ERM 단백질은 23S rRNA의 A2058에 methylation시킴으로써 macrolide-lincosamide- streptogramin B $(MLS_B)$계 항생제의 부착을 저해하여 항생제의 활성을 억제하는 내성 인자 단백질로 monomethylase와 dimethylase로 나누어진다. Dimethylase와 비교되는 monomethylase의 특성을 밝히기 위해 dimethylase (ErmSF)와 monomethylase (TlrD)를 동시에 보유한 Streptomyces fradiae에서 tlrD를 클론하고 대장균에서 최초로 대략생산을 시도하여 $37^{\circ}C$에서 세포내 전체 단백질의 55%를 차지할 정도로 대량생산된 불용성 단백질을 얻어내었다. 그러나 ErmSF와는 달리 낮은 온도에서 대량생산된 단백질이 용해성 단백질로 전환되지 않고 불용성 단백질로 남아있었다. Thioredoxin과 샤페론인 GroESL은 모두 ErmSF의 경우와 마찬가지로 용해성 단백질로의 전환에 도움을 주지 않았다. 이러한 차이점은 천재까지 전혀 밝혀지지 않은 단백질내의 구조적 특성에 의한 monomethylase와 dimethylase의 차이점을 밝힐 수 있다는 가능성을 말해주는 것으로 추정된다. 그러나 ErmSF의 경우와 동일하게 SDS-PAGE에서 검색되지 않은 미량의 발현된 용해성 단백질이 TlrD를 함유한 세포에 항생제에 대한 내성을 나타내게 하였고 이렇게 발현된 내성은 monomethylase에 의한 내성에서 기대되는 내성과 일치하였다.
Four young swamp buffalo cows of similar age ranging in weight between 280 to 380 kg and trained to do physical work were used in a study to determine energy and protein requirements for draught using a $4{\times}4$ Latin square designed experiment. The experiment consisted of field trials employing 4 levels of work load, e.g. no work as control, and loads amounting 450 to 500 Newton (N) pulled continuously for 1, 2 and 3 h daily for 14 consecutive days. Cows were fed king grass (Penisetum purpuroides) ad libitum and were subjected to materials balance trials. Body composition was estimated in vivo by the body density method and daily energy expenditure (EE) was calculated from ME minus retained energy (RE). The results show that EE while not working ($EE_{resting}$) was $0.42kgW^{0.75}MJ/d$ and maintenance ME ($ME_m$) was $0.37kgW^{0.75}MJ/d$. ME requirement increased to 1.65 times maintenance for the work of 3 hours. The energy expended for doing exercise ($E_{exercise}$) was 9.56, 20.0 and 25.86 MJ/cow for treatments 1, 2 and 3 II, respectively. Fat retention was absent in all groups of working cows, but protein retention was only negative for cows undertaking 3 h work. The relationship between $E_{exercise}$ (MJ), work load (F, kN), work duration (t, h) and body mass (W, kg) was found to be: $E_{exercise}=(0.003F^{1.43}t^{0.93})/W^{0.09}MJ$. The maintenance requirement for digestible protein was $2.51kgW^{0.75}g/d$, whereas digestible protein for growth ($DP_{growth}$) and for work ($DP_{work}$) followed the equations: $DP_{growth}=[(258+1.25W^{0.75}){\Delta}Wkg/d]g$ and $DP_{work}=[12.59e^{0.95t}]g$, respectively The coefficients a, b and c for the calculation of $E_{exercise}$ components according to the Lawrence equation were found to be 2.56 J/kgW.m, 5.2 J/kg load carried.m and 0.29, respectively, thus efficiencies to convert ME into work were 0, 16.09, 27.3 and 32.44% for control, 1, 2 and 3 h/d work, respectively. ME and DP requirements for a 250 to 400 kg working buffalo cow allowing to growth up to 0.5 kg/d are presented.
Moon, Jong-Kook;Han, Beom-Ku;Kim, T. Doo-Hun;Jo, Do-Hyun
BMB Reports
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제43권11호
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pp.726-731
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2010
We report the tissue-specific distribution of chitinolytic activity in Korean ginseng root and characterize two 31-kDa chitinolytic enzymes. These two enzymes (SBF1 and SBF2) were purified 70- and 81-fold with yields of 0.75 and 1.25%, respectively, and exhibited optimal pH and temperature ranges of 5.0-5.5 and 40-$50^{\circ}C$. With [$^3H$]-chitin as a substrate, $K_m$ and $V_{max}$ values of SBF1 were 4.6 mM and 220 mmol/mg-protein/h, respectively, while those of SBF2 were 7.14 mM and 287 mmol/mg-protein/h. The purified enzymes showed markedly less activity with p-nitrophenyl-N-acetylglucosaminide and fluorescent 4-methylumbelliferyl glycosides of D-N-acetylglucosamine oligomers than with [$^3H$]-chitin. End-product inhibition of both enzymes demonstrated that both are endochitinases with different N-acetylglucosaminidase activity. Furthermore, the $NH_2$-terminal sequence of SBF1 showed a high degree of homology with other plant chitinases whereas the $NH_2$-terminal amino acid of SBF2 was blocked.
목적 : 신증후군에서 사구체 단백 투과성이 증가하는 것은 전신적인 순환 인자와 관련되어 있는 것으로 여겨진다. 전신적인 순환 인자의 사구체 외 기관에서의 영향과 관련하여, 본 연구에서는 복막 투석 중인 steroid resistant nephrotic syndrome (SRNS) 환자에서의 복막투석을 통한 단백 소실 정도를 파악하고자 하였다. 방법 : 2001년부터 2009년까지 복막 투석 중인 신증후군 환자 12명(SRNS)과 대조군 14명을 대상으로 후향적 환자-대조군 연구를 시행하였다. 성별, 투석 시작 시 연령, 체중, 신장, 투석 방법, 투석양, 투석 시작 시 검사 소견(혈액 요소 질소, 혈청 크레아티닌, 혈청 단백, 혈청 알부민, 24시간 투석액 부피, 24시간 투석액 단백, Kt/V)과 1년 뒤 투석 시 검사 소견(24시간 투석액 단백)을 조사하였다. 단백질 섭취 정도를 평가하기 위해 nPNA (normalized protein equvalent of total nitrogen appearance)를 측정하였다. 결과 : SRNS군과 대조군은 nPNA를 비롯한 다른 지표에 의미 있는 차이를 보이지 않았으나, SRNS군에서 혈청 알부민이 $3.7{\pm}0.3$ g/dL로 대조군($4.0{\pm}0.4$ g/dL, P=0.021)보다 낮았다. 복막액을 통한 단백 소실량은 SRNS군에서 대조군보다 통계학적으로 의미 있게 높았으며($3,044.4{\pm}837.6\;mg/m^2$/day vs. $1,791.6{\pm}1,244.0\;mg/m^2$/day, P=0.007), 혈장 단백에 대한 복막의 투과성은 SRNS군에서 대조군보다 2배 가량 높았다($1.06{\pm}0.46%$ vs. $0.58{\pm}0.43%$, P=0.010). SRNS군과 대조군 모두 초기와 1년 뒤 복막 단백 소실량이 증가하였으나 대조군에서 더 큰 차이를 보였으며 복막 단백 소실량의 시간 경과에 따른 변화는 두 군(SRNS군 vs. 대조군)간에 의미있게 차이가 있었다(P=0.023). 결론 : 신증후군을 앓고 있는 소아 환자에서 복막 투석을 시행할 때는 이들의 영양상태, 성장 및 발달에 평가가 보다 적극적으로 이루어져야 하고, 복막을 통한 단백 소실을 모니터링하여 이를 보충하려는 노력 또한 필요하리라 생각된다.
Milk protein concentrate (MPC) is widely used to enhance the stability and texture of fermented dairy products. However, most research has focused on yogurt products, and the effects of MPC on sour cream characteristics remain unknown. Therefore, we investigated the effects of different MPC levels (0%, 1%, 2%, and 3% w/w) on the rheological, physicochemical, microbiological, and aroma characteristics of sour creams in this study. We found that MPC supplementation stimulated the growth of lactic acid bacteria (LAB) in sour creams, resulting in higher acidity than that in the control sample due to the lactic acid produced by LAB. Three aroma compounds, acetaldehyde, diacetyl, and acetoin, were detected in all sour cream samples. All sour creams showed shear-thinning behavior (n=0.41-0.50), and the addition of MPC led to an increase in the rheological parameters (ηa,50, K, G', and G"). In particular, sour cream with 3% MPC showed the best elastic property owing to the interaction between denatured whey protein and caseins. In addition, these protein interactions resulted in the formation of a gel network, which enhanced the water-holding capacity and improved the whey separation. These findings revealed that MPC can be used as a supplementary protein to improve the rheological and physicochemical characteristics of sour cream.
Mesenchymal stem cells (MSCs) are promising candidates for cell therapy and tissue engineering, but their application has been impeded by lack of knowledge of their core biological properties. In order to identify MSC-specific proteins, the hydrophobic protein fraction was individually prepared from two different umbilical cord blood (UCB)-derived MSC populations; these were then subjected to two-dimensional (2D) gel electrophoresis and peptide mass fingerprinting matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI)-time of flight (TOF)-mass spectrometry (MS). Although the 2D gel patterns differed somewhat between the two samples, computer-assisted image analysis identified shared protein spots. 35 spots were reliably identified corresponding to 32 different proteins, many of which were chaperones. Based on their primary sub-cellular locations the proteins could be grouped into 6 categories: extracellular, cell surface, endoplasmic reticular, mitochondrial, cytoplasmic and cytoskeletal proteins. This map of the water-insoluble proteome may provide valuable insights into the biology of the cell surface and other compartments of human MSCs.
Protein-calorie malnutrition is common in maintenance dialysis patients. Indeed, diabetic patients with chronic renal failure are considered to be at increased risk of malnutrition. The aim of this study was to compare the nutritional status and markers of inflammation of hemodialysis patients with and without type 2 diabetes. We compared nutritional parameters and C-reactive protein (CRP) as a marker of inflammation in 30 type 2 diabetic patients and age-matched 30 non-diabetic patients with hemodialysis. Serum albumin was significantly lower in patients with type 2 diabetes $(3.45\pm0.43g/dL)$ than in non-diabetic patients $(3.64\pm0.36 g/dL)$ (p<0.05). In contrast, the concentration of serum CRP was significantly higher in type 2 diabetes $(1.42\pm1.8mg/dL)$ (p<0.05). There were significant negative-relationships between serum albumin and CRP level in both diabetic (r=-0.553, p<0.01) and non-diabetic (r=-0.579, p<0.01) patients. In diabetic patients, serum albumin level was significantly correlated with hemoglobin (r = 0.488, p < 0.01) and hematocrit (r=0.386, p < 0.01). Diabetic patients as compared to non-diabetic patients showed a significant (p < 0.01) increased serum triglyceride (TG) $(153.1\pm80.1mg/dL\;vs\;101.6\pm62.4mg/dL)$ and decreased serum HDL cholesterol $(36.89\pm13.48mg/dL\;vs\;47.00\pm14.02mg/dL,\;P<0.05)$. There were significant correlations in the intake of calorie and serum albumin levels in both diabetic (r=0.438, p< 0.05) and non-diabetic (r=0.527, p<0.05) patients. Serum CRP level was negatively correlated with calorie (r= -0.468, p < 0.05), protein (r=-0.520, p < 0.01) and fat intakes (r=-0.403, p < 0.05) in diabetic patients and calorie (r=-0.534, p<0.05) and protein intakes (r=-0.559, p<0.05) in non-diabetic patients. The prevalence of protein malnutrition and the risk factors of cardiovascular disease were significantly higher in type 2 diabetic patients than in non-diabetic hemodialysis patients. Thus, we can suggest that the higher comorbidity and mortality rate in diabetic hemodialysis patients are partially explained by malnutrition and inflammation.
Neurotrophins regulate many aspects of neuronal function through activation of the high affinity Trk receptors. Shc family proteins are implicated in the coupling of RTK to the Ras/mitogen-activated protein kinase signaling cascade. Here we report that the fourth Shc family member, ShcD, associates with TrkB receptor and regulates BDNF-induced MAPK activation. Yeast two-hybrid assay and Co-IP experiments demonstrate ShcD interacts with TrkB in a kinase-activity-dependent manner. Confocal analysis shows ShcD cololizes well with TrkB in transfected 293T cells. Subsequent mapping experiments and mutational analysis indicate that both PTB and SH2 domains are capable of binding to TrkB and PTB domain binds to TrkB NPQY motif. Furthermore, ShcD is involved in BDNF-induced MAPK activation. In summary, we demonstrate that ShcD is a substrate of TrkB and mediates TrkB downstream signaling pathway.
Silk has had a reputation as a luxurious and sensuous fabric but it is not popular due to the expensive price and poor durability. To develop the silk materials that apply the various industries, the artificially synthesized gene can be introduced into the silkworm and expressed in the silk gland. Transgenic silkworms for the mass production of green fluorescent silks are generated using a fibroin H-chain expression system. For commercial use, safety assessment of the transgenic silkworms is essential. The purpose of this study was to examine the potential acute oral toxicity of EGFP protein expressed in genetically modified (GM) fluorescence silkworm and to obtain the approximative lethal dose in the male and female at 6-weeks ICR mice. EGFP protein was fed at a dose of 2,000 mg/kg body weight in five male or five female mice. Mortalities, clinical findings and body weight changes were monitored for 1, 3, 7, 14 days after dosing. At the end of 14 day observation period, all mice were sacrificed, and the postmortem necropsy were performed. The test group was not observed death case. Also the effect was not admitted by test substance administration in common symptoms, the body weight and postmortem. The results of single-dose oral toxicity test showed that approximative lethal dose of EGFP protein expressed in fluorescence silkworm was considered to exceed the 2,000 mg/kg body weight in both sexes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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