A Differentiating pathway of hemocytes in vitro and in vivo of grasshopper, Euprepocnemis shirakii was described using light and electron microscopes. In the interior of body, the stem cells of the hemopoietic organ differentiated into six types of cells respectively which are prohemoyte, plasmatocyte, granulocyte I, granulocyte II, spherulocyte and oenocytoid. The formation of these hemocytes was derived from the stem cells surrounded by a reticular cell. Hemopoietic tissue cultured in the insect media differentiated different hemocytes, but none of them underwent any mitotic division. Morphological features of the cultured cells in media were essentially the same as those of the hemocytes differentiated from the stem cells in vivo. These results were shown that each stem cell could differentiate into different types of hemocytes. It was confirmed that the stem cells possessed the pluripotent differentiation ability to directly each hemocyte, and that the once formed hemocytes in vivo and in vitro didn t undergo further transformation to other hemocytes. The maintenance of circulating hemocytes in grasshopper had been depended on the widely spreading hemopoietic organ situated in the upper surface of the dorsal alary muscle and located on the first to eighth segments.
연두·금파리에서 혈구 세포가 면역반응의 일환으로 일으키는 결절형성(nodule formation) 현상을 형태학적으로 관찰하고자 본 실험이 수행되었다. 연두금파리 종령 유충 체내에 정상 효모, 고정된 대모, 세포액이 제거된 원형질체의 효모를 각각 주입하여 면역반응 과정을 전자현미경으로 관찰하였다 먼저 정상 효모를 주입하였을 경우, 효모와 접촉한 헐구의 과립방출과 곧 이은 혈구의 파괴 그리고 효모 주위에 혈림프와 함께 점액성응혈(clot)의 형성을 관찰 할 수 있었다 점액성 응혈에는 여러 유형의 파괴된 혈구가 포함되어 있었다. 이같은 면역반응에는 체내 혈구 중 과립혈구(granulocyte)가 가장 활발히 반응였고 응혈의 대부분을 형성하였다. 결절의 중심부인 응혈은 대모와 파괴되지 않은 혈구 대 파괴된 혈구 그리고 방출된 과립들로 차 있었고, 효모 주입 3시간 까지는 이같은 응혈은 계속 확대되었다. 그러나 10시간 이후에는 응혈이 관찰되지 않았으며 이때 체강내에서 효모가 관찰되곤 하였다. 고정된 효모를 주입하였을 경우에는 혈구파괴나 과립방출 등이 관찰되지 않았으며, 고정된 효모에 대한 혈구의 식 세포작용만이 관찰되었다. 이 식세포작용은 주입후 10시간 까지 계속되었다. 원형질 체의 효모를 주입하였을 경우에는 혈구에의한 면역반응이 관찰되지 않았다.
곤충 혈구의 이물질에 대해 면릉고청을 확인하기 위하여 평균지름 10 nm의 gold입자를 함유한 colloidal gold solution을 등 검은 메뚜기 (Euprepocnemis shirakii Bolivar) 성충의 복강에 주입한 후, 혈구의 반응양상을 전자현미경으로 관찰하였다. Gold 입자에 대한 혈구의 면역반응은 전체 혈구의 약 28%를 차지하고 있는 Plasmatocytes에서 식세포작용(phagocytosis)의 형태로 확인되었고, 다른 종류의 혈구는 반응하지 않았다. Plasmatocytes에 의해 식세포작용의 초기반음은 많은 원형질 돌기를 형성하여 이물질을 포획하는 태면반응과 원형질악의 함입에 의한 식포의 형성과정으로서, 이 과정은 이물질 주입후 10분이내에 완료되는 것으로 관찰되었다. 혈구내에 형성된 식포는 초기에 전자밀도가 낮은, 천상 또는 섬잡상의 내부구조를 가지고 있었으나, 일차 Iysosome의 융합에 의해 전자밀도가 높은 과립상으로 된 후, 결정상의 내부구조로 변형되었으며, 그 이후의 단계에서 multivesicular body형태의 이차 Iysosome을 형성하였다.
The purpose of this study was to analyze the characteristics of hemocytes in the hemolymph of the larvae of Pentodon quadridens bidentulus and the characteristics of the hemocytes responsible for cellular immunity during pathogen infection. Granulocytes, plasmatocytes, oenocytoids, spherulocytes, prohemocytes and adipohemocytes were found in the circulating hemocytes. Among them, granulocyte were observed as cells responsible for immunological phagocytosis during entry of foreign substances. In particular, it was observed that the most active phagocytic action occurred within 12 hours in vivo, and that after 24 hours, the immune activation was reduced and converted to a normal state. Plasmatocytes were occasionally observed as immunological response, but the remaining hemocytes were not related to immunological activation.
In this study, we used electron microscopic analysis to characterize the hemocytes in the last larva of Protaetia brevitarsis seulensis (Colbe) (Cetoniidae, Coleoptera). Granulocytes (GR), plasmatocytes (PL), oenocytoids (OE), spherulocytes (SP), prohemocytes (PR) and adipohemocytes (AD) were classified based on their size and ultrastructural differences in the circulating hemocytes. Many dark granules (<$1{\mu}m$ in diameter) in the GR's cytoplasm were observed and well-developed mitochondria, endoplasmic reticulum (ER), nucleus, and Golgi complex were also seen. After microorganisms infected, the GRs were morphologically activated and phagocytosed them. Especially, dark granules (lysosomes) were fused themselves and these bigger granules finally agglomerate together with microorganisms. Other hemocytes seem to have no immune functions.
After x-ray 5Gy radiation on the whole body of a mouse using a linear accelerator, its leucocyte, erythrocyte, and platelet were observed by SEM. Also, after injecting propolis into the abdominal cavity, the radio-protective effect of blood corpuscles was studied. The observation of micromorphology in blood corpuscles revealed that the number of leukocyte, erythrocyte, and thrombocyte decreased in the experimental group and the lump got together in blood corpuscles after 10 and 20 days. In RBC, crack or break on the surface and poikilosperocytes were observed. In the irradiation group, the size of leucocytes was smaller than that in control group and the number of villus at the verge substantially decreased. The blood corpuscles in the propolis group, however, had the similar results to control group.
Hemocyte parameters of the wild Pacific oyster Crassostrea gigas inhabiting intertidal zones in small bays (Gwangyang and Jinhae Bay) on the southern coast of Korea were evaluated using flow cytometry and neutral red retention (NRR) assay. Morphological features, cell count, mortality, DNA damage, phagocytosis, and lysosomal membrane stability of hemocytes were analyzed. Three types of hemocytes were identified in the oyster hemolymph: granulocytes, hyalinocytes, and blast-like cells. Immune related functions of hemocyte including phagocytosis and lysosomal membrane stability were significantly different among the study areas (P<0.05), while cell count, mortality, and DNA damage of hemocytes were not significantly different. In Gwangyang Bay, phagocytosis of granulocytes and lysosomal membrane stability of oyster hemocytes inhabiting inside bay were significantly lower than those of oyster hemocytes in outside bay (P<0.05), indicating that oysters in inside bay of Gwangyang were relatively suppressed the immunological function in hemocytes. Contrary to Gwangyang Bay, immune parameters of oyster hemocytes in Jinhae Bay not showed the difference between sampling sites. In conclusion, flow cytometry and NRR assay using oyster hemocyte has a powerful tool to investigate the cell level in a short time due to no-preprocessing of material.
Kim, Sang-Woo;Lee, Jong-Young;Park, Wan-Seup;Woo, Kuck-Hyeun
Journal of Preventive Medicine and Public Health
/
v.30
no.3
s.58
/
pp.623-629
/
1997
This is cross-sectional study to evaluate a potential relationship between air conduction hearing threshold and blood viscosity in normal adult males(n=1677). We measured hearing threshold in frequency level at 500, 1000, 2000, 4000Hz by pure-tone audiometry and RBC profiles containing red cell number, hemoglobin, hematocrit. Blood viscosity are replaced by hematocrit that are one major factor of influencing blood viscosity. PTAs(pure-tone averages) are measured by hearing threshold averages level at 500Hz, 1000Hz, 2000Hz. Grades of PTAs(pure-tone averages) are divided three groups that are less then 10.0dB group, between 10.0-19.9dB group and excess 20.0dB. The results shows significant association among hematocrit, red cell number and hearing loss(age adjust by ANACOVA).
To understand host-defence mechanism of clam(Ruditapes philippinarum) hemocyte against foreign materials, classification and their seasonal change in the number were performed. clams collected from a farm in Julpo Bay, Gochang, Chollabuk-Do were used in this experiment. Lots of hemocytes were found between the muscle fibers and connetive tissue of posterior adductor muscle. Hemocytes of R. philippinarum were classified into granulocytes and agranulocytes. Granulocytes were composed of three types, basophilic granulocyte, acidophilic granulocyte and fibrocyte in accordance with the staining affinities of their cytoplasmic granules. Fibrocyte has filopodia and vesicle in endoplasm and bigger than other granulocytes in size. Agranulocytes were less in the number and smaller in the size compared to those of granulocytes. Hyalinocytes had no granule in their cytoplasm. The nucleus located in the center of the cell was oval or spherical shaped. In electron microscopic observation, granulocytes and hyalinocytes contained electron-dense vesicles and some small lucid vesicles in their cytoplasm, respectively. Granulocytes phagocytosed more zymosan particles than hyalinocytes. Acidophilic granulocytes showed higher phagocytic ratio than basophilic granulocytes. Total hemocyte numbers showed the highest at April to August and the lowest at October to December. In the composition of each hemocyte, basophilic granulocytes were always more than acidophilic granulocytes and hyalinocytes.
The antigenecity of somatic substances of S. pullorum standard strain and variant strain extracted byheat treatment, acid treatment and their modification, ammonium sulfate saturation (60 per cent), trypsin digestion was tested by indirest hemagglutination test and precipitation test and following results were optained. 1. Teatment at $100^{\circ}C$ for an hour of the bacteria could extract the antigen of S. pullorum standard strain and variant strain which was demonstrable by hemagglutination reaction with the human a group and chicken red blood cell. 2. Trypsin digestion was more enhanced its antigenecity in acid extracted antigen of S. pullorum variant strain compare with the S. pullorum standard strain. 3. The extracted antigenic substances of S. pullorum standard strain existed chiefly in the elicited fraction of precipitate at the treatment of ammonium sulfate saturation and after trypsin digestion, its antigenecity was demonstrated by hemagglutination. 4. At the treatment of ammonium sulfate treatment, did not occur the precipicate in acid extracted antigens of S. pullorum variant strain, however, the heal extracted antigen, positive reactions were obtained in both of the precipitate and supernatant fraction of the S. pullorum variant strain by hemagglutination reaction. After trypsin digestion, these fraction also exhibited positive reactions. 5. Precipitation test also tested dub could not detect in any soft of the antigens.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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