The constituents from the needles of the pine tree, Pinus densiflora, were purified and investigated for antithrombotic activity. The needles were initially extracted three times with 70% ethanol, and the extract was sequentially fractionated with chloroform and n-butanol. The aqueous layer formed after n-butanol fractionation was subjected to purification by medium pressure and high pressure liquid chromatography. The two neolignans, 2, 3-dihydro-7-hydroxyl-3-hydroxymethyl-2-(4'-hydroxyl -3-methoxyphenyl)-5-benzofuranpropanol-3-O-${\alpha}$-rhamnopyranoside (a neolignan glycoside) and 2, 3-dihyro-3-hydroxymethyl-7-methoxy-2-(4'-hydroxyphenyl-3'-methoxy)-5-benxofuran propanol 4'-O-${\alpha}$-rhamnopyranoside (icariside $E_4$) were identified by $^1H$ and $^{13}C$ NMR spectra. The effect of the purified compounds, the neolignan glycoside and icariside $E_4$ on thrombin inhibition were investigated by measuring thrombin clotting time in plasma. As a result, the clotting of the neolignan glycoside was delayed four times compared to that of icariside $E_4$. In addition, an analysis of the inhibition effect by changing the concentration showed that the clotting time was delayed in accordance with an increase in the concentration of the neolignan glycoside. Furthermore, we examined the interaction of thrombin and fibrinogen to clarify the action mechanism. As a result, the delay of clotting time in the response of thrombin and pure fibrinogen may indicate that neolignan glycosides inhibit the thrombin action in a direct manner, leading to the suppression of fibrin generation.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.20
no.3
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pp.423-428
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2019
The role of angioembolization has increased because of increases in nonoperative treatment for traumatic splenic injury. We report here a case of successful treatment of iatrogenic pseudoaneurysm of the femoral artery by thrombin injection with coil embolization. A 55-year-old female was admitted to our hospital because of blunt trauma. Computed tomography (CT) revealed a grade V splenic injury with contrast extravasation; therefore, angioembolization was performed. Three days after admission, follow-up CT scan revealed rebleeding from the spleen, and repeat angioembolization was performed. Seven days after admission, an approximately $7.0cm{\times}4.0cm-sized$ pseudoaneurysm was found on follow-up CT scan and there was no bleeding from the spleen. Although thrombin was injected into the aneurysmal sac, there was still inflow of blood, as observed on color-doppler ultrasound. Therefore, coil embolization to the neck of the aneurysm was performed. On angiography, there was no contrast filling into the sac. The size of the pseudoaneurysmal sac had decreased on follow-up CT scan, and the patient was discharged to home without complications. We successfully treated a giant pseudoaneurysm of the femoral artery using thrombin and coil embolization.
An aptamer-based biosensor using a new redox indicator has been examined for the electrochemical detection of thrombin. The aptamer modified primary aliphatic amine was covalently immobilized onto poly-(5,2':5',2"-terthiophene-3'-carboxylic acid) (polyTTCA) layer. Tetrabromophenolphthalein ethyl ester (KTBPE) was interacted to aptamer and used as an electrochemical indicator. Prior to the detection, the oxidation reaction of KTBPE onto aptamer modified layer was also investigated using differential pulse voltammetry. The characterization of the final sensor (KTBPE/aptamer -polyTTCA) was performed by voltammetry, QCM, and ESCA. After binding of thrombin onto KTBPE/aptamer based sensor, the peak signal of KTBPE was gradually decreased. The sensor exhibited a dynamic range between 10.0 and 100.0 nM with the detection limit of $1.0{\pm}0.2nM$.
This study was performed to investigate the biological activities of Hericium erinaceus fruiting body, including antioxidative, fibrinolytic, thrombin inhibitory and ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activities. The water extract of H. erinaceus was fractionated into hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and water fractions, and each of these fractions was individually assayed. The water extract showed high antioxidative activity at 87.78%. The water fraction showed the highest extraction yield at 35.68% (w/w). In the fraction activity tests, butanol and water fractions showed strong antioxidative activities at 87.91% and 92.27%, respectively. Assays for fibrinolytic activity indicated that only the ethyl acetate fraction has significant efficacy at 2.96 plasmin units/mL. The 10-fold dilution of hexane fraction showed high thrombin inhibitory activity, and ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity at 77.67% and 90.53%, respectively. In conclusion, solvent fractions of H. erinaceus can be used as materials for the development of biofunctional foods to prevent cardiovascular diseases.
To investigate the physiological activities of hot water extract and solvent fractions isolated from Pleurotus ferulea, antioxidative, fibrinolytic, thrombin inhibitory, and ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activities were examined. Pleurotus ferulea, hot water extract was fractionated into hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and water fraction. Each of these was assayed individually. The antioxidative activities of ethyl acetate and butanol fractions were 86.79% and 87.82%, respectively. Using the fibrin plate method, only the ethyl acetate fraction showed a plasmin activity of 0.08 units/ml. Thrombin inhibitory activities of chloroform and ethyl acetate fractions were 74.90% and 71.08%, respectively. In the ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity test, butanol fraction showed the highest activity at 49.67%. From the above results, we anticipate that solvent fractions of Pleurotus ferulea can be used as a materials for the development of biofunctional foods for cardiovascular diseases.
Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is a common malignant tumor in the oral cavity, comprising up to 90% of oral cancer. Oral cancer is characterized by a marked tendency of local invasiveness and is good for early detection and treatment; therefore, it is recognized as a good model for cancer prevention. The present study investigated the antioxidant, thrombin inhibitory, and anti-invasive activities of the solvent fractions of Zingiber officinale Roscoe. Samples were fractionated into hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol, and water fractions, and each of these was assayed individually. The water fraction showed the highest extraction yield at 9.79%(w/w). Anti-oxidative activity was analyzed by DPPH assay. Thrombin inhibitory activity was used to analyze thrombin inhibitor assay. Cell viability was detected by the MTS assay. The activity and mRNA expression of MMP-2 and MMP-9 in human oral squamous carcinoma YD-10B cells were examined by zymography and RT-PCR. The antioxidative activities of hexane and water fractions were 92.38% and 92.96%, respectively. In the thrombin inhibitory activity test, water fraction was the highest, with a value of 65.86%. MMP-2/-9 activation was increased in phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)-induced YD-10B cells. MMP-9 activation was increased in thrombin-treated YD-10B cells. In PMA- or thrombin-treated YD-10B cells, the increased mRNA expression and protein activation of MMP-2/-9 were significantly inhibited in the hexane fraction. Therefore, the hexane fraction obtained from a Zingiber officinale Roscoe water extract is a promising therapeutic anti-invasive agent in oral cancer.
The fructus of Crataegus pinnatifida Bunge has been used as medicinal and food source in worldwide. In this study, a strong direct thrombin inhibition and antithrombosis activity were identified from the methanol extract of C. pinnatifida Bunge fructus. The solvent fractionation of fructus extract using hexane, ethylacetate, butanol revealed that the butanol fraction has a prominent antithrombin activity. Thrombin time(blood-clot formation time) and activated partial thromboplastin time(aPTT) extended to 835% and 315% by addition of the butanol fraction at concentration of 1.25 mg/mL, whereas thrombin time extended to 287% by addition of aspirin at concentration of 1,25 mg/mL. The butanol fraction showed anthrone-positive and weak ninhydrine-postive reaction. The thrombin inhibitory activity was not related to previously reported flavonoids or polyphenols. The activity was maintained against acid treatment(0.5 N HCl for 120 min), but rapidly lost by heat-treatment($100^{\circ}C$ for 30 min). Our results suggested that fructus of C. pinnatifida Bunge with non-heat treatment process could be developed as a natural source of antithrombosis.
Protease Nexin-1 (PN-1) inhibits the activity of several serine proteases including thrombin, urokinase (uPA)-type plasminogen activator and trypsin. Tissue- and reproductive organ-specific mRNA levels of the PN-1 were investigated in Sprague-Dawley adult rat. PN-1 mRNA expression in rats was found in brain (forebrain, hindbrain), heart, liver, lung, ovary and oviduct. The level of PN-1 mRNA in male and female among the tissues was the highest in forebrain of the female. PN-1 expression in reproductive organs was found only in ovary and oviduct. These results suggest that PN-1 expression is dependent on the sex and may be related to folliculogenesis and early embryogenesis.
Park, Hwa-Jin;Rhee, Man-Hee;Park, Kyeong-Mee;Nam, Ki-Yeul;Park, Ki-Hyun
Journal of Ginseng Research
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v.17
no.2
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pp.131-134
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1993
Panaxadiol (PD) from Korean red ginseng C.A. Meyer did not control the concentration of cytosolic free $Ca^{2+}$ influxes by thrombin (5 $\mu$/ml). However, PD strongly inhibited the synthesis of thromboxane. $A_2$ (TX$A_2$) in the aggregation of human platelets induced by thrombin (5 $\mu$/ml). These rexults suggest that PD blocks the any Pathway transforming to TX$A_2$ from arachidonic acid (AA) which release out of plasma membrane phospholipids by $Ca^{2+}$-dependent phospholipase C or phospholipase $A_2$. It may be also concluded that PD has the antiplatelet function by inhibiting the synthesis of TX$A_2$, which known to be the potent stimulator of the aggregation of human platelet.
The disease diagnosis system has been developed using the thin nitride(Si3N4) cantilever arrays which can measure the difference of capacitances between sensor and reference. The system consists of 32-bits RISC(Reduced Instruction Set Computer), RAM/Flash, bus, communication IP's, ADC(Analog Digital Converter) board, and LCD display. The marker selection method, which give us the good accuracy from reasonal numbers of markers, is suggested. The developed system has the resolution under 1fF and can detect 10nM concentration of Thrombin.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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