Proceedings of the Korean Aquaculture Society Conference
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2004.05a
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pp.355-355
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2004
난생 경골어류의 성분화는 내인성 및 외인성 성스테로이드 호르몬의 영향을 받는 것으로 알려져 있지만, 해산 태생 경골어류의 성분화 과정에서 성스테로이드 호르몬의 작용은 아직 명확하게 밝혀져 있지 않다. 본 연구에서는 유용 양식어종의 하나인 해산 태생어류 조피볼락 Sebastes schlegeli를 대상으로 이 종의 성분화에 미치는 성스테로이드 호르몬의 영향을 조사하였다. 실험에 사용한 조피볼락은 출산후 일령 45일 전후의 성이 미분화한 개체들이었다. 실험어는 3개 실험군으로 나누어 (각각 3반복), 1개월간 각각 estradiol-l7${\beta}$ 또는 methyltestosterone을 처리하였고, 하나의 실험군은 호르몬 처리를 하지 않았다 처리기간 동안에는 각 실험군으로부터 무작위 sampling을 실시하여, 호르몬 처리에 따른 체내 성스테로이드 호르몬 변화를 조사하였으며, 각 실험군의생식소 분화과정을 조직학적으로 조사하였다. 성스테로이드 호르몬은 diethylether로 추출한후, rndioirmmunoassay 방법 (RIA)으로 분석하였다. 실험결과 대조구의 실험어는 1:1의 자연성비에 부합하는 성분화 결과를 나타내었지만, estradiol-17${\beta}$ 처리구는 자성화, methyltestosterone 처리구는 웅성화하는 경향을 나타내었으며, 이러한 성분화 shift는 외부에서 투여한 호르몬이 실재 내부호르몬양의 변화를 초래하여 이루어졌음이 RIA 분석에 의해 부분적으로 확인되었다. 본 연구의 결과는 해산 태생 경골어류의 성분화 역시 성스테로이 드호르몬의 작용에 의하여 매개 또는 조절되어진다는 사실을 제시한다. 하지만 태생어류에서 이 호르몬의 실질적 작용 메카니즘 및 명확한 작용시기에 대해서는 보다 많은 연구가 요구되어 진다.을 설계하는 것이 가능하였다.적(最適) 온도(溫度)는 $30^{\circ}C$, avicelase와 ${\beta}-glucosidase$의 최적(最適) pH는 5.0, CMCase는 pH 5.5 이었으며, 균사(菌絲) 생육(生育)은 pH 5.0에서 양호(良好)하였다. 배양(培養) 기간(期間)은 avicelase가 8일(日), CMCase가 10일(日), ${\beta}-glucosidase$는 16 일간(日間) 배양(培養)하였을 때 최대치(最大値)를 보였고, 균사(菌絲) 생육(生育)은 12일(日) 배양(培養)했을 때 가장 양호(良好)하였다.가한 반면, 중국인들은 고소한 향의 강도, 고소한 향의 기호도, 전체적인 맛에서 뚜렷하게 일본참기름을 우수하게 평가하였다.s의 항체(抗體)로 반응(反應)시킨 후 protein-A gold(15 nm)로 표식(標識)시킨 바 제일 바깥 상층(上層)의 keratinocyte에 있어서 세포막표면(細胞膜表面)을 따라 표식(標識)되어 세포막항원(細胞膜抗元)을 나타내었으며, 이와 같은 소견(所見)으로 미루어 정상피부(正常皮膚) 중층편평상피세포(重層扁平上皮細胞)에서도 동일(同一)한 소견(所見)을 관찰(觀察)할 수 있다고 본다.al remnants, Resorption of fetus로 관찰된 것이다. Fetal death는 수정후 $14{\sim}18$일까지의 사망으로써 Maceration of fetus로 관찰되는 것이다. 통계학적 분석은 각 Group의 착상 을과 자궁 내 사망 율을 산출할 때에는 각 임신마우스에 따라 발생빈도가 크게 다르기 때문에 통계처리에는 Non parametric 검정인 Kluskal Wallis 검정을 사용하여 분석하였다. 또한 개체 Level 영향인 착상을, 태아사망,
Park, Jiyeon;Choi, Heeju;Lee, Hyejin;Ahn, Jung Hoon
Journal of Life Science
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v.30
no.5
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pp.420-427
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2020
A repebody, an artificial non-immunoglobulin protein scaffold, is expected to be a solution in the search for faster, cheaper, and customizable antibodies. However, the production of medical repebodies remains difficult due to their low yield and the complex purification processes required. The Pseudomonas fluorescens ABC transporter system has been suggested as an efficient and cost-effective method for repebody production, but the total yield is low because of the secreted protein's positive charge; thus, a repebody with a high isoelectric point needs to be changed into a more negatively charged protein for better secretion. To achieve this, we first attached oligo-aspartic acids to the N- and C-terminals of the repebody, but secretion efficiency was not enhanced significantly. Subsequently, we devised an alternative method for improved secretion efficiency by engineering fifteen positively charged amino acids to aspartic acid in the non-antigen binding sites of the repebody to give a high net negative charge. As a result, secretion efficiency was greatly enhanced from 21.2% (wildtype) to 58.5% (negatively supercharged). The negatively supercharged repebody was succussfully produced extracellularly by ABC transporter secretion system in P. fluorescens.
대략 36,000 base pairs (bp)의 두 가닥짜리 DNA를 지놈으로 가진 사람 아데노바이러스 (Ad)는 DNA 상동성(相同性) 및 생물학적/생화학적 성격이 특이한 49개의 혈청형이 알려져 있는데, 이들 대부분의 Ad가 영유아군 및 면역능이 저하된 성인에서 치사적 결과를 초래할 수 있다. Ad의 세포향성(向性)(tropism)은 매우 다양하여 종류에 따라 상기도 감염, 각결막염, 영유아 장염등을 유발하는데 최근 Ad의 다양한 병원성에 대한 원인을 분자생물학적 수준에서 규명하려는 노력의 일환으로 지역에 따라 주되게 출현하는 Ad형 규명이 활발히 이루어지고 있다. Ad 동정/확인은 표면을 이루고 있는 group 공통항원인 hexon 단백질을 탐지하는 효소면역 측정법 (EIA)에 의하며, Ad형별은 Ad fiber의 세포독성 중화시험에의 한다. 그러나, 세포독성 중화시험이 엄청난 노동력 및 시간을 요구하면서도 민감도/특이도가 만족스럽지 못하여 이를 개선하기 위하여 검체 또는 세포배양에서 Ad DNA를 추출하여 제한효소 절단형태를 비교하는 방법이 개발되었는데 이는 세포배양에 잘 자라지 않는 바이러스주의 형별뿐만 아니라 지역 분리주들의 지놈 변형주를 관찰하는 분자생물학적/분자역학적 연구에도 도움이 되고 있다. 국내에는 Ad와 관련된 소아장염의 빈도가 rotavirus에 의한 것 다음으로 빈번한데도 Ad40/41외에 주되게 출현하는 장내 Ad형들이 전혀 규명된 바 없고, 한국형 Ad들의 지놈형태가 전혀 보고된 바가 없다. 또한 세계적으로 Ad형별 조사지역이 늘어감에 따라 유아장염과 연관된 Ad 역시 Ad40, 41이 외의 형들이 Ad40, 41을 능가하는 것으로 보고되고 있는 지역도 있으나 국내에서는 Ad40, 41이외의 형들은 그 역학적 중요도가 전혀 알려져 있지 않다. 이로서 본 연구의 목적은 Ad주들에 특이 중화항체를 이용한 세포독성 중화시험과 Ad DNA 절단법을 적용하여 한국형 장내 Ad주들의 형별을 처음으로 시도함과 동시에 1989-1991사이 출현한 Ad들의 유전적 변형을 관찰하려는 것이었다. 두 방법 모두 사용하였을 때 주되게 출현하는 장내 Ad형들은 Ad4l, Ad2, Ad7, Ad5, 및 Ad40이었다. Ad40/41-양성 검체를 제외한 Ad hexon-EIA양성들의 77.5%를 형별 할 수 있었던 Ad DNA의 제한효소 절단방법은 형들간의 교차중화로 특이성이 낮았던 중화방법 (47.5%)보다 매우 효율적이어서 두 가지 방법을 함께 적응하였을 때는 40주중의 81.5%인 35주를 형별 할 수 있었다. 또한Ad DNA 제한 효소 절단방법은 Ad7 변이주 (Ad7b)도 탐지 할 수 있었다.
최근 들어 국내에서도 홍수에 의한 재산과 인명피해를 최소화하기 위해 지역특성에 알맞은 홍수지도를 제작 중에 있으며, 주로 LiDAR를 이용하여 홍수지도 지형자료를 구축하고 있다. 그러나 이에 많은 시간과 비용이 소요되기 때문에 이미 전국적으로 구축된 수치지형도를 이용한 홍수지도 지형자료 구축의 가능성과 타당성을 검증의 필요성이 제기되고 있다. 이에 따라 본 연구에서는 수치지형도를 이용한 홍수지도제작시 가장 핵심이 되는 정확한 지형자료구축을 위해서 Breakline처리기법과 하천종횡단자료 연계방안을 중심으로 구리시 일부지역을 대상으로 DEM을 시범제작 하였다. 수치지형도와 LiDAR를 이용하여 구축한 DEM을 검수점을 통한 RMSE오차를 이용하여 수직위치정확도를 비교분석하였다. 분석을 위하여 선행연구(홍수지도제작, 2002)에서 검수점으로 사용한 9점과 제방부분의 실측한 9점을 본 연구의 검수점으로 사용하였다. 비교 결과 RMSE가 수치지형도 DEM의 경우 ${\pm}2.658m$이고, LiDAR DEM의 경우 ${\pm}3.430m$로 나타났다. 두 자료 모두 알려진 오차범위보다 훨씬 높은 오차가 발생함을 알 수 있었다. 향후 수치지형도를 이용한 효율적인 홍수지도 지형자료 구축을 위해서는 수치지형도의 신속하고 지속적인 갱신이 필요할 것이며, 현재 도시지역에만 구축되어 있는 1:1,000 수치지형도를 주변 하천지역까지 확대해서 구축해야 할 필요성이 있을 것으로 사료된다. 아울러 도입초기단계의 LiDAR 측량기술의 보급과 관련모델의 기술의 발달로 인하여 정확도 높은 DEM이 요구된다면 고밀도의 방대한 양의 LiDAR 자료로 DEM을 구축하는 것이 바람직하다고 사료된다.및 이용대책을 수립하는 데 활용될 수 있다., $1,000-2,000{\mu}g\;g^{-1}$), 나머지 177종 식물은 살초활성을 나타내지 않았다. 높은 살초활성을 나타낸 식물로부터 분리되는 천연활성물질들은 향후 새로운 제초제 개발을 위한 모화합물 제공, 상호대립억제 작용성을 갖는 작물 품종 개발 혹은 개량에의 활용, 그리고 친환경 유기농업용 잡초방제에의 활용이 기대된다.내(皮膚上皮組織內)의 Langerhans cell내(內)의 Birbeck granule에 비(比)해 수적(數的)으로 현저히 감소(減少)되어 있었다. 그러나 Thy-1 양성(陽性) dendritic cell에서 볼 수 있는 dense-core 과립(顆粒)은 별변화(別變化)없이 쉽게 관찰(觀察)될 수 있었다. 조직배양(組織培養)을 한 견(犬)의 keratinocyte에 대(對)해 사람 pemphigus vulgaris의 항체(抗體)로 반응(反應)시킨 후 protein-A gold(15 nm)로 표식(標識)시킨 바 제일 바깥 상층(上層)의 keratinocyte에 있어서 세포막표면(細胞膜表面)을 따라 표식(標識)되어 세포막항원(細胞膜抗元)을 나타내었으며, 이와 같은 소견(所見)으로 미루어 정상피부(正常皮膚) 중층편평상피세포(重層扁平上皮細胞)에서도 동일(同一)한 소견(所見)을 관찰(觀察)할 수 있다고 본다.al remnants, Resorption of fetus로 관찰된 것이다. Fetal death는 수정후 $14{\sim}18$일까지의 사망으로써 Maceration of fetus로 관찰되는 것이다. 통계학적 분석은 각 Group의 착상 을과 자궁 내 사망 율을 산출할 때에는 각 임신마우스에 따라 발생빈도가 크
Neutrophils play a key role as a first line of defense and are known to acquire the characteristics of dendritic cells (DCs) under the appropriate conditions. The spontaneous apoptosis of neutrophils was delayed by treatment with 4-(2-aminoethyl) benzensulfonylfluoride (AEBSF), a serine protease inhibitor. AEBSF inhibited both caspase-3 and serine protease activities, whereas ZVAD-fmk, a pancaspase inhibitor, inhibited only caspase-3 activity. The life span of neutrophils was prolonged up to 5 days by AEBSF in the presence or absence of granulocyte macrophage colony stimulating factor(CM-CSF). DC surface markers, such as CD80, CD83, and MHC class ll were not expressed on neutrophils treated with AEBSF alone. CM-CSF failed to prolong the survival time of neutrophils up to3 days but increased the expression levels of DC markers on neutrophils in the presence of AEBSF. Expression levels of DC markers were the highest on neutrophils treated with CM-CSF and AEBSF for 3 days. AEBSF and CM-CSF-treated neutrophils stimulated proliferation of T cells in the presence of a superantigen, Staphylococcal enterotoxin B (SEB) but produced $interferon-{\gamma}$ ($IFN{\gamma}$) in the absence of SEB. These results suggest that the inhibition of serine protease activity prolonged the life span of human neutrophils and combined treatment of neukophils with CM-CSF and serine protease inhibitor induced differentiation of neutrophils into DC-like cells.
NK cells are lymphoid immune cells that participate in innate immunity to protect against foreign pathogens and transforming cells. It is known that the activity of NK cells is regulated by a balance between activating and inhibitory signals rather than specific antigens. One important activating signal is mediated by the NKG2D receptor, which recognizes NKG2D ligands on cancer cells. Therefore, tumor cells that express sufficient amounts of NKG2D ligands could be eliminated by NKD2D+ cells, including NK cells. Oncogenes drive tumor cells to apoptosis resistant and uncontrolled proliferation by altered expression of many critical genes. Therefore, the expression of NKG2D ligands may be affected by oncogenes. This study focused on increasing the susceptibility of cancer cells to NK cells by regulating the expression of NKG2D ligands influenced by three oncogenes: k-ras, wnt, and c-myc. We demonstrated that inhibition of k-ras and c-myc increased the expression of NKG2D ligands and enhanced the susceptibility of cancer cells to NK cells. On the contrary, inhibition of the wnt pathway decreased MICA and ULBP1 transcripts. Although the decreased transcription of NKG2D ligands by inhibition of the wnt pathway, surface proteins of NKG2D ligands were not changed, and the susceptibility of HCT-116 cells was unaffected. The results demonstrate that the transcription of NKG2D ligands are regulated deferentially by the k-ras, c-myc, and wnt pathways and that the cytotoxicity of NK cells solely depends on the amount of surface NKG2D ligands.
Seo, Seok-Ran;Ryu, Sung-HunO;Oh, Gwi-Ok;Kim, Hyung-Seop
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.30
no.4
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pp.895-913
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2000
It is becoming increasingly clear that human gingival fibroblasts(HGF) may play a role in regulating immune responsiveness in inflammatory periodontal lesions. Stimulation of HGF with locally-secreted T cell cytokine $IFN_{\gamma}$ induces human leukocyte antigen class II(HLA II) expression on HGF, which is one of the characteristic feature of professional antigen presenting cells(pAPC). However, $IFN_{\gamma}$-treated HGF and other nonprofessional antigen presenting cells(npAPC) are known to be ineffective or less effective antigen presenter to resting T cells. This study, therefore, was undertaken in an effort to elucidate the differences in expression of cell surface molecules between npAPC in periodontal tissues, such as HGF and periodontal ligament fibroblasts(PDLF), and pAPC such as monocytes/macrophages. Using flow cytometry, the levels of cell surface expression of HLA-D, ICAM-1, LFA-3, and B7-1, which are involved in antigen presentation, were determined in HGF, PDLF and human myelomonocytic cell line THP-1. $IFN_{\gamma}$ clearly induced HLA-D expression on both of fibroblasts and monocytes dose dependently. However, expression level on monocytes were 4 to 5 times higher than that on fibroblasts, and induction rate was faster in monocytes than in fibroblasts. The levels of ICAM-1 expression on fibroblasts and monocytes were enhanced by $IFN_{\gamma}$ in a dose dependent manner. On the other hand, the expression of LFA-3 molecule, which could be detected in fibroblasts and monocytes without cytokine stimulation, was no more enhanced by addition of $IFN_{\gamma}$. B7-1, important costimulatory molecule in T cell activation and proliferation, was not detected on both of fibroblasts and monocytes even when stimulated with $IFN_{\gamma}$, except on monocytes fully differentiated by pretreatment of PMA and treated by $IFN_{\gamma}$. These results suggest that delayed expression of HLA-D and absence of B7-1 on $IFN_{\gamma}$ - treated fibroblasts may at least in part be involved in the ineffectiveness of fibroblasts as primary APC. And it is postulated that although periodontal fibroblasts may not serve as primary APC in normal periodontium, sustained expression of HLA II on ubiquitous fibroblasts in inflammatory lesions may perpetuate immune responses and produce chronic inflammation and tissue injury.
Kim, Do-Soon;Park, Jung-Eun;Cho, Hyun-Wook;Joo, Woo-Hong;Yee, Sung-Tae
Journal of Life Science
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v.17
no.3
s.83
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pp.427-434
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2007
Dendritic cells (DCs) play a pivotal roles in the initiation of T cell-mediated immune responses, making them an attractive in immuno vaccines. Angelica gigas and Cnidium officinale were a medicinal herb widely used in Asian countries. In this study, we examined the effects of A. gigas and C. officinale extracts on the DCs functional maturation and phono-type. Immature DCs were cultured in the presence of GM-CSF and IL-4, and the generated immature DCs were stimulated with OVA in the presence or absence A. gigas and C. officinale extracts, respectively, for 24 hours. The antigen-presenting capacity of A. gigas and C. officinale extracts-treated DCs as analyzed by $CD4^+$ helper T cell clone (OVA-specific) proliferation and cytokines (IL-2 and $IFN-{\gamma}$) production were significantly increased. But A. gigas and C. officinale extracts were not directly effected $CD4^+$ helper T cell clone function. Also, the expression of surface co-stimulatory molecules, including major histocompatibility complex (MHC) class II, CD86 and CD11c, is increased on DCs that were stimulated with A. gigas and C. officinale extracts. These results indicate the immunomodulatory properties of A. gigas and C. officinale extracts, which might be medical supplies or health foods.
Park, Jun Eun;Choi, Kang Duk;Kim, Sung Hwan;Hahm, Dae-Hyun;Seo, Jong Jin
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.48
no.7
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pp.779-788
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2005
Purpose : Echinacea, a traditional plant medicine has been used as immune-stimulant. Recent studies have revealed that extract of Echinacea has immunostimulatory effects on human blood mononuclear cells. This study was designed for the purpose of screening the genes associated with immunologic effects of Echinacea on monocytes and dendritic cells using a cDNA microarray chip. Methods : $CD14^+$ monocyte cells were cultured for one day with Echinacea extract(final concentration : $50{\mu}g/mL$) in experiment 1, but were cultured without Echinacea in experiment 2. The gene expression of these cultured monocytes was analyzed using the cDNA microarray chip. Dendritic cells produced from $CD14^+$ monocyte were cultured for five days with GM-CSF and IL-4, and then cultured for one day with Echinacea in experiment 3, but were done without Echinacea in experiment 4. Results : In experiments 1 and 2, there were 17 significantly expressed genes with average expression ratios above 2.5, including interferon gamma-inducible protein 30(IFI 30), CDC(cell-division-cylcle)-like kinase 2(CLK 2), syndecan binding protein(syntenin), superoxide dismutase 2, etc. In experiments 3 and 4, there were 24 gene, with significantly expressed genes were 24 genes, which were insulin-like growth factor 2(somatomedin A), methyl-CpG binding domain protein 3, IFI 30, small inducible cytokine subfamily A, member 22, etc. The genes encoding CD44, IFI 30, mannose receptor C type 1(MRC 1), chemokine receptor 7(CCR 7), CLK 2, syntenin and cytochrome C oxidase subunit VIII were significantly expressed in both monocytes and dendritic cells cultured with Echinacea. Conclusion : This study employed a cDNA microarray chip to elicit the immune-associated gene profile; the expression was enhanced by Echinacea in CD14+ monocytes and dendritic cells. Thus we laid the basis for the quantitative and functional analysis of genes induced by Echinacea in monocytes and monocyte-derived dendritic cells.
Yea Sung Su;Jang Won Hee;Yang Young-Il;Lee Youn Jae;Kim Mi Seong;Seog Dae-Hyun;Park Yeong-Hong;Paik Kye-Hyung
Journal of Life Science
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v.15
no.1
s.68
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pp.38-44
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2005
Infection with hepatitis B virus (HBV) is a major health problem worldwide. Although a tremendous amount has been known about HBV, there have been obstacles in the study of HBV due to the narrow host range of HBV limited to humans and primates. In the present study, we investigated the susceptibility to HBV infection of mouse hepatoma cell line, Hepa-1c1c7. In addition, based on that human hepatocytes infected by HBV increase the expression of the pro-inflammatory cytokine TNF-a, the inducibility of TNF-a expression by HBV in the cells was determined. HBV surface antigen (HBsAg) secretion was measured by the microparticle enzyme immunoassay and steady state mRNA expression was analyzed by quantitative competitive RT-PCR. Transient transfection of Hepa-1c1c7 cells with HBV expression vector resulted in a dose-dependent induction of TNF-a expression. Infection of Hepa-1c1c7 cells with the serum of HBV carrier also increased TNF-a mRNA expression. Both in the transfected and infected cells, HBV mRNA was expressed and significant HBsAg secretion was detected. There was no significant variation in $\beta-actin$ mRNA expression by HBV. These results demonstrate that HBV is infectious to Hepa-lc1c7 in vitro and the viral infection induces TNF-a expression, which suggests that Hepa-lc1c7, a mouse hepatoma cell line, may be a possible model system for analysis of various molecular aspects of HBV infection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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제 18 조 (손해배상)
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제 19 조 (관할 법원)
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[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.