Background: A compact passive oxide layer can grow on tantalum (Ta). It has been reported that this oxide layer can facilitate bone ingrowth in vivo though the development of bone-like apatite, which promotes hard and soft tissue adhesion. Thus, Ta surface treatment on facial implant materials may improve the tissue response, which could result in less fibrotic encapsulation and make the implant more stable on the bone surface. The purposes of this study were to verify whether surface treatment of facial implant materials using Ta can improve the biohistobiological response and to determine the possibility of potential clinical applications. Methods: Two different and commonly used implant materials, silicone and expanded polytetrafluoroethylene (ePTFE), were treated via Ta ion implantation using a Ta sputtering gun. Ta-treated samples were compared with untreated samples using in vitro and in vivo evaluations. Osteoblast (MG-63) and fibroblast (NIH3T3) cell viability with the Ta-treated implant material was assessed, and the tissue response was observed by placing the implants over the rat calvarium (n = 48) for two different lengths of time. Foreign body and inflammatory reactions were observed, and soft tissue thickness between the calvarium and the implant as well as the bone response was measured. Results: The treatment of facial implant materials using Ta showed a tendency toward increased fibroblast and osteoblast viability, although this result was not statistically significant. During the in vivo study, both Ta-treated and untreated implants showed similar foreign body reactions. However, the Ta-treated implant materials (silicone and ePTFE) showed a tendency toward better histological features: lower soft tissue thickness between the implant and the underlying calvarium as well as an increase in new bone activity. Conclusion: Ta surface treatment using ion implantation on silicone and ePTFE facial implant materials showed the possibility of reducing soft tissue intervention between the calvarium and the implant to make the implant more stable on the bone surface. Although no statistically significant improvement was observed, Ta treatment revealed a tendency toward an improved biohistological response of silicone and ePTFE facial implants. Conclusively, tantalum treatment is beneficial and has the potential for clinical applications.
Stigmalactam, an aristolactam-type alkaloid extracted from Orophea enterocarpa, exerts cytotoxicity against several human and murine cancer cell lines, but the molecular mechanisms remain elusive. The aims of this study were to identify the mode and mechanisms of human cancer cell death induced by stigmalactam employing human hepatocellular carcinoma HepG2 and human invasive breast cancer MDA-MB-231 cells as models, compared to normal murine fibroblasts. It was found that stigmalactam was toxic to HepG2 and MDA-MB-231 cells with $IC_{50}$ levels of $23.0{\pm}2.67{\mu}M$ and $33.2{\pm}4.54{\mu}M$, respectively, using MTT assays. At the same time the $IC_{50}$ level towards murine normal fibroblast NIH3T3 cells was $24.4{\pm}6.75{\mu}M$. Reactive oxygen species (ROS) production was reduced in stigmalactam-treated cells dose dependently after 4 h of incubation, indicating antioxidant activity, measured by using 2',7',-dichlorohydrofluorescein diacetate and flow cytometry. Caspase-3 and caspase-9 activities were increased in a dose response manner, while stigmalactam decreased the mitochondrial transmembrane potential dose-dependently in HepG2 cells, using 3,3'-dihexyloxacarbocyanine iodide and flow cytometry, indicating mitochondrial pathway-mediated apoptosis. In conclusion, stigmalactam from O. enterocarpa was toxic to both HepG2 and MDA-MB-231 cells and induced human cancer HepG2 cells to undergo apoptosis via the intrinsic (mitochondrial) pathway.
Six-transmembrane epithelial antigen of prostate 4 (Steap4)는 철과 구리를 환원하여 철과 구리의 세포내 유입에 관여하는 금속 환원효소로, 구리 철의 항상성 뿐만 아니라 염증, 포도당 대사, 지질 대사에도 중요한 역할을 한다. 최근에 Steap4가 지방세포의 분화를 촉진한다는 보고가 발표되었으나, 이에 관련된 분자적 기전에 대해서는 알려지지 않았다. 그래서, 본 연구에서는 Steap4에 의한 지방세포분화 촉진에 관련된 기전을 연구하였다. 이를 위해 3T3-L1 백색지방세포, 불멸화된 갈색지방세포(iBA) 및 생쥐의 배아 섬유아 세포인 C3H10T1/3 세포에서 Steap4을 감소시킨 후 지방세포분화 초기단계에 관련된 신호들을 분석하였다. Steap4을 shRNA로 감소시켰을 때 지방세포분화 초기 단계에서 3종류 지방세포의 세포 증식이 억제되었으며, 세포주기 관련 단백질인 cyclin A, cyclin D 그리고 cdk2의 발현은 감소하는 반면 세포주기 저해 단백질인 p21과 p27의 발현은 증가하였다. 또한 세포주기 관련 신호인 p38, ERK 그리고 Akt의 활성화는 억제되었다. 한편 지방세포분화 초기 단계에 관여하는 지방세포분화 전사인자들을 분석하였을 때, Steap4의 감소는 지방세포분화 활성 전사 인자인 C/EBPβ, KLF4의 발현을 저해하는 반면, 지방세포분화 억제 전사 인자인 KLF2, KLF3 그리고 GATA2의 발현은 증가시켰다. 또한 Steap4의 과발현은 C/EBPβ promoter에 존재하는 전사억제 히스톤 표지자인 H3K9me2과 H3K27me3을 감소시켰다. 따라서, 이상의 결과를 종합하면 Steap4는 지방세포분화 초기단계인 mitotic clonal expansion을 촉진하고 지방세포분화 전사인자들의 발현을 조절함으로써, 지방세포분화를 촉진시킴을 알 수 있었다.
This study was conducted to investigate the effects of donor cell treatments on the production of transgenic cloned piglets. Ear fibroblast cell obtained from NIH MHC Inbred minipig was used as control. The GalT knock-out/CD45 knock-in (GalT/CD46) transgenic cell lines were established and used as donor cells. The reconstructed GalT/CD46 embryos were surgically transferred into oviduct of naturally cycling surrogate sows (Landrace ${\times}$ Yorkshire) on the second day of standing estrus. Unlike control (1.2 kV/cm, 75.4%), the fusion rate of the GalT/CDl6 donor cells was significantly higher in 1.5 kV/cm, (84.5%) than that of 1.25 kV/cm, (20.2%) (p<0.01). When the number of the transferred embryos were more than 129, the pregnancy and delivery rates were increased to 13/20 (65%) and 5/20 (25%) compared to less then 100 group [1/6 (16.7%) and 0/6 (0%)], respectively. To analyze the effect of donor cell culture condition on pregnancy and delivery rates, the GalT/CD46 donor cells were cultured with DMEM or serum reduced medium. In serum reduced medium group, the pregnancy and delivery rates were improved to 8/12 (66.7%) and 5/12 (41.7%) compared to DMEM group [3/7 (42.9%) and 0/7 (0%)], respectively. In conclusion, it can be postulated that an appropriate fusion condition and culture system is essential factors to increase the efficiency of the production of transgenic cloned piglets.
Kim, Chae-lim;Cha, Sun-yeong;Chun, Min Young;Kim, Bumsoo;Choi, Min Young;Cheon, Yong-Pil
한국발생생물학회지:발생과생식
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제19권3호
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pp.145-152
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2015
Diphlorethohydroxycarmalol (DPHC) is a known to modulate the expression of extracellular matrix (ECM) components in 3T3-L1. However, the possible role of DPHC in integument stability during obesity induction is not clear yet. We evaluated the effects of DPHC on collagen or elastic fiber quantity in integument during obesity induction with high-fat diet. The dorsal back integument sections were stained with hematoxylin-eosin, Masson trichrome, and Verhoff-Van Gieson. The intensities of collagen fibers and elastin fibers were analyzed with ImageJ. The number of fibroblasts was counted at ${\times}1,000$ fields. The number of fibroblast was increased by obesity induction, but DPHC suppressed it in a concentration-dependent manner both in lean and obese mice. On the other hand, the intensities of collagen fibers were increased by DPHC treatment in obese mice groups but not in lean mice groups. The intensities of collagen fibers of obese mice were lower than that of the lean mice in 0% group. However, the number became similar between lean and obese mice by the treatment of DPHC. The intensity of elastic fibers was increased in the lean mice with the concentration of DPHC. In the obese mice group, there were increasing patterns but only significant at 10% DPHC group. The intensity of elastic fibers of obese mice was higher than lean mice in 0%, 1%, and 10% groups. Histologically epithelial cells and follicle cells which were diffused nuclear staining forms were increased by DPHC treatment. The results suggest that the activity of integument cells during obesity induction can be modulated by DPHC.
생체 적합성이 우수한 히아루론산과 생분해성이 우수한 폴리락타이드의 이량체인 락타이드의 혼합 몰비, 가교제 EDC 농도, 가교 온도 등의 반응 조건을 변화시켜 생체적합성 고분자막을 제조하였다. 히아루론산에 대한 락타이드의 혼합 몰비가 증가할수록 수용액상에서의 분해속도는 감소하였다. 합성된 고분자막을 ethylene oxide gas로 멸균 한 후 세포배양배지를 첨가하여 $37^{\circ}C$에서 200 rpm으로 24 시간동안 교반하면서 침출물을 추출한 다음 NIH/3T3 섬유아세포에 대한 세포독성을 측정하였다. EDC 농도 10% 조건에서 히아루론산에 대한 락타이드의 혼합 몰비가 5 또는 10에서는 세포독성을 나타내지 않았지만 몰비 13에서는 11% 정도의 성장저해를 나타내었다. 혼합 몰비를 10으로 고정하고 가교 온도 $15^{\circ}C$에서 EDC의 농도를 5%, 10%, 20%로 변화시켜을 때, EDC 농도가 20%인 경우에서만 12% 정도의 성장저해를 나타내었다. 혼합 몰비 10, EDC 농도 10% 조건에서 가교 온도를 $15^{\circ}C,\;25^{\circ}C,\;28^{\circ}C$로 변화시켰을 때, 가교 온도에 따른 세포독성은 나타나지 않았다. 따라서 락타이드와 히아루론산의 몰비와 EDC의 농도를 조절함으로써 인체 내에서 분해 속도를 조절할 수 있는 새로운 생체적합성 고분자막을 제조할 수 있을 것으로 사료된다.
In this study, to develop a new anti-aging agent, we will examine the antioxidant activity and the inhibitory effects of the mosidae for the MMP-1 activities in UVB-irradiated HS68 human foreskin fibroblast cell lines and human keratinocytes (Ha- CaT cell line). And the consomme soup being prepared with mosidae according to different levels (3, 6, 9, 12%) and then quality characteristics will be determined by sensory evaluations and color values. It is also observed that the mosidae has the inhibition of UVB-induced MMP-1 activities. The consomme soup prepared with mosidae is found to reduce the level of $IC_{50}$ in SOD-like activities and hydroxy radical scavenging activities, respectively. And consomme soup prepared with mosidae (CS6) is the best by sensory evaluations. In conclusion, these results suggest that the consomme soup prepared with mosidae can be further developed as new anti-aging food.
To characterize the effects of Gilgyung-Tang(GGT) on cellular proliferation and viability of normal lung fibroblast cells, we examined the cell cycle progression and cell cycle-related gene expression in T3891 using a flow cytometry and a quantitative RT-PCR analysis. 1. The significant surpression effect of cellular proliferations of GGT was observed in proportion to a certain concentration and time. 2. GGT was identified to induce apoptotic death of damaged cells by treatment with a DNA-damage agent and etoposide, while it stimulated the recovery of cellular viability of normal cells. 3 The significant reductions of mRNA expression of PCAN, c-Fos treated by GGT were observed. 4. The significant inductions of mRNA expression of p53, CDKN1. Gadd45 treated by GGT were observed. 5. The apoptosis caused by the reduction of Bcl-2 genes was significant and the Bax genes were increased. but the amount of Fas genes were not changed. These results strongly suggest that GGT triggers arrest of the cell cycle at G1 phase, and thus causes an inhibition of cellular proliferation of human normal lung cells through the transcriptional up-regulation of cell cycle inhibitory genes and down-regulation of induction of cell cycle stimulating genes respectably.
Hyelgalsan(HGS) is important prescriptions that have been used in oriental medicine for stomatitis and wound healing. The study was done to evaluate the inhibitory effects of cytotoxicity, formation of superoxide on the macrophage and neutrophil, prostaglandins($PGE_2$), interleukins($IL-1{\beta}$), collagenase activity and synthesis of collagen and DNA. The results were obtained as follows: 1. HGS was not showed the proliferation difference of human fibroblast and monocyte in all concentrations to be experimented and in result, it was concluded that they have no cytotoxicity. 2. HGS inhibited the formation of superoxide to 48% at the concentration of 0.01% in the mouse monocyte. 3. HGS was not showed the proliferation difference of human monocyte in all concentrations to be experimented and in result, it was concluded that they inhibited the formation of superoxide. 4. HGS was not showed the proliferation difference of human neutrophil in all concentrations to be experimented and in result, it was concluded that they inhibited the formation of superoxide. 5. The concentration of inhibiting the production of prostaglandins($PGE_2$) to slight in the human monocyte stimulated with E. coli were 0.01% of HGS. 6. The concentration of inhibiting the production of interleukins($IL-1{\beta}$) to slight in the human monocyte stimulated with E. coli were 0.001% and 0.0001% of HGS. 7. HGS didn't influence on collagen synthesis and total protein in fibroblasts. 8. HGS inhibited the collagenase activity to 22% at 0.1%, 45% at 0.2%, 57% at 0.5% respectively.
Adiponectin (Ad), a 30 kDa molecule, is an anti-diabetic adipokine; although derived from adipose tissue, it performs numerous activities in various other tissues. It binds to its own receptors, namely adiponectin receptor 1(AdipoR1), adiponectin receptor 2 (AdipoR2), and T-cadherin (CDH13). Ad plays several roles, especially as a regulator. It modulates lipid and glucose metabolism and promotes insulin sensitivity. This demonstrates that Ad has a robust correlation with fat metabolism. Furthermore, although Ad is not in direct contact with other tissues, including the skin, it can be delivered to them by diffusion or secretion via the endocrine system. Recently it has been reported that Ad can impact skin cell biology, underscoring its potential as a therapeutic biomarker of skin diseases. In the present review, we have discussed the association between skin cell biology and Ad. To elaborate further, we described the involvement of Ad in the biology of various types of cells in the skin, such as keratinocytes, fibroblasts, melanocytes, and immune cells. Additionally, we postulated that Ad could be employed as a therapeutic target to maintain skin homeostasis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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