본 연구는 최근 한방자원, 사료자원, 바이오에너지 자원 등 다양하게 이용되는 국내 자생 억새(Miscanthus sinensis)의 대량생산 및 신품종 개발을 위한 조직배양체계 확립을 위해 수행되었다. 이를 위해 억새 완숙종자로부터의 캘러스 유도와 재분화를 위한 식물생장조절제의 적정농도를 규명하였다. 억새의 성숙종자유래 배발생 캘러스 유도를 위해 2,4-D, IBA, NAA를 1~10 $mg{\cdot}L^{-1}$의 농도로 단용 처리한 결과, 5 $mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-D 처리에서 가장 높은 85.3%의 캘러스 유도율과 캘러스의 증식을 보였으며 조직배양 과정 중 갈변화율도 가장 낮았다. 또한, 캘러스의 재분화를 위해 옥신인 NAA와 Kinetin, 2-iP, 또는 BAP 등의 사이토키닌을 혼용 처리한 결과, 각각 19.0%~59.0%, 23.0%~67.3%, 14.7%~83.7%의 재분화율을 보여 NAA와 BAP의 혼용 처리구가 NAA와 Kinetin 또는 2-iP와 혼용 처리구보다 식물체 재분화에 효과적이었다. 특히 3 $mg{\cdot}L^{-1}$ NAA와 5 $mg{\cdot}L^{-1}$ BAP 혼용 처리된 배지에서의 재분화율이 83.7%로 가장 높게 나타났으며, 캘러스 당 재분화 식물체 개수도 5.5개로 동일농도의 2-iP 또는 Kinetin 혼용 처리 시 2.1 및 2.0개보다 많았다. 본 연구결과 억새 성숙 종자로부터의 배발생 캘러스 유도에는 5 $mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-D가 그리고 캘러스의 재분화에는 3 $mg{\cdot}L^{-1}$ NAA와 5 $mg{\cdot}L^{-1}$ BAP 혼용 처리가 가장 효율적이었다. 본 연구를 통해 확립된 조직배양체계는 억새의 대량생산 및 신품종 개발에 유용할 것으로 판단된다.
알스트로메리아는 절화 국제 시장에서 가장 중요한 작물 중 하나이다. 특히 긴 개화기간, 다양한 꽃 색깔, 그리고 저온적응성이 높고 배양기간 동안 낮은 에너지를 필요로 한다. 알스트로메리아는 낮은 증식률, 긴 시간이 걸리는 배양 과정, 높은 바이러스 감염율 때문에 기내 배양 기술이 오늘날까지 계속해서 발전해왔다. 캘러스 유도는 직접적인 식물체 발생 방법에 비해 다양한 배양 부위를 가지고 있고 캘러스만 유지를 잘한다면 캘러스를 유지하면서 식물체 분화를 동시에 할 수 있어 대량 증식에 많은 이용이 가능하다. 본 연구에서는 효율적인 캘러스 유도를 위한 다양한 호르몬과 품종을 비교하여 실험을 진행하였다. 마디 및 마디사이를 배양하여 실험을 진행한 결과, 8주 후부터 캘러스가 발생하기 시작하였고, 마디사이에 비해 마디에서의 캘러스 발생율이 높게 측정되었다. 또한 2,4-D와 picloram을 비교한 실험에서는 2,4-D를 처리한 배지에서 캘러스 발생율이 최대 2배 이상 높게 측정되었다. 이러한 결과를 이용하여 알스트로메리아 대량증식 시스템 체계 확립 및 신품종 육성에 도움을 줄 것이라 생각되어진다.
나리는 세계 5대 절화에 속하는 주요 절화 중의 하나이며, 아시아, 유라시아 및 북아메리카 등 다양한 지역에 서식한다. 나리 신품종개발을 위해서는 교배, 돌연변이 및 선발육종 기술 외에 조직배양 기술을 포함하는 생명공학기술 도입을 통한 신품종 육성이 필요한데 조직배양 체계확립은 나리 육종체계에 있어서 필수적인 요소 중 하나이다. 조직배양의 많은 분야 중 배발생캘러스를 이용하여 식물체 재분화 증식 체계확립이 많은 작물에서 연구 중인데 본 연구에서도 배발생캘러스 유도에 사용되는 오옥신 중 picloram을 다양한 농도로 처리하여 최적의 배발생캘러스 유도 농도를 선정하고자 실험을 수행하였다. 실험 결과, 3-4주 후부터 CEC (compact embryogenic callus), FEC (friable embryogenic callus) 및 백색캘러스 이렇게 3가지 형태 캘러스가 발생했는데 1.0 mg/l 처리구에서 CEC와 FEC 모두 높은 효율을 나타내었으나 갈변율이 높은 관계로 0.75 mg/l를 나리 배발생캘러스 유도에 적합한 최적 농도로 선정하였다. 이러한 연구결과는 향후 배발생캘러스를 이용한 나리 식물체 재분화 체계 확립 그리고 우량품종 증식체계 확립에 기여할 것이다.
은행 (Ginkgo biloba L.) 세포의 최적 배양 조건과 유 용 성분의 생산 가능성을 규명하기 위해 은행의 각 부위로부터 캘러스를 유도, 배양하였으며 유용 성분을 검출, 분석하였다. 기내에서 무균적으로 발아시킨 은행의 유식물체로부터 잎과 줄기, 그리고 은행 성숙 종자로부터 배 (embryo)를 적출하여 2mg/ P N NAA와 5mg/ P kinetin이 첨가된 WP 고형배지에 서 캘러스를 유도시켰다. 세포 기원 별로 선발된 3 종류의 캘러스를 각각 1mg/P NAA와 O.lmg/ P kinetin이 첨가된 MS 액체배지( 3 % sucrose, pH 5 5.8)에서 16시간 광주기로 계대배양하였을 때 엽록 소를 다량 함유한 green callus를 형성 하였고, 배 유래의 캘러스가 가장 빠른 성장을 나타냈다. TLC 및 EMS를 이용하여 flavonoid 및 그 전구물질 퉁 의 유용물질을 확인한 바, 앞에서 검출되지 않은 flavonoid의 전구물질 퉁이 캘러스에서 확인되었다.
본 연구는 글라디올러스 Topaz'를 재료로 액체진탕배양에 의한 캘러스의 증식효율을 향상시키기 위하여 수행되었다. 캘러스는 2,4-D 10mg/L가 첨가된 MS고체배지에 목자 외식체를 배양하여 유도하였다. 액체진탕배양에 의한 캘러스의 증식은 2,4-D 0.05 mg/L가 첨가된 MS배지를 사용하여 2$0^{\circ}C$, 16시간 일장하에서 배지를 100 mL 삼각플라스크에 20 mL 분주하고, 수평회전식 진탕배양기의 회전속도를 75 rpm으로 하였을 때 증식속도가 가장 빨랐다. 또한 동일 배지에서 캘러스의 계대배양 역시 가능하였다.
본 연구는 넓은잎 딱총나무 잎으로부터 유도된 캘러스의 형태학적 특성과 효능에 관한 것이다. 딱총나무에서 유도된 캘러스 내의 세포들을 촬영한 표면주사현미경 사진에서 분열능이 높은 세포의 특성을 보여주었다. 유도된 넓은잎 딱총나무 캘러스를 생물반응기 내에서 배양시켜 얻은 딱총나무 식물세포배양 추출물은 DPPH 제거 및 $PPAR{\alpha}$ 활성 실험결과에서 자유라디컬 제거능 및 항염증 효능이 높게 나타났다. 이러한 딱총나무 캘러스 세포 배양 추출물은 화장품의 항노화 신소재로서 응용될 수 있다.
한국초지조사료학회 1999년도 제24회 정기총회 및 프로그램, 제37회 학술발표회 및 특별강연 초록
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pp.73.2-74
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1999
Orchardgrass의 종자배양 유래의 캘러스를 현탁배양하여 현탁배양기간별 부정배형성정도와 식물체 재분화율 등에 대한 몇 가지 실험을 수행한 바, 2주 간격으로 4회계 대배양 하였을 때 계대배양 횟수가 증가됨에 따라 식물체 재분화율이 증가되었다. 종자배양에서 형성된 캘러스의 현탁배양에서 모양이 둥근세포와 그들의 세포괴는 배양 30일 후에 최대치를 나타내었고, 그 이후는 감소하였다.(중략)
한국초지조사료학회 1999년도 제24회 정기총회 및 프로그램, 제37회 학술발표회 및 특별강연 초록
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pp.74-74
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1999
Bentgrass의 형질전환식물 생산을 위하여 유전자총 (Gene-gun) 및 Agrobacterium기법을 이용하여 형질전환을 시도한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 캘러스의 유도 및 증식 : Bentgrass (Agrostis palustris)의 종자를 MS-5 배지 (MS 기본배지, 2,4-D 5mg/L, casein hydrolysate 2g 포함)에 치상하여 캘러스를 유도하였다. 유도된 캘러스는 증식을 위하여 MS-3 배지 (MS기본배지, 2,4-D 3mg/L, casein hydrolysate 2g 포함)에서 2주 간격으로 subculture 하였다.(중략)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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