Intimin, the product of eae gene in EHEC O157:H7, is required for intimate adherence. In this study, the C-terminaI region(281 amino acids) of the EHEC OI57:H7 intimin were expressed as a protein fusion with (His)$_6$ which was used to raise antiserum in rabbits. The antiserum reacted in western blot with a 94kDa outer membrane protein of EHEC O157:H7. It was observed that the antibody titers both in egg yolk and serum appeared in 2${\sim}$4 weeks after immunization with fusion protein. At the time of 8 weeks, the titre of egg yolk was found to be higher than that of sera. According to the results of neutralization test, chicken egg-yolk antibody(lgY) against the recombinant intimin strongly reacted to EHEC O157:H7. We conclude that a truncated recombinant intimin could be used as an immunogen to elicit antibody(lgY) against O157:H7.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.18
no.1
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pp.295-301
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2017
Botulinum neurotoxin (BoNT/A) is a neurotoxin that selectively attacks the peripheral cholinergic nerve endings. It is produced by Gram -positive, endospore-forming strict anaerobic bacteria, Clostridium botulinum. Since BoNT/A could be a biothreat agent, as well as a contaminator of food and water supplies, the development of sensitive assays for toxin detection and potent antitoxin for the treatment of intoxication is necessary. In this study, for the purpose of producing monoclonal antibodies (mAbs) that are capable of neutralizing Botulinum neurotoxin type A (BoNT/A), scFv (single-chain variable domain fragment) libraries from the rabbit antisera against BoNT/A was fused to a human IgG. The resulting recombinant scFvIgG antibody protein was expressed in stable cell lines and was purified using a protein A affinity chromatography. The efficacy of scFvIgG mAb was confirmed by ELISA and was evaluated for the neutralization of BoNT/A in vivo. Such an in vivo toxin neutralization assay was performed using mice. Although scFvIgG antibody proteins (10 ug) failed to fully protect the mice challenged with BoNT/A (100,000 $LD_{50}$), it significantly prolonged the survival time. These results suggest that scFvIgG mAb may be capable of neutralizing BoNT/A single-chain variable domain fragment.
Kang, Kye Wool;Yoon, Hwa Jun;Park, Seok Won;Kim, Hwang Min;Kim, Jong Soo
Pediatric Infection and Vaccine
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v.9
no.1
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pp.67-73
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2002
Purpose : Despite of the appropriate measles vaccination programs, epidemics occur every 2~3 years and especially occurred in large group in late of 2000 and early of 2001. To evaluate the effect of the vaccination, needs for revaccination and to determine the optimal age for revaccination, we examined measles specific IgG and IgM in mealses patients and investigated different antibody appearance according to vaccination history. Methods : Anti-measles antibodies were checked in sera of 201 patients(male : 117, female : 84) that are responsible for Criteria for Disease Control among 298 patients that are suspicious of measles including inpatients and outpatients in Wonju Christian Hospital from June in 2000 to June in 2001. They were checked by immunofluorescent assay. Then we classified them according to sex, month, distribution of age due to vaccination and appearance of measles antibody. Results : The ratio of male and female was 1.4 : 1. The maximum incidence was 38 cases(18.9%) in May in 2001. Incidence was increased from November in 2000 to January in 2001 and decreased in February and March in 2001. Thereafter it was increased from April in 2001 again and decreased from June. There were 93 cases(46.3%) in vaccinated group and 108 cases(53.7%) in unvaccinated group. In the distribution according to age in vaccinated group, there were 54 cases(58.1%) in more than 10 years old, 15 cases(16.0%) between 7 and 10 years old, 12 cases(12.9%) between 15 months and 3 years old, 6 cases (6.5%) between 4 and 6 years old and 6 cases(6.5%) between 6 months and 14 months old. In the distribution according to age in unvaccinated group, there were 88 cases(81.5%) between 6 months and 14 months old, 9 cases(8.3%) between 15 months and 3 years old, 7 cases(6.5%) less than 6 months old, 3 cases(2.8%) more than 10 years old and 1 case(0.9%) between 7 and 10 years old. In the distribution of measles specific IgG and IgM, 78 cas (87.6%) were IgG(+), IgM(+) and 11 cases(12.4%) are IgG(+), IgM(-) in vaccinated group. In unvaccinated group, there were 69 cases(63.9%) of IgG(+), IgM(+) and 39 cases (36.1%) of IgG(-), IgM(+). Con c lu s i on s : We thought that measles incidence was peaked between 6 months and 14 months old in unvaccinated group because of maximum decrement of transplacental matenal antibody and was peaked in more than 10 years old in vaccinated group because of maximum decrement of measles specific IgG. We think that measles revaccination as well as vaccination and especially optimal age for revaccination is very important to prevent measles successfully.
Lee Taek-Jin;Choi Min Sook;Lee Young-Mock;Kim Ji-Hong;Kim Pyung-Kil;Jeong Hyeon-Joo
Childhood Kidney Diseases
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v.5
no.2
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pp.219-224
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2001
Antiphospholipid syndrome is a thrombotic disorder characterized by the association of arterial and venous thrombosis with the antibodies directed toward phospholipids. The presence of these antibodies in systemic lupus erythematosus(SLE) has been shown to be related to several clinical and analytical alterations. We experienced one case of lupus nephritis with positive antiphospholipid antibodies in a 10-year-old girl whose chief complaint was persistent microscopic hematuria. We report this case with a brief review of related literatures. (J. Korean Soc Pediatr Nephrol 2001 ;5 : 219-24)
An in vitro immune effector mechanism against the target encysted metacercariae of Paragonimus westermani was demonstrated in the rat system. Peritoneal exudate cells, mainly macrophages from normal rats, showed adherence to and killing of encysted metacercariae of p. westermani in the presence of complement-independent serum from rats infected with Paragonimus metacercariae. These reactions were specific for the excysted metacercariae, as tissue-migrating juvenile worms were not affected. Damage of encysted metacercariae of p. westermani due to antibody and macrophages was assessed by morphological observation, by cell adherence reaction and by the use of vital dyes. frypan blue dye exclusion proved to be a reliable indicator of judging metacercarial viability. Electron microscopic studies demonstrated that macrophages reacted with fusty material on the tegumental surface and fine structures in the syncytium of the parasites. The tubular tunnels formed between the basement membrane and muscle layers of the damaged parasites were also noticeable. The relevance of these findings to cellular immunity in the early paragonimiasis was discussed.
The current study was conducted to investigate the effects of administration of antiserum against adipocyte plasma membrane(APM) proteins into rats on body fat mass. Twenty(20) male adult Sprague-Dawley rats were randomly allocated into either control or antiserum treatment group(10 rats/treatment) and immunized with physiological saline(control group) and polyclonal antiserum (treatment group), respectively, raised in sheep against rat APM proteins(5times, 2day interval). All animals were killed 4weeks after last injection. Intraperitoneal(i.p.) administration of antiserum significantly(P=0.0054 and P=0.0019, respectively) reduced subcutaneous(21.9%) and perirenal + mesentric + epididymic(36.0%) adipose tissue mass in rats of treatment group. Although body weights of antiserum treated rats were decreased during immunization, the rats recovered their body weight after 1 week of treatment. There were no significant changes in the level of blood glucose and in the contents of muscle protein and fat in antiserum treated animals. Current results indicate that polyclonal antibodies against APM proteins could be used to manipulate body fat mass in meat animals as well as laboratory animals. Further studies, however, are necessary for the practical applications of the current results.
Jin Kim;Jong-Yil Chai;Weon-Gyu Kho;Kyu-Hyuk Cho;Soon-Hyung Lee
Parasites, Hosts and Diseases
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v.29
no.1
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pp.21-30
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1991
An immunohistochemical study was performed to demonstrate comparative antigenicity of each body structure of the liver fluke, Clonorchis sinensis, such as the digestive tract, reproductive organs, excretory system, tegument and suckers. Indirect immunoperoxidase technique was applied, rising formalin-fixed and paraffin-embedded sections of C. sinensis as the antigen. Pooled cat sera obtained 10 weeks after an experimental infection with C. sinensis and peroxidase-conjugated goat anti-cat IgG were used as the primary and secondary antibodies, respectively. The intensity of immunohistochemical stain was very sensitive upon the titers of the primary and secondary antibodies, and their optimum dilutions were found to be 1:1,000∼1:2,000 and 1:1,000, respectively. The intestinal epithelial cells, intestinal content and excretory bladder showed strong positive coloring reactions even at lower titer (1 : 2,000) of the primary antibody, whereas the uterine wall and eggs, vitelline glands, and male reproductive organs showed only weak positive reactions despite an increase in the antibody titer (1:1,000). On the other hand, the suckers, tegument, subtegumental cells and other parenchyme portions did not reveal any positive immunoperoxidase reaction at the same antibody titers. From the above results, it is highly suggested that the most potent antigenicity of C. sinensis occur from their excretory-secretory substances originated from the digestive and excretory organs.
Cholelithiasis is rarely recognized in children, especially in infants. Hemolytic disorders, long-term total parenteral nutrition (TPN), congenital anomalies of the biliary tree leading to stasis of bile flow, congenital IgA-deficiency, furosemide treatment, and prolonged fasting have been reported as predisposing factors for cholelithiasis in childhood. Hemolytic disease of the newborn due to anti-E has rarely been reported as a risk factor for cholelithiasis. We report a case of gallbladder stones in a neonate associated with anti-E antibody hemolytic disease.
Jeon, Nak-Beom;Lee, Hyang-Burm;Shon, Dong-Hwa;Yu, Seung Hun
Research in Plant Disease
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v.9
no.2
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pp.94-98
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2003
To produce antibodies against Pseudomonas tolaasii and P. agarici, lyophilized P. tolaasii and P. agarici ($5{\times}10^7$ cfu/ml) and Freund, s adjuvant were immunized into rabbits 4 times. The specificity and sensitivity of the antibodies were evaluated by immunodiffusion test and indirect enzyme-linked immunosorbent assay (id ELISA). The ${\alpha}$-P. tolaasii antibody was very specific only against P. tolaasii, while ${\alpha}$-P. agarici antibody was not specific and showed a high cross reactivity toward P. tolaasii with detection limit concentration of $2{\times}10^3$ cfu/ml. However, the cross reactivities of ${\alpha}$-P. agarici antibody toward the related species including P. reactans were very low. Our results showed that ${\alpha}$-P. tolaasii and ${\alpha}$-P. agarici antibodies against P. tolaasii and P. agarici, respectively, might be useful for rapid and simple detection of the causal agents of bacterial brown and yellow blotches in cultivated oyster mushrooms.
Kwon, Young Ok;Choi, Im Jeong;Jung, Jin Wha;Park, Ji Hyun
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.50
no.3
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pp.262-267
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2007
Purpose : The prevalence of hepatitis A virus (HAV) in a certain community reflects that community's living standards and hygienic conditions. And the pattern of HAV infection differs over time and geography. Recently, a shift in prevalence has been observed in cases from chilhood to adulthood. We studied the HAV antibody prevalence in the general population in Busan. Methods : From October 2004 to March 2005, total 472 subjects were tested for HAV antibodies. All samples were collected from patients in Maryknol Hospital. Results : The overall seropositive rate was 22.8% (108/472). The seropositive rates were 1.7% in subjects aged 2-5 years, 1.7% in 6-10 years, 0% in 11-20 years, 40.5% in 21-30 years, 82.1% in 31-40 years, 94.7% in 41-50 years, and 100% in subjects aged over 50 years. There was no significant gap between gender groups. Conclusion : As the socioeconomic conditions in Korea have improved, the HAV seropositive rate in school-aged children has dramatically decreased in the last 20 years. But, the seropositive rate of HAV didn't differ according to gender. The seropositive rate of HAV in the pediatric group was very low, which suggests the increasing possibility of clinical HAV infection in adults in the near future. Therefore, we should actively prevent the spread of hepatits A virus. In order to do that, we need to reorganize our lifestyle and personel hygiene and carry out active and passive immunization to high risk groups.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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