• KSBB Journal
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• 제13권2호
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• pp.174-180
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• 1998

유럽주목(Taxus baccata Pendula)현탁 세포 배양에서(10-deacetyl) baccatin III 생산을 증진시키는 연구를 하였다. 높은 초기 당 농도가(10-deacetyl) baccain III 생산을 증진시키는 연구를 하였다. 6% 의 초기 포도당과 자당의 경우 1O-deacetyl baccatin III 생산을 각각 3.배와 2.5배씩 증가시켰다. Baccain III도 초기 포도당 8%에서,초기 자당 6%에서 최대값을 보였다. 일리시터로서 methyl jasmonate는(10-deacetyl) baccatin III 의 생성은 $50{\mu}$M에서 최대치를 보였는데 이는 대조구에 비하여 4.5배 증가한 값이었다.Baccatin III 의 경우 methyl jasmonate $100{\mu}$M에서 생성된 Baccatin III 최대치는 대조구에 비하여 7.배 증가한 값이었다. Methyl jasmonate elicitation 에 의한(1O-deacetyl) baccatin III.과 각 taxane의 시간별 생성 경향을 보면 baccatin III와 10-deacetyl baccatin III는 투여 후 1일 까지 생성이 증가하다 그 후부터 감소하였고, paclitaxel, 10-deacetyl taxol 및 cephalomanine 의 생성이 이어졌다. (10-deacetyI) baccatin III의 생합성을 증가시키기 위하여 전구 물질을 투여하였다. Benzoic acid를 $500{\mu}M$로 투여 하였을 때 10-deacetyl baccatin III 및 baccatin III의 생산은 대조구의 비하여 각각 10배와 13배 증가 하였다. Lysine도 $500{\mu}M$로 투여하였을 때 baccatin III 의 생성량을 대조구 보다 8배 증가시켰다. 증가시켰다.

• KSBB Journal
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• 제11권3호
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• pp.263-269
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• 1996

유럽 주목(Taxus baccata Pendula) 의 세포배양에 서 추출한 taxol 전구체 baccatin ill를 이용하여 항암제 taxol을 반합성할 수 있었다. 유럽주목의 캘러 스배양과 현탁배양 모두에셔 baccatin ill의 생성을 확인할 수 있었으며 함량은 건조중량 기준으로 평균 0.015%(w/w)에 달하였다. Taxol의 반합성은 세포 배양에서 생성된 baccatin ill에 taxol side chain을 합성시킴으로서 가능하였다. Taxol side chain을 합 성하기 위하여 (S)-(+)-phenylglycine로부터 (-) - -N-(S)-2-hydroxy-l-phenyl ethyl)benzamide를 합성하였고 다음 단계로 (-)-N-(lS,2S)-2-hy­d droxy-l-phenyl-3-butenyl) benzamide를 합성하 였고 최종적으로 산화과정을 거쳐 taxol side chain 인 (2R,3S) - (-) -2-(1-ethoxyethoxy)-3-phenyl-3 (phenylmethanamido) propanoic acid를 얻을 수 있었다. 이러한 반합성 과정을 통하여 0.0002 % 수준의 taxol 및 0.0005 %의 관련 taxane을 합성하였다. 이와 같이 주목 세포배양을 이용한 taxol 반합성 방법은 기존의 주목 잎에서 추출한 baccatin ill를 이용하는 방법에 비하여 충분한 경제성이 있을 수 있으며 이에 따라 taxo!의 새로운 공급원의 역할 및 기타 여러 종류의 taxol 유사체의 효율적인 이용 등 앞으로 기대 효과가 크다고 본다.

• 한국환경성돌연변이발암원학회지
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• 제16권1호
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• pp.6-12
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• 1996

To investigate the clastogenicity of taxol and its precursor, 10-aleacetyl baccatin III, we performed chromosomal aberration assay with chinese hamster lung cells in vitro. The IC$_{50}$ values of taxol and 10-deacetyl baccatin III were determined as $1/16 \times 10^{-4}$ M (5.34 $\mu$g/ml) and $1 \times 10^{-2}$ M (560 $\mu$g/ml) in MTT assay, respectively. It means that the cytotoxicity of taxol revealed 100 times more cytotoxic than 10-deacetyl baccatin III in chinese hamster lung cell line. Nevertheless the strong positive genetic toxicity of taxol in the bone marrow micronucleus assay in vivo which was recently reported, we observed weak positive clastogenicity of taxoi only in the absence of metabolic activation system in the concentration ranges used in this experiment. Moreover, to clarify the involvement of metabolic fate of taxol because of its strong positive result in vivo, 10-deacetyl baccatin III which is a precursor in taxol synthesis, also subjected in chromosomal aberration assay in vitro. However, we observed no clastogenicity of 10-deacetyl baccatin III in this experiment. From above results, it was suggested that the esterification at C-13 appears to be relative for its genetic toxicity in chromosome aberration using chinese hamster lung cell in vitro.

• KSBB Journal
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• 제14권1호
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• pp.17-23
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• 1999

초임계 이산화탄소 크로마토그래피 방법에 의한 paclutaxel baccatm III, 7-epn-10-deacetyltaxol.cephalomanme, 10-deacetyltaxol의 분리에서 초임계 유체의 압력, 온도 및 이동상의 조성이 미치는 영향을 연구하였다. Pachaxel, 10-deacetylbaccatin III, 10-deacetyltaxol은 압력, 온도, 이동상의 조성 변화에 의하여 우수한 분리 결과를 얻을 수 있었다. Pacltaxel 의 경우 압력 275kg/$\textrm{cm}^2$,온도 $40^{\circ}C$, 이동상 조성을 초기 20분간 초임계 이산화탄소와 보조용매인 메탄올을 각각 3.9~3.6mL/min, 0.1~0.4mL/min의 gradienl조건으로 하였을 때 가장 우수한 분리능을 보였다. Baccatin III, caphalomamine, 7-epn-10-deacetyltaxol의 경우에는 낮은 분리능을 보였다. 주목 분말 시료로부터 paclitaxel 을 정제할 때 on-linc coupled SFE/SFC장치를 이용하여 추출 정제 공정을 단순화하였다. 초임계이산화탄소를 용매로하여 추출, 1차 정제 및 크로마토그래픽 정제 단계를 연속적으로 거쳐 38%수율로 95%paclitazel을 얻을 수 있었다.

• KSBB Journal
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• 제11권3호
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• pp.323-328
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• 1996

Diterpenoid 생합성의 중요한 전구체인 geranyl­g geranyl pyrophosphate의 공급을 위해 외부에서 geraniol을 넣어 주었을 때 taxol을 포함한 일부 taxane의 생산이 증대 됨을 알 수 있었다. 또한 투여 시기와 투여량에 따라 결과가 크게 변화하였다. Camphor와 menthol은 taxol과 같은 terpenoid 계열의 물질이지만 외부에서 공급하였을 때에는 taxol 생산을 증대시키는 효과는 없었다. 외부에서 인위적으로 taxol과 cephalomannine, baccatin ill 를 공급했을 때 모든 경우에서 taxal 생산은 자극받지 않았으며 taxal을 공급했을 경우에는 bacca tin ill 의 생산이, cephalamannine을 공급했을 경우에는 7 -epl- 1 Q-deacetyltaxol의 생산이, 그리고 baccatin ill을 공급했을 경우에는 10-deacetyltaxol의 생산이 각각 가장 많이 중대하였다.

• KSBB Journal
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• 제9권2호
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• pp.186-190
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• 1994

울릉도주목(Taxus cuspidata var. latifolia, 일명 회솔나무)의 각 부위에 함유되어 있는 taxol 및 관련 화합물의 함량을 조사한 결과 taxol 및 cephalomannine함량은 잎에서 높았고, 전구물질인 10-deacetyl baccatin III(10- DAB III), baccatin III의 함량은 수피에서 높았으며, 신초줄기와 종자에 서의 taxane 함량은 매우 낮았다. 또한 울릉도 전역에 자생 또는 재식되어 있는 주목의 taxol 및 전구 물질 10-DAB III의 함량변이를 조사한 결과, 5개 지역(나라분지, 태화령, 현포, 통구미, 도동)의 잎과 수피에서 이틀의 함량은 개체뿐 아니라 지역 사이에 큰 변이를 나타내였다. 분석개체 전체의 잎에서의 평균 taxol 함량( 건물 중 기준으로 0.017% )은 수 피의 것( 0.003 % )보다 월등히 높았으며, 전구물질 1 10-DAB III의 전체 평균함량은 수피(0.073%)가 잎(0.054% ) 보다 약간 높았다. 특히 섬 북서지역에 위 치한 현포지 역 주목 잎의 평균 taxol 함량은 약 0 0.024 %로 이는 보고된 태평양주목의 수피의 것보다 높은 것이며, 전구물질의 함량도 0.049%로 비교적 높았다. 이상의 결과로 지속적으로 채취가 가능한 울릉도주목 잎은 taxol 생산을 위한 중요한 자원이 될 수 있을 것으로 기대된다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제27권8호
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• pp.1379-1385
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• 2017

The content of taxol in the bark of yews is very low, and this is not affordable from the environmental point of view. Thus, it is a necessity to look for alternative sources of taxol production to solve its supply. Currently, a large portion of the taxol in the market comes from chemical semi-synthesis, but the semi-synthetic precursors such as baccatin III and 10-deacetyl-baccatin III are extracted from needles and twigs of yew trees. Taxol-producing fungi as a renewable resource is a very promising way to increase the scale of taxol production. Our group has obtained a taxol-producing endophytic fungus, Aspergillus niger subsp. taxi HD86-9, to examine if A. niger can produce the taxanes. Six compounds from the fermentation broth of strain HD86-9 were isolated and identified by $^1H$ NMR, $^{13}C$ NMR, and ESI-MS. The results showed that the six compounds included four taxane diterpenoids (taxol, cephalomannine, baccatin III, and 10-deacetyl-baccatin III) and two non-taxane compounds (${\beta}-sitosterol$ and flavonoid isovitexin). The study verified that the taxanes can be produced by the A. niger, which is very important to taxol production via chemical semi-synthesis. Additionally, the finding is potentially very significant to solve the taxol semi-synthetic precursors extracted from needles and twigs of yew trees, and the precursor production can be easily increased through the culture condition optimization, genetic breeding, and metabolic engineering of the A. niger.

• Natural Product Sciences
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• 제6권2호
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• pp.96-101
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• 2000

The ethanolic extract of the heartwood of Taxus baccata L. afforded six taxoids, belonging to the skeletally three different groups, $2{\alpha},\;5{\alpha},\;10{\beta}-triacetoxy-14{\beta}-(2-methyl)-butryloxy-4(20)$,11-taxadiene (1), taxusin (2), baccatin VI (3), baccatin III (4), $1{\beta}-hydroxybaccatin$ I (5) and taxol (6). The isolation and structure elucidation of three taxoids (3-5) have been presented in this study. This is the first report for the presence of these taxoids in Taxus baccata L. growing in Turkey.

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제43권3호
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• pp.176-179
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• 2000

Nonpolar taxoides extracted from a large-scale cell culture of Taxus chinensis were isolated through the normal and reverse phase column chromatographies, and their compounds were identified via NMR spectroscopy. The complete separation method was systematically established and described. In dichloromethane, dissolved paclitaxel and other taxoids with hexane were precipitated during the purification of paclitaxel from the plant cell culture of T. chinensis through a large-scale process while the relatively nonpolar taxane derivatives remained dissolved in the hexane phase. 13-Deoxy baccatin III (I), baccatin VI (II), taxchinin I (III), $2{\alpha}$, $5{\alpha}$, $10{\beta}$, $14{\beta}$-tetraacetoxy-4(20), 11-taxadiene(IV), 1-deoxy baccatinVI(V), and taxayuntin C (VI) were isolated through column chromatography and identified via NMR spectroscopy. Compounds I and IV were found to the major components, aside from paclitaxel, in the plant cell culture of T. chinensis. The concentrations of I and IV were compared with the that concentration of the paclitaxel in each of plant cell culture. The possible applications of compounds I, II, IV, and V were discussed.

• Journal of the Korean Wood Science and Technology
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• 제27권3호
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• pp.91-98
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• 1999

우리나라에 식재된 외래주목의 taxol 및 전구체인 10-deacetyl baccatin III(10-DAB III)의 함랑을 조사하기 위해 천리포수목원에 식재된 외래주목의 잎과 줄기로부터 추출하여 HPLC로 정량분석하였다. 외래주목의 잎과 줄기의 taxol 함량은 종간 및 종내, 그리고 부위에 따라 상당한 변이를 보였다. Taxol 함량은 T. X media cv. Vcrmulcun, T. baccata cv. Washingtonii, T. X cuspidata cv. Nana을 제외하고 잎에서 놓았으며, 전구체인 10-deacetyl baccatin III(10-DAB III)는 모든 종의 잎에서 높았다. 그 중 4월에 채집한 T. cuspidata cv. Nigra의 잎의 taxol 함량은 건물중 당 1,027 ${\mu}g$, 10-DAB III 의 함량은 건물중 당 267 ${\mu}g$로 보고된 태평양주목의 함량보다 월등히 높았다. 이종의 부위별 tax이 함량은 생장점 및 자방 조직보다 잎에서 높았으며, 이 결과들은 조직 및 세포배양의 재료로 널리 이용할 수 있을 것이다.