We identified cdf based on screening of the Arabidopsis cDNA library for functional suppressors of the AtBI-1 (a gene described to suppress the cell death induced by Bax gene expression in yeast). The cdf was located on Chr. V and was composed of 5 exons and 4 introns. It encodes a protein of 258 amino acid residues with a molecular weight of 28.8 kDa. The protein has 3 transmembrane domains in the C-terminal region. The cdf has one homologue, named cdf2, which was found in Arabidopsis. Like cdf, cdf2 also induced growth defect in yeast. The effect of the cell growth defect factor was somewhat lower than Bax. cdf could arrest the growth of yeast. Its localization to the nucleus was essential for the suppression of yeast cell proliferation. Morphological abnormality of intracellular network, which is a hallmark of AtBI-1, was attenuated by expression of cdf.
The aim of this study was to evaluate the efficiency of supplements containing different energy sources in relation to mineral supplementation of steers grazing guineagrass (Panicum maximum cv Tanz$\hat{a}$nia) pasture, during the dry season. The experimental design was a randomized block with three treatments and four replications. The treatments consisted of a mineral supplementation and two other supplements, one based on corn seed and the other based on soybean hulls, and provided at 0.8% of body weight. Forty-eight, 12 month-old crossbred steers with an average initial body weight of 267 kg, were assigned to twelve paddocks (1,125 ha) of guineagrass. The animals that were fed with soybean hulls and corn seed presented a greater average daily gain (0.982 and 0.937) when compared with the mineral supplementation. Soybean hulls can be used as a satisfactory food source, replacing corn as an energy source in the supplementation of beef cattle without compromising animal performance.
Guida, Vincenzo;Criscuolo, Giovanna;Tamburino, Rachele;Malorni, Livia;Parente, Augusto;Maro, Antimo Di
BMB Reports
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제44권1호
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pp.64-69
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2011
A peroxidase (PD-cP; 0.47 mg/100 g leaves) was purified from autumn leaves of Phytolacca dioica L. and characterized. PD-cP was obtained by acid precipitation followed by gel-filtration and cation exchange chromatography. Amino acid composition and N-terminal sequence of PD-cP up to residue 15 were similar to that of Spinacia oleracea (N-terminal pairwise comparison showing four amino acid differences). PD-cP showed a molecular mass of approx. 36 kDa by SDS-PAGE, pH and temperature optima at 3.0 and $50.0^{\circ}C$, respectively and seasonal variation. The Michaelis-Menten constant ($K_M$) for $H_2O_2$ was 5.27 mM, and the velocity maximum ($V_{max}$) $1.31\;nmol\;min^{-1}$, while the enzyme turnover was $0.148\;s^{-1}$. Finally, the presence of $Ca^{2+}$ and $Mg^{2+}$ enhanced the PD-cP activity, with $Mg^{2+}$ 1.4-fold more effective than $Ca^{2+}$.
This study was to prepare the anionic liposomes which were to release anticancer drug (doxorubicin) at the hyperthermia temperature $({\sim}42^{\circ}C)$ and to stabilize in bovine serum solution at $37^{\circ}C$. The vesicle size and zeta potential of liposomes in Tris-HCl buffered solution (pH 7.4) were measured by an electrophoretic light scattering spectrophotometer. To estimate the stability of liposomes, liposome size was measured in bovine serum solution at $37^{\circ}C$ for 72 h. The release of doxorubicin from liposome was determined by measuring the fluorescence intensity using fluorescence spectrophotometry with temperature and time. The size of liposomes was from 120 to 160 nm and zeta potential was from $-33.3{\pm}2.4$ to $-75.6{\pm}6.9\;mV$. Anionic liposome was stabilized in bovine serum solution at $37^{\circ}C$ within 72 h. Additionally, the release transition temperature of doxorubicin from liposomes was increased by increasing mole % of anionic phospholipid.
We screened the anti-oxidative effect on V79-4 hamster lung fibroblast cells induced by hydrogen peroxide with fifteen herbal extracts. Uncariae rhynchophylla JACKS and Rheum coreanum NAKAI were found to show DPPH radical scavenge activity (25 and 29% compared to control). Rheum coreanum NAKAI and Siegesbeckia orientalis L. were shown to scavenge intracellular reactive oxygen species (57 and 55% compared to control) which is measured by dichlorodihydrofluorescin diacetate method (DCHF-DA). Rheum coreanum NAKAI which showed the most strong intracellular reactive oxygen species scavenging activity had low DPPH radical scavenging activity compared to Uncariae rhynchophylla JACKS.
Acemannan, a highly acetylated glucomannan, was extracted from fresh Aloe vera leaves by ethanol fractionation, resulting in a concentration increase of more than threefold. The presence of acemannan was confirmed using FTIR and 1H NMR analysis, revealing an average molecular weight of 780 kDa. The flocculating activity of the fractionated aloe gel polysaccharide was assessed through settling tests in a 1% (w/v) bentonite suspension. The results demonstrated that the aloe polysaccharide exhibited remarkable stability within a temperature range of 20~70 ℃. The maximal flocculation rate at different pH levels ranged from 93% to 97%, with an optimal dose for maximum flocculation rate between 0.25 mg/mL. Notably, the minimum dose required for flocculation was achieved at a pH of 3, attributed to the compression of electrostatic repulsion on the surface of bentonite particles. However, the flocs obtained under acidic conditions were less dense and compact, exhibiting lower sedimentation velocity compared to those formed under neutral and alkaline pH conditions. Additionally, the addition of salt showed a slight synergistic effect on flocculation, significantly enhancing the sedimentation velocity. This investigation highlights the potential of Aloe vera polysaccharide as a natural and edible flocculant, offering promising applications in various industries.
본 연구는 국산 캠벨얼리 와인의 주질 개선과 기능성 향상을 위해 캠벨얼리 뿐만 아니라 안토시아닌과 폴리페놀 성분이 풍부하여 항산화능이 우수하다고 알려진 아로니아를 이용하여 상업용 효모인 S. cerevisiae Fermivin과 향미증진능을 지닌 P. anomala JK04를 각각 단독 또는 5:5(v/v)의 비율로 혼합발효한 후 블렌딩하는 실험을 진행하였다. 최적 블렌딩 비율을 정하기 위하여 예비실험으로 캠벨얼리 와인에 아로니아 와인을 각각 5, 10, 20%(v/v) 첨가하여 항산화능과 관능검사를 실시하였으며, 실험 결과를 바탕으로 캠벨얼리 와인과 아로니아 와인의 블렌딩 비율을 9:1(v/v)로 설정하였다. P. anomala JK04로 단독발효한 캠벨얼리 와인은 낮은 알코올 함량으로 인해 블렌딩에서 제외하였고, 나머지는 발효에 이용된 균주에 따라 블렌딩하였다. 블렌딩와인의 기능성을 평가하기 위하여 총 안토시아닌 함량, DPPH 라디칼 소거능, 총 페놀성 화합물 함량 분석을 진행하였으며, 모든 블렌딩와인에서 대조구인 S. cerevisiae로 단독발효한 캠벨얼리보다 높은 수치를 나타내었다. 블렌딩와인의 유리당 분석 결과에서는 P. anomala JK04로 단독발효한 아로니아 와인을 첨가한 시험구(A,D)에서 glucose와 fructose 같은 잔당이 남아있는 것을 확인하였으며, 유기산 분석 결과에서는 상기 두 시험구에서 특히 malic acid 함량이 높게 측정되었다. 블렌딩와인의 외관적 품질을 검사하기 위해 색도, 휘발성 향기성분, 관능검사가 수행되었으며, P. anomala JK04를 사용 여부에 따라 A, B, C와 D, E, F 순으로 hue와 intensity 값이 증가하는 경향을 나타내었다. 또한 Hunter's color value에서는 아로니아 와인의 첨가가 와인의 a value와 b value를 증가시키는 경향을 나타내었다. 휘발성 향기성분분석에서는 P. anomala JK04의 사용이 와인에 부정적인 성분인 aldehyde와 acid 함량이 소폭 증가시키긴 하였지만, 중요한 향기성분은 ester 화합물의 함량이 큰 폭으로 증가하는 것을 확인하였다. 관능검사 결과에서는 P. anomala JK04로 단독발효한 아로니아 와인을 사용한 시험구(A,D)에서 색, 맛, 신맛, 전반적인 기호도에서 다른 시험구보다 높은 점수를 받았으며, 향기 항목에서는 모든 블렌딩와인이 대조구보다 높은 점수를 받았다. 본 연구에서는 캠벨얼리 와인에 아로니아 와인을 블렌딩하여 기능성을 증가시켰으며, S. cerevisiae Fermivin과 P. anomala JK04를 혼합발효하여 향기성분의 증가 및 관능적 품질이 향상됨을 확인하였다.
지렁이의 장내로부터 분리한 미생물 중에서 지질을 가수분해하는 활성이 높은 미생물을 선발하였으며, 동정하여 Aeromonas hydrophila PL43으로 명명하였다. A. hydrophila PL43이 생산하는 지질분해 효소의 정제는 황산암모늄 침전, DEAE-sepharose FF 이온교환 크로마토그래피, Sepharose S-300HR 겔 크로마토그래피 단계로 수행하였으며 최종적으로 정제한 지질분해 효소는 p-nitrophenyl butyrate (pNPB)를 기질로 사용했을 때, 84.5배로 정제되었고 효소 활성의 회수율은 3.7%이었다. p-nitrophenyl palmitate (pNPP)를 기질로 사용했을 때에는 56.6배로 정제되었고 효소 활성의 회수율은 2.5%이었다. SDS-PAGE를 수행한 결과, A. hydrophila PL43이 생산하는 지질분해효소의 분자량은 약 74 kDa으로 추정되었다. 지질분해 효소의 pH에 대한 영향은 pNPB와 pNPP 기질에서 pH 8.0에서 최대활성이 보였고 pH 7.0−10.0에서 안정하였다. pNPB를 기질로 사용한 경우에는 50℃에서 pNPP를 기질로 사용한 경우는 60℃에서 최대 활성을 나타냈으며, 정제한 지질분해 효소는 20−60℃에서 안정성을 나타내었다. 정제한 지질분해효소는 금속이온 Co2+, Cu2+, Fe2+에 의해서 효소활성이 억제되었으며, EDTA의 metal chelating에 의해 활성이 회복되었다. Inhibitor에 의한 저해는 효소 활성부위의 serine 잔기와 결합하여 효소 활성을 억제하는 PMSF에서 가장 우수하였으며 효소 활성부위의 aspatyl 잔기에 결합하여 효소활성을 억제하는 pepstatin A는 농도가 높아짐에 따라 효소활성을 저해하였다. 따라서 정제한 지질분해 효소는 활성부위에 serine 잔기와 aspartyl 잔기가 있는 것으로 사료되었다. 정제한 지질분해 효소의 Km 값과 Vmax 값은 pNPB를 기질로 사용 했을 때 Km 값과 Vmax 값은 1.07 mM과 7.27 mM/min이고, 기질이 pNPP일 때 Km 값과 Vmax 값은 1.43 mM 과 2.72 mM/min이었다.
Auranofin is a US Food and Drug Administration (FDA)-approved anti-arthritis medication that functions as a thioredoxin reductase inhibitor. Spermidine, a polyamine present in marine algae, can exert various physiological functions. Herein, we examined the synergistic anticancer activity of auranofin and spermidine in hepatocellular carcinoma (HCC). Combined treatment with auranofin and spermidine suppressed cell viability more efficiently than either treatment alone in HCC Hep3B cells. The isobologram plotted by calculating the half maximal inhibitory concentration (IC50) values of each drug indicated that the two drugs exhibited a synergistic effect. Based on the analysis of annexin V and cell cycle distribution, auranofin and spermidine markedly induced apoptosis in Hep3B cells. Moreover, auranofin and spermidine increased mitochondria-mediated apoptosis by promoting mitochondrial membrane potential (Δψm) loss. Auranofin and spermidine significantly increased reactive oxygen species (ROS) production in Hep3B cells, and the blocking ROS suppressed apoptosis induced by spermidine and auranofin. In addition, auranofin and spermidine reduced the expression of phosphorylated phosphatidylinositol-3 kinase (PI3K) and protein kinase B (Akt), and PI3K inhibitor accelerated auranofin- and spermidine-induced apoptosis. Using ROS scavenger and PI3K inhibitor, we revealed that ROS acts upstream of auranofin- and spermidine-induced apoptosis. Collectively, our study suggests that combination treatment with auranofin and spermidine could afford synergistic anticancer activity via ROS overproduction and reduced PI3K/Akt signaling pathway.
목 적: 양측 유방암 방사선치료 시 토모테라피와 Halcyon 선형가속기을 이용한 치료계획을 비교하여 Halcyon 치료 계획의 유용성을 평가. 대상 및 방법: 양측 유방암 환자 10명을 대상으로 Helical Mode를 사용하여 조사면 고정 너비(Field Width, FW) 5.0-cm, 피치(Pitch) 0.287, 변조 지수(Modulation Factor) 2.4 조건의 토모테라피(Helical Tomotherapy, Accuray, USA)와 6Arc 및 8Arc의 Halcyon(Varian Medical System, Palo Alto, CA, Version 3.0 USA)을 이용한 용적변조회전치료(Volumetric Modulated Arc Therapy, VMAT)치료계획을 수립하였다. 총 처방 선량 42.4Gy/16회로 치료계획용적(Planning Target Volume, PTV)의 V 40.3Gy이 90% 이상이 되도록 하였다. 종양 및 정상 장기의 선량을 비교하여 치료 계획의 질을 평가하였고 Total MU와 Beam On Time을 비교하여 효율성을 평가하였다. 결 과: 대상 환자들의 3개 치료계획 (Tomotherapy, Halcyon 6Arc VMAT, Halcyon 8Arc VMAT)의 평가 항목 평균 값은 PTV의 H.I (Homogeneity Index)는 각각 1.07, 1.10, 1.11, PTV의 C.I (Conformity Index)는 각각 1.21, 1.16, 1.17 이었다. 정상 장기의 선량 평가 항목 평균 값은 BOTH LUNG의 V 5Gy는 각각 36.3%, 31.2%, 29.7% 이며, V 15Gy는 각각 18.6%, 15.5%, 14.6% 이었다. HEART의 평균 선량(Gy)은 각각 4.17, 2.69, 2.51 이었다. Total MU의 평균 값은 각각 7498.6, 2494.2, 2471.5 이며 Beam On Time (sec)의 평균 값은 각각 462.5, 195.4, 198 로 토모테라피와 비교하여 Halcyon VMAT 치료계획이 Beam On Time과 Total MU가 감소하였다. 결 론: Halcyon VMAT은 토모테라피와 비교하였을 때 유사한 치료 계획의 질을 보여주며 정상 장기의 더 높은 보호 효과를 나타내었다. 또한 Beam On Time과 Total MU의 감소로 방사선치료의 효율성이 증가하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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