent P19 and J1 ES cells. Overexpression of TCTP in mouse pluripotent cells not only reduced the level of Oct4 transcription, but also decreased the pluripotency of stem cells. The N-terminal end of TCTP (amino acids 1-60) played an important role in suppressing the Oct4 promoter. Moreover, overexpression of TCTP in P19 cells suppressed the Oct4 promoter activity in a dose- and a time-dependent manner. In addition, knockdown of TCTP by small interfering RNA increased the expression of Oct4. Our study indicates that TCTP downregulates the Oct4 expression by binding the Sf1 site of Oct4 promoter in mouse pluripotent cells.
The transient receptor potential vanilloid 4 (TRPV4) cation channel, a member of the TRP vanilloid subfamily, is expressed in a broad range of tissues. Nitric oxide (NO) as a gaseous signal mediator shows a variety of important biological effects. In many instances, NO has been shown to exhibit its activities via a protein S-nitrosylation mechanism in order to regulate its protein functions. With functional assays via site-directed mutagenesis, we demonstrate herein that NO induces the S-nitrosylation of TRPV4 $Ca^{2+}$ channel on the $Cys^{853}$ residue, and the S-nitrosylation of $Cys^{853}$ reduced its channel sensitivity to 4-${\alpha}$ phorbol 12,13-didecanoate and the interaction between TRPV4 and calmodulin. A patch clamp experiment and $Ca^{2+}$ image analysis show that the S-nitrosylation of $Cys^{853}$ modulates the TRPV4 channel as an inhibitor. Thus, our data suggest a novel regulatory mechanism of TRPV4 via NO-mediated S-nitrosylation on its $Cys^{853}$ residue.
The structure of Cantharidin (Hexahydro-3a,7a-dimethy1-4,7-epoxyisobenzofuran-1,3-dione, C/sub 10/H/sub 12/O/sub 4/)has been determined by X-ray diffraction methods. The crystal system is orthorhombic, space group Pna2/sub 1/, unit cell constants, a=11.0731(9) (equation omitted), b=6.7344(4) (equation omitted), c=12.5000(9) (equation omitted), α=β=γ=90°, V=932.13(12) (equation omitted), T=296K, Z=4, D/sub c/=1.398Mgm/sup -3/. The intensity data were collected on an Enraf-Nonius CAD-4 Diffractometer with graphite monochromated MoKα radiation(λ=0.71073(equation omitted)). The molecular structure was solved by direct methods and refined by full-matrix least squares to a final R=4.42% for 759 unique observed F/sub o/>4σ(F/sub o/) reflections and 140 parameters.
The amyloid ${\beta}$-peptide ($A{\beta}$), which originates from the proteolytic cleavage of amyloid precursor protein (APP), plays a central role in the pathogenesis of Alzheimer's disease (AD). Mounting evidence indicates that different species of $A{\beta}$, such as $A{\beta}$ oligomers and fibrils, may contribute to AD pathogenesis via distinct mechanisms at different stages of the disease. Importantly, elevation and accumulation of soluble $A{\beta}$ oligomers closely correlate with cognitive decline and/or disease progression in animal models of AD. In agreement with these studies, oligomers of $A{\beta}$ have been shown to directly affect synaptic plasticity, a neuronal process that is known to be essential for memory formation. Our previous studies showed that $A{\beta}$ induces the breakdown of phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate (PI(4,5)P2), a phospholipid that regulates key aspects of neuronal function. PI(4,5)P2 breakdown was found to be a key step toward synaptic and memory dysfunction in a mouse model of AD. To this end, we seek to identify small molecules that could elevate the levels of PI(4,5)P2 and subsequently block $A{\beta}$ oligomer-induced breakdown of PI(4,5)P2 and synaptic dysfunction.. We found that (20S)Rg3, an active triterpene glycoside from heat-processed ginseng, serves as an agonist for phosphatidylinositol 4-kinase IIalpha (PI4KIIalpha), which is a lipid kinase that mediates a rate-limiting step in PI(4,5)P2 synthesis. Consequently, (20S)Rg3 stimulates PI(4,5)P2 synthesis by directly stimulating the activity of PI4KIIalpha. Interestingly, treatment of a mouse model of AD with (20S)Rg3 leads to reversal of memory deficits. Our data suggest that the PI(4,5)P2-promoting effects of (20S)Rg3 may help mitigate the cognitive symptoms associated with AD.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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