Objective: Low-dose aspirin have been proposed to improving endometrial receptivity and pregnancy rate in COH-IVF by increasing endometrial perfusion. However, the effect of low-dose aspirin in COH-IVF could be negligible because there have been large quantity of other important factors responsible for changing endometrial perfusion accompanied by COH procedure. In contrast, in frozen-thawed embryo transfer cycles which were not accompanied by COH procedure, the effects of low-dose aspirin in endometrial blood flow seems to be more certain than in COH-IVF cycles. In this study, we analyzed the effect of low-dose aspirin treatment on implantation and pregnancy rates in patients undergoing frozen-thawed embryo transfer Methods: From January 2003 to December 2003, total 264 cycles from 264 patients who attended infertility clinic at Samsung Cheil Hospital were enrolled in this study. All cases included in this study, embryos were frozen and thawed at the pronuclear stage and three days after incubation, at least 2 or more good quality embryos were transferred into uterus. In study group, low dose aspirin (100 mg/day) was administrated from the first or second date of menstrual day to 9 days after embryo transfer. On the other hand, control group did not take any medicine except estradiol valerate for endometrial priming. Several variables including implantation and pregnancy rates were compared in both groups. After then, each groups were stratified by endometrial thickness checked at embryo transfer (ET) day such as (28 mm versus <8 mm) and same variables above described were compared between study and control groups. Results: The mean age, infertility duration, endometrial thickness at embryo transfer day and mean number of transferred embryo were not significantly different in both groups. Also, implantation rates (study group: 15.8%, control group: 20.5%) and pregnancy rate (study group: 45.1%, control group: 43.5%) were not significantly different between two groups. (p>0.05) After we analyzed same variables stratified by endometrial thickness checked at embryo transfer day, we could not found any significant difference between study and control groups. Conclusions: Low-dose aspirin treatment seems to have no advantage of improving implantation and pregnancy rates in patients undergoing frozen-thawed embryo transfer.
This study was conducted to investigate the survival and hatching rates after refrozen-thawed bovine IVF blastocysts. The survival rates after refrozen-thawed bovine IVF blastocysts produced on day 7, day 8 and day 9, were 66.6%(16/24), 62.5%(15/24) and 65.3%(17/26), respectively. The survival and hatching rates after the first frozen-thawed bovine JVF blastocysts were 90.0%(27 /30) and 70.0%(21 /30), but in refrozen-thawed bovine IVF blastocysts were 66.2%(49 /74) and 45.9%(34 /74), respectively. The results of this study were suggest that refrozen-thawed bovine IVF embryos had survival ability.
Recipients are an integral part of embryo transfer and they are expensive to maintain as a good recipient. Recipient management is one of the most important components in a successful embryo transfer program. Management includes selection and subsequent care of the animals. A good recipient is basically on "open" cows or heffers whose reproductive tract is capable of receiving one or two embryos and incubating it to term. Potential recipients should be always be healthy and cycling normally ranging from 18 to 23 days. A thorough veterinary examination is recommended for candidate of recipients and cattle for questionable health should be eliminated from the recipient herd. Age and size of recipients are particularly important considerations when heifers are used, because of most embryos available for transfer are from large dams and sires. Body condition can influence a recipient's production, reproduction and health. Obese and underconditioned cattle should be avoided for use. Transfer of fresh embryos especially requires precise synchronization of donors and recipients. For estrus synchronization, PGF$_2$$\alpha$ is injected twice 10 to 12 days apart and short4erm progestagen treatment is applied to potential recipient cattle by coil into vagina (PRID) or ear implant (Synchro-Mate-B). The highest pregnancy results are achieved in recipients at exact synchrony with donors or 12 to 24 hr earlier than donors. Estrus detection is a major factor in breeding efficiency. High accuracy can be achieved by use of heat mount detection alds or by obserbing cattle for 30-minute peroids 3 times daily. Assay progesterone in milk can be used to discrIminate between pregnant and nonprenant recipients. Rectal palpation on day 35 to 70 after is an accurate and safe method of pregnancy diagnosis. Embryonic mortality in recipients may be associated with factors such as high environmental temperature and nutritional or lactational stress in early lactation period. Achievement of short calving interval requires concentrated management activity during the first 90 days following calving. Acceptable candidate for a recipient should be routinely vaccinated for infectious diseases. Proper nutritional programs according to NRC requirements and body condition scoring system for recipient cattles are vital to the ultimate success of an embryo transfer program.r program.
The objective of this study was to improve the efficiency of bovine embryo transfer by transferring of Hanwoo embryos into Hanwoo or Holstein recipients. The cryopreserved or fresh in vitro produced(IVP) embryos were transferred into uterine horn contralaterally or ipsilaterally to the corpus luteum. The recipients were inseminated by artificially on the next day of estrus. The pregnancy was diagnosed by rectal palpation at 60∼90 days after transfer of the embryos. The pregnancy rate by transfer of one or two embryos was 78%(7/9) and 74%(31/42), respectively. The pregnancy rates according to the grade of corpus lutea of recipients was 75% (20/27) and 82.0%(18/22) at the grade of A and B, respectively. Ten(67.0%) of 15 Holstein recipients transferred with IVP Hanwoo embryos and 5(42.0%) of 12 Holstein recipients transferred with frozen IVP Hanwoo embryos were pregnant. The single and twin calving ratio in Hanwoos was 77.0%(10/13) and 23.0%(3.13) in the recipients transferred with IVP embryos and 64.0%(7/10) and 27.0%(3/10) in the recipients transferred with frozen IVP embryos, respectively. Twenty-four pregnant cows following transfer of IVP embryos, 21(88.0%) calved the normal calves, and 2(8.3%) aborted. When the frozen IVP embryos were transferred, 16 pregnant cows calved 14(88.0%) normal calves and 2(13.0%) aborted. In conclusion, when one or two IVP bovine embryos were transferred into recipients, the A and B grade of corpus luteum resulted in high pregnancy rates. For the production of twin calves, transfer of the IVP or frozen IVP embryos could be suitable.
This study was carried out to investigate the effect of co-culture system(bovine oviduct epithelial cells; BOEC) and defined culture system(modified TALP ; mTALP) on the development of IVM-IVF embryos, and survival of in vitro produced blastocysts after freezing and thawing. Occytes from the slaugheterhous ovaries were matured and fertilized using general protocol. The results obtained were as the following: 1. Survival rates of frozen-thawed blastocysts using 10% glycerol as cryoprotectant was higher in day 7 blastocysts than in Day 8 and 9 blastocysts from co-cultrue system, but survival rate of frozen-thawed blastocysts was higher in Day 10 blastocysts than in day 8 and 9 blastocysts from defined culture system. Regardless of their age, survival rate of frozen-thawed blastocysts was significantly higher (p<0.05) in co-culture system than in defined culture system. 2. The cell number of blastocysts was significanlty higher (p<0.05) in Day 7 blasotcysts than in Day 8 and 9 blastocysts from co-cultures, but the cell number of blsstocysts was significantly higher (p<0.05) in Day 10 blastocysts than in Day 8 and 9 blastocysts from defined culture system. Regardless of the culture system, blastocysts with higher cell number showed higher survival rates after freezing and thawing.
본 연구는 복강경을 이용하여 한국흑염소의 난소를 연속적으로 관찰하여 그 형태적 변화를 확인함으로써 한국흑염소의 성주기를 판정하고 그 결과를 한국흑염소의 수정란 이식시에 활용하고자 하는 목적으로 수행하였다. $CIDR^(R)$ 제거 2일 후부터 복강경 수술을 통해 난소의 형태적 변화를 관찰하였다. 난소의 크기와 황체의 변화를 관찰하였으며, 황체는 그 성숙과 퇴축 과정에 따라 corpus hemorrhagicum(CH), corpus luteum(CL), corpus albicans(CA)로 나누었다. 배란 전일(Day 0)에는 배란 직전의 대형난포(Graafian follicle)가 존재하였고, 배란일(Day 1)에는 배란 직후의 함몰 부위(OD)를, 그리고 배란 2일째(Day 2)에는 초기 출혈체$(CH_1)$가 관찰되었다. 배란 3일 및 4일째에는 배란된 자리로부터 형성된 출혈체가 성숙하여 $CH_2,\;CH_3$로 발육되며 점차 그 크기가 커지고 주위에 잘 발달된 혈관의 분지들을 관찰할 수 있었다. 배란 5일째와 6일째에는 완전히 성숙하여 난소의 절반 이상을 차지하는 성숙 황체$(CL_3)$를 관찰하였다. 배란 10일째에는 더욱 발달한 성숙 황체와 함께 같은 쪽 또는 반대편 난소에 작은 난포가 생성된 것을 확인하였고, 배란 15일째에는 10일째 생성된 난포와는 다른 새로운 난포가 나타나 발육되는 것을 확인하였다. 배란 17일과 18일째에는 점차 황체의 크기가 작아져 $CL_2,\;CL_1$의 단계로 퇴행하였고, 배란 20일과 22일째에는 완전히 퇴행된 황체, 즉 백체(CA)의 존재와 함께 같은 쪽 또는 반대편 난소에 발육된 우세난포를 확인하였다. 본 연구에서 복강경을 통한 난소의 변화상을 관찰한 결과, 한국흑염 소의 발정주기는 estrus기(성숙 난포기)가 1일(성주기제 0일), metestrus기(배란 및 황체 발육기)는 4일(성주기 제 $1{\sim}4$일), diestrus기(황체기)는 $12{\sim}13$일(성주기 제$5{\sim}16/17$일), proestrus기(황체퇴행 및 난포 형성기)는 5일(성주기 제 $17/18{\sim}21/22$일)인 것으로 확인되었다. 난소의 육안적 관찰을 위해 사용한 복강경 시술은 개복술에 비래 수술 상처와 감염이 적고 수술 후 회복도 빨랐으며 최소한의 유착과 수술 시간의 단축 등 많은 장점을 가지고 있어 한국흑염소의 수정란이식 등에 그 활용 가치가 클 것으로 사료된다.
Objective: To evaluate the difference of implantation rate (IR) and clinical pregnancy rate (CPR) between two protocols of endometrial preperation in women undergoing frozen-thawed embryo transfer (FET) cycles. Methods: This study was performed during the different time periods: A retrospective study from January 2000 to June 2001 (phase I) and a prospective study from July 2001 to March 2002 (phase II). All the patients received estradiol valerate (6 mg p.o. daily) starting from day 1 or 2 of the menstrual cycle without pituitary down regulation. Progesterone was administered around day 14 after sonographic confirmation of endometrial thickness $\geq$7 mm and no growing follicle. In Group A (n=88, 99 cycles) of phase I, progesterone was administered i.m. at a dose of 50 mg daily from one day prior to thawing of pronuclear (PN) stage frozen embryo or three days prior to thawing of 6-8 cell stage frozen embryo and then each stage embryos were trasnsferred 2 days or 1 day later after thawing. In Group B (n=246, 299 cycles) of phase I, patients recieved progesterone 100 mg i.m. from one day earlier than group A; two days prior to PN embryo thawing, four days prior to of 6-8 cell embryo thawing. During the phase II, to exclude any differences in embryo transfer procedures, in Group 1 (n=23, 28 cycles) of phase II embryo was transfered by one who have used the progesterone protocol since the phase I. In Group 2 (n=122, 139 cycles) of phase II embryo was transfered by one who use the progesterone protocol from the phase II. Results: When compared across the phase and group, there were no significant differences in the characteristics. During the phase I, there were significant increase in IR (14.4% vs 5.9%, p=0.001) and CPR (28.3% vs 14.5%, p=0.000) in group A. During the phases II, IR (11.8% vs 10.6%) and CPR (27.6% vs 27.3%) show no differences between two groups. Conclusions: In FET cycles, IR and CPR are increased significantly by the change of dosage and timing of progesterone administraton. And the timing is considered to be more important factor because the dosage of progesterone did not affect implantation window in previous studies. Therefore, we suggest that progesterone administration in FET cycle should begin from one day prior to PN stage embryo thawing and three days prior to 6-8 cell stage embryo thawing.
The objective of this study was to produce calves by transfer of embryos derived from slaughter house(SHD) and ultrasound-guided ovum pick-up (OPU). At 60 hrs after injection of 400 mg FSH dissolved in 25% polyvinylpyrrolidone(PVP) by single dose, ultrasound-guided follicular oocyte aspiration was ferformed. Day-7 and day-8 blastocysts produced by in vitro maturation (IVM), fertilization (IVF) and culture(IVC) of the oocytes derived from SHD and OPU were nonsurgically transferred into recipients. The results obtained were as follows. The cleavage rate and the development rate to blastocysts were not significantly (P<0.05) different between the oocytes obtained by SHD (72.9% vs. 34.1%) and OPU (75.9% vs. 38.4%). The oocyte recovery rate from the number of follicles by ultrasound-guided aspiration were not significantly (P<0.05) different between Holstein (61.7%) and Hanwoo (60.1%), but the rate of oocytes useful for IVF was significantly (P<0.05) higher in Hanwoo (69.3%) than Holstein (59.6%). The cleavage rate and the development rate to blastocysts was not significantly (P<0.05) different between Holstein (74.9% vs. 39.2%) and recipients on day 8 of estrus cycle resulted in 13 pregnancies (34.2%). One of them was sacrificed during gestation period due to mastitis and another was aborted spontaneous. The resulting 14 calves were morphologically normal at birth. Seventy eight fresh OPU-IVF embryos were transferred into 21 recipients on day 8 of estrus cycles, resulting in pregnancy of 12 recipients (41.4%). Two of them were sacrificed during gestation period due to mastitis and the other two were aborted. Nevertheless, the 11 OPU-calves have been born normally.
The ovaries of 178 Holstein heifers or cows (heifer; 41, 1 parity; 72, 2$\leq$ parity; 65) on Day 6 or 7 (Day 0=day of estrus) were examined by transrectal ultrasonography. Diameter of corpus luteum (CL) and large follicle ( $\geq$ 10 mm), and luteal tissue area were determined by ultrasound system with a 5 MHB rectal probe. Blood samples were taken to progesterone analysis. After selection of recipients, frozen Holstein embryos were thawed and directly transferred to recipients non-surgically. The diameter of CL and luteal tissue area was greater (P<0.01) on Day 7 than on Day 6 in heifers, 1 parity or 2 $\leq$ parity cows, respectively, although progesterone concentrations were not different. The presence of fluid-filled luteal cavitied or multiple CL (2 or more) did not affect serum progesterone concentration. A large follicles were observed in 67.4% of heifers or cows and the average diameter was 14.1 mm. Greater luteal tissue area attributed higher pregnancy in heifers, but not in cows, although there were no difference on pregnancy rate according to progesterone concentration in heifers or cows. The pregnancy rate of recipients contained a large follicle at embryo transfer was lower than that of recipients not contained. These results show ultrasonic assessment of ovaries in Holstein recipients is a reliable tool to determine the follicle and CL for recipient selection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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