Wnt 신호 전달 과정은 다세포 생물체의 발생 과정에서 세포의 증식이나 분화를 조절하거나 성인 조직에서 항상성을 유지하는데 결정적인 역할을 한다. 따라서 Wnt 신호 전달의 조절에 이상이 생기면 암을 비롯한 다양한 질병이 유발되어진다. 최근 들어서 Wnt 신호 전달의 이상에 의해 유도될 것이라고 생각되어지는 질병의 수가 많아져서, Wnt 신호 전달의 조절에 관심을 갖는 연구자가 많아지고 있다. 많은 리뷰 논문이 출판되었지만, 대부분의 경우 Wnt 전문가들을 위한 특정 논제를 다루는 경우가 많기 때문에, 처음으로 Wnt 신호 전달을 연구하고자 하는 연구자들이 Wnt 신호 전달의 전체적인 흐름을 파악하는데 어려움을 겪는 예가 있다. 본 총설에서는 Wnt 신호 전달 과정을 전체적으로 설명함으로써 Wnt 신호 전달에서 우리가 알고 있는 사실과 앞으로 연구되어야 할 내용들을 이해하고자 한다.
This study was to evaluate the protein profile of seminal plasma using 2-DE in Hanwoo. Seminal plasma was harvested from five mature Hanwoo, and seminal plasma protein was extracted by M-PER Mammalian Protein Extraction Reagent. Proteins were refined by clean-up kit and quantified by Bradford method until total protein was $300\;{\mu}l$. Immobilized pH gradient (IPG) strip was used 18 cm and 3~11 NL. SDS-PAGE was used 12% acrylamide gel. Each gels were visualized by comassie brilliant blue and silver staining. These spots were analyzed by MALDI-TOF MS and searched on NCBInr. The result, 20 proteins of 36 protein spots were searched through peptide sequencing on the NCBInr. 8 proteins profiled by 2-DE were proved through previous bovine studies and the name of each protein was albumin, nucleobindin, clusterin, TIMP-2, spermadhesin Z13, spermadhesin-1 and BSP proteins (BSP 30 kDa and BSP A1/A2). 12 new proteins were ATP synthase, protein MAK16 homolog, Transmembrane protein 214, E3 ubiquitin-protein ligase BRE1A, dual serine/threonine and tyrosine protein kinase, tissue factor pathway inhibitor 2, alpha-actinin-4, RUN domain-containing protein 3B, catenin alpha-1, protein-glutamine gamma-glutamyltransferase 2, plakophilin-1 and inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H1 has not been previously described in the bovine seminal plasma study. These proteins may be contribute to define the type of proteins affecting fertility of male and improve the fertilizing ability of semen in Hanwoo.
Objectives : Mori Follium (Morus alba L. leaf) has been cultivated in many Asian countries. Especially, mulberry leaf has been used as an anti-diabetic remedy in oriental medicine. However, anti-obesity effect of mulberry has not been unknown. In this study, our objectives of study is to investigate the anti-adipogenic effect of mulberry water extract (MLE) and to reveal potential molecular anti-obesity mechanism in 3T3-L1 adipocytes differentiation model.Methods : The cytotoxicity of MLE in 3T3-L1 was examined by MTT assay. Anti-adipogenic effect of MLE was evaluated by Oil Red O (ORO) staining. To elucidate the molecular mechanism, inhibitor assay was employed. The mRNA expression levels of adipogenic transcriptional factors such as PPARγ and fatty acid synthase (FAS) were analyzed by reverse transcription-polymer chain reaction (RT-PCR) analysis.Results : The MLE treatment for 24 h did not affect to the 3T3-L1 cells at concentrations of 1, 10, 100, 200, 400, 800 and 1,000 ㎍/㎖. Thus, non-toxic concentration rages of MLE were used during adipogenesis period (day -2 to 7). Intracellular lipid accumulation in MLE-treated 3T3-L1 adipocytes (day 6) were quantitatively evaluated by ORO staining. The MLE treatment significantly and dose-dependently suppressed 3T3-L1 adipogenesis by 60.42%, 38.24%, and 5.97% at 10, 100, and 200 ㎍/㎖, respectively. In addition, our inhibitor assay and RT-PCR analysis revealed that the MLE-inhibited 3T3-L1 adipogenesis through inhibition of PPARγ mediated by Wnt/β-catenin signaling pathway.Conclusions : In conclusion, these findings indicate that the MLE could be used in prevent and/or treatment of obesity-related diseases.
Adipogenesis is one of the cellular processes and a highly controlled program. Nowadays, inhibition of adipogenesis has received attention as an effective way to regulate obesity. In the current study, we investigated the inhibition effect of a chloroform extract of Pleurotus eryngii var. ferulae 'Beesan No. 2' (CEBT) on adipogenesis in 3T3-L1 murine preadipocytes. Pleurotus eryngii var. ferulae is one of many varieties of King oyster mushroom and has been reported to have various biological activities, including antitumor and anti-inflammation effects. Biological activities of 'Beesan No. 2', a new cultivar of Pleurotus eryngii var. ferulae, have not yet been reported. In this study, we found that CEBT suppressed adipogenesis in 3T3-L1 cells through inhibition of key adipogenic transcription factors, such as peroxisome proliferatoractivated receptor ${\gamma}$ and CCAAT/enhancer binding protein ${\alpha}$. Additionally, CEBT reduced the expression of the IRS/PI3K/Akt signaling pathway and its downstream factors, including mammalian target of rapamycin and p70S6 kinase, which stimulate adipogenesis. Furthermore, ${\beta}-catenin$, a suppressor of adipogenesis, was increased in CEBT-treated cells. These results indicate that Pleurotus eryngii var. ferulae 'Beesan No. 2' effectively inhibited adipogenesis, so this mushroom has potential as an anti-obesity food and drug.
Dyslipidemia, defined as elevated triglyceride (TG), total- and LDL-C, and/or decreased HDL-C levels, is considered a principal risk factor for cardiovascular disease. The low-density lipoprotein receptor (LDLR) family has been considered a key player in the prevention of dyslipidemia. The LDLR family consists of cytoplasmic membrane proteins and plays an important role not only in ligand-receptor binding and uptake, but also in various cell signaling pathways. Emerging reports state that various functional ingredients dynamically modulate the function of the LDLR family. For instance, oats stimulated the LDLR function in vivo, resulting in decreased body weight and improved serum lipid profiles. The stimulation of LRP6 by functional ingredients in vitro activated the Wnt/${\beta}-catenin$ pathway, subsequently suppressing the intracellular TG via inhibition of SREBP1, $PPAR{\gamma}$, and $C/EBP{\alpha}$. Furthermore, the extract of Cistanchetubulosa enhanced the expression of the mRNA of VLDLR, followed by a reduction in the serum cholesterol level. In addition, fermented soy milk diminished TG and total cholesterol levels while increasing HDL-C levels via activation of LRP1. To summarize, modulating the function of the LDLR family by diverse functional ingredients may be a potent therapeutic remedy for the treatment of dyslipidemia and cardiovascular diseases.
Antoine Bouchard;Mariko Witalis;Jinsam Chang;Vincent Panneton;Joanna Li;Yasser Bouklouch;Woong-Kyung Suh
IMMUNE NETWORK
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제20권5호
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pp.36.1-36.13
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2020
Hippo signaling pathways are evolutionarily conserved signal transduction mechanisms mainly involved in organ size control, tissue regeneration, and tumor suppression. However, in mammals, the primary role of Hippo signaling seems to be regulation of immunity. As such, humans with null mutations in STK4 (mammalian homologue of Drosophila Hippo; also known as MST1) suffer from recurrent infections and autoimmune symptoms. Although dysregulated T cell homeostasis and functions have been identified in MST1-deficient human patients and mouse models, detailed cellular and molecular bases of the immune dysfunction remain to be elucidated. Although the canonical Hippo signaling pathway involves transcriptional co-activator Yes-associated protein (YAP) or transcriptional coactivator with PDZ motif (TAZ), the major Hippo downstream signaling pathways in T cells are YAP/TAZ-independent and they widely differ between T cell subsets. Here we will review Hippo signaling mechanisms in T cell immunity and describe their implications for immune defects found in MST1-deficient patients and animals. Further, we propose that mutual inhibition of Mst and Akt kinases and their opposing roles on the stability and function of forkhead box O and β-catenin may explain various immune defects discovered in mutant mice lacking Hippo signaling components. Understanding these diverse Hippo signaling pathways and their interplay with other evolutionarily-conserved signaling components in T cells may uncover molecular targets relevant to vaccination, autoimmune diseases, and cancer immunotherapies.
Hyun-Su Baek;Se-Jin Park;Eun-Gyung Lee;Yong-Il Kim;In-Ryoung Kim
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제28권5호
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pp.423-433
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2024
Dental pulp stem cells (DPSCs) are a type of adult stem cell present in the dental pulp tissue. They possess a higher proliferative capacity than bone marrow mesenchymal stem cells. Their ease of collection from patients makes them well-suited for tissue engineering applications, such as tooth and nerve regeneration. Chios gum mastic (CGM), a resin extracted from the stems and leaves of Pistacia lentiscus var. Chia, has garnered attention for its potential in tissue regeneration. This study aims to confirm alterations in cell proliferation rates and induce differentiation in human DPSCs (hDPSCs) through CGM treatment, a substance known for effectively promoting odontogenic differentiation. Administration of CGM to hDPSC cells was followed by an assessment of cell survival, proliferation, and odontogenic differentiation through protein and gene analysis. The study revealed that hDPSCs exhibited low sensitivity to CGM toxicity. CGM treatment induced cell proliferation by activating cell-cycle proteins through the Wnt/β-catenin pathway. Additionally, the study demonstrated that CGM enhances alkaline phosphatase activation by upregulating the expression of collagen type I, a representative matrix protein of dentin. This activation of markers associated with odontogenic and bone differentiation ultimately facilitated the mineralization of hDPSCs. This study concludes that CGM, as a natural substance, fosters the cell cycle and cell proliferation in hDPSCs. Furthermore, it triggers the transcription of odontogenic and osteogenic markers, thereby facilitating odontogenic differentiation.
Background: A human orthologue of mouse S100A6-binding protein (CacyBP), Siah-1-interacting protein (SIP) had been shown to be a component of novel ubiquitinylation pathway regulating $\beta$-catenin degradation. The role of the protein seems to be important in cell proliferation and cancer evolution but the expression pattern of SIP in actively dividing cancer tissues has not been known. For the elucidation of the role of SIP protein in carcinogenesis, it is essential to produce monoclonal antibodies specific to the protein. Methods: cDNA sequence coding for ORF region of human SIP gene was amplified and cloned into an expression vector to produce His-tag fusion protein. Recombinant SIP protein and monoclonal antibody to the protein were produced. The N-terminal specificity of anti-SIP monoclonal antibody was conformed by immunoblot analysis and enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). To study the relation between SIP and colon carcinogenesis, the presence of SIP protein in colon carcinoma tissues was visualized by immunostaining using the monoclonal antibody produced in this study. Results: His-tag-SIP (NSIP) recombinant protein was produced and purified. A monoclonal antibody (Korea patent pending; #2003-45296) to the protein was produced and employed to analyze the expression pattern of SIP in colon carcinoma tissues. Conclusion: The data suggested that anti-SIP monoclonal antibody produced here was valuable for the diagnosis of colon carcinoma and elucidation of the mechanism of colon carcinogenesis.
Apoptosis is a morphologically and biochemically district form of cell death that occurs in many different cell types in a wide variety of organisms. Albizzia julibrissin belonging the family Leguminosae has been used for the treatment of contusion, sore throat, amnesia, and insomnia in oriental traditional medicine. This study investigates whether the water extract of A. julibrissin induce apoptotic cell death in Jurkat T-acute lymphoblastic leukemia (ALL) cells. Jurkat cells were increased inhibitions of cell viability in a concentration-dependent manner by A. julibrissin. This herbal medicine also caused apoptosis as measured by cell morphology and DNA fragmentation. The capability of A. julibrissin to induce apoptosis was associated with proteolytic cleavage of specific target proteins such as poly (ADP-ribose)polymerase (PARP) and beta-catenin proteins suggesting the possible involvement of caspases. Our result showed that Bcl-2 and Bax protein levels were not changed in all A. julibrissin-treated groups compared to control group. These results suggest that A. julibrissin-mediated apoptosis is independent with Bcl-2 related signaling pathway in this cells. The purpose of the present study is also to investigate the Effect of A. julibrissin on cell cycle progression. Our results showed that G1 checkpoint related gene products (cyclin D1, cyclin dependent kinase 4, retinoblastoma, E2F1) were decreased in their protein levels in a dose-dependent manners after treatment of the extract. These results indicate that the increase of apoptotic cell death by A. julibrissin may be due to the inhibition of cell cycle progression in wild type p53-lacking Jurkat cells.
Objectives : This study was designed to investigate the antiproliferative activity of the water extract of Samgibopae-tang (SGBPT) in NCI-H460 and A549 non-small-cell lung cancer cell lines Methods : In this study, we measured the subsistence, form of NCI-H460 and A549 non-small-cell lung cancer cell by hemocytometer and DAPI staining. In each cell, we analyzed DNA fragmentation. reverse transcription-polymerase chain reaction and measured activity of caspase-3, caspase-8 and caspase-9. Results and Conclusions : We found that exposure of A549 cells to SGBPT resulted in growth inhibition in a dose-dependent manner. butSGBPT did not affect the growth of NCI-H460 cells. The antiproliferative effect by SGBPT treatment in A549 cells was associated with morphological changes. SGBPT treatment partially induced the expression of DR5 cells and the expression of Faswas markedly increased in both transcriptional and translational levels in A549 cells. SGBPT treatment partially induced the expression of Bcl-2, Bcl-XL and the expression of Bid was markedly decreased in translational levels in A549 cells. However, SGBPT treatment did not affect the expression of IAP family in A549 orNCI-H460 cells. SGBPT treatment partially induced the expression of caspase-3, caspase-8, caspase-9 activity which markedly increased in a dose-dependent manners in A549 cells. The fragmental development of PARP and ${\beta}$-catenin protein was observed in A549 cells by SGBPT treatment. SGBPT treatment induced the expression of PLC-${\gamma}1$ protein which decreased in A549 cells. SGBPT treatment partially induced the expression of DFF45/ICAD which markedly increased in a dose-dependent manner in A549 cells. Taken together. these findings suggested that SGBPT-induced inhibition of human lung carcinoma did not affect NCI-H460 cell growth. However, SGBPT-induced inhibition of human lung carcinoma A549 cell growth was associated with the induction of death receptor and mitochondrial pathway. The results provided important new insights into the possible molecular mechanisms of the anti-cancer activity of SGBPT.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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