• 제목/요약/키워드: 조직재생

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헛개나무의 현탁배양세포로부터 체세포배발생과 식물체 재생 (Somatic Embryogenesis and Plant Regeneration in Embryogenic Cell Suspension Cultures of Hovenia dulcis Thunb)

  • 이성호;;김나영;김명조;조동하;이동욱;이재근;임정대;유창연
    • 한국약용작물학회지
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    • 제14권4호
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    • pp.255-260
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    • 2006
  • 본 연구를 통해 헛개나무의 기내유묘의 조직절편으로부터 배발생캘러스의 유기 및 2차 배형성, 그리고 배발생캘러스의 현탁배양계로부터 체세포배를 대량생산하여 식물체로 재분화시키는 시스템을 확립하였다. 현탁배양을 통해 배발생세포의 유도 및 증식에는 모두 $30^{\circ}C$의 고온이 효과적이었는데 이와 같은 온도조건에서 배발생캘러스 유도율과 배발생캘러스의 생장량은 각각 100%와 894.6 mg로 $25^{\circ}C$에 비해 1.53배와 9.19배로 높게 나타났다. 배발생세포를 $18^{\circ}C$에서 배양할 경우 체세포배로 전환되었고 배양 5주후 체세포배로 발달하였으며 $25^{\circ}C$ 이상의 배양온도에서는 배발생세포는 증식만 할뿐 체세포배는 형성되지 않았다. 체세포배로부터 식물체의 형성은 $18^{\circ}C$ 저온에서만 가능하였다. 배지에 0.1과 0.5 mg/l BA를 첨가할 경우 식물체 재분화율은 37%와 28%로 생장조절물질을 처리하지 않은 배지에 비해 2.2배와 1.7배로 높게 나타났다 재분화된 식물체의 성장에 주는 무기염의 영향을 조사하기 위하여 유식물체를 MS와 1/3MS 고체배지에 옮겨 배양한 결과 1/3MS배지가 줄기신장과 뿌리의 유도에 적합하였다.

흡연이 흡수성 차폐막을 이용한 조직유도재생술의 치유에 미치는 영향 (Influence of Smoking on Short-Term Clinical Results of Periodontal Bone Defects Treated with Regenerative Therapy Using Bioabsorbable Membranes)

  • 강태헌;설양조;이용무;계승범;김원경;정종평;한수부
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • 제30권2호
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    • pp.305-324
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    • 2000
  • This study compared the short-term(4 months) clinical results of regenerative therapy with bioabsorbable membranes($BioMesh^{(R)}$) and bone allograft for the treatment of periodontal(intrabony and furcation) defects in smokers and nonsmokers.(16 smokers) 32 subjects with 92 defects participated in the study(46 in smokers and 46 in non-smokers). This study also evaluated a bioresorbable barrier with and without decalcified freeze-dried bone allograft(DFDBA). The 92 periodontal defects were randomly treated with either the resorbable barrier alone or resorbable barrier in combination with DFDBA following thorough defect debridement and root preparation with tetracycline. Each patient received both types of treatment modalities. Clinical examinations(probing depth, gingival recession, clinical attachment level, plaque index and gingival index) were carried out immediately before and 4 months after surgery. Significant(p<0.001) gains in mean attachment level were observed for both smokers(2.93mm) and non-smokers(3.30mm) but there were not significant difference between two groups. Similarly, significant reductions in mean probing depthshowed for smokers(4.52mm) and non-smokers(4.26mm). However, when comparing gingival recession, smokers were found to exhibit significantly poorer treatment results(1.59mm vs 0.96mm, p<0.05). Using the split-mouth-design, no statistically significant difference between the two modalities could be detected with regard to pocket depth reduction, gingival recession, or attachment gain. These results illustrate that the attachment gain is better in the non-smoker and the best in the non-smoker with the combination therapy of resorbable barrier and DFDBA than with resorbable barrier alone but smoking had no significant effect on clinical treatment outcome, even though smokers show more significant gingival recession. In addition, both treatments, either resorbable barrier plus DFDBA or resorbable barrier alone, promoted significant resolution of periodontal defects but the addition of DFDBA with a bioabsorbable membrane appears to add no extra benefit to the only membrane treatment.

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Cilostazol에 의한 뇌혈관내피세포의 세포이동 증진 효과연구 (Cilostazol Promotes the Migration of Brain Microvascular Endothelial Cells)

  • 이세원;박정화;신화경
    • 생명과학회지
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    • 제26권12호
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    • pp.1367-1375
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    • 2016
  • Cilostazol은 phosphodiesterase III의 선택적 저해제로 알려져 있으며, 뇌졸중 치료에 일반적으로 사용되고 있다. Cilostazol을 처리한 경우, 국소 뇌허혈이 발생한 후에 혈관신생을 통해서 혈관형성이 향상된다는 것을 본 연구자들이 발표하였다. 혈관신생은 조직의 허혈상태를 극복하기 위해서 혈관재생을 촉진하는 중요한 과정으로써, 혈관내피세포의 증식, 이동, 모세관구조 형성의 다단계 과정으로 구성되어 있다. 이에 본 연구에서는 인간 뇌혈관내피세포를 이용하여 cilostazol이 혈관신생의 각 단계들에 어떤 영향을 미치는지 조사하였다. Cilostazol은 농도의존적으로 뇌혈관내피세포의 이동성을 촉진하였으나, 뇌혈관내피세포의 증식과 모세관구조 형성에는 영향을 미치지 않았다. Cilostazol이 세포이동을 조절하는 기전을 분석하기 위해서 cDNA microarray를 수행하였고, 세포이동에 관련성이 있는 5종의 후보 유전자들을 선택하여 real-time PCR을 통해 해당 유전자의 발현을 검증하였다. Cilostazol에 의해서 발현양이 조절되는 유전자들로써, phosphoserine aminotransferase 1 (PSAT1)와 CCAAT/enhancer binding protein ${\beta}$ ($C/EBP{\beta}$)은 발현이 증가하였고, tissue factor pathway inhibitor 2 (TFPI2), retinoic acid receptor responder 1 (RARRES1), RARRES3는 발현이 감소하였다. 이상의 결과를 통해서 cilostazol이 혈관내피세포의 이동을 촉진하여 혈관신생을 향상시킬 수 있음을 제안할 수 있으며, 뇌혈관내피세포에 대한 cilostazol의 조절기전에 대해서 더욱 상세히 규명을 한다면 혈관형성을 통하여 허혈성 질환을 치료할 수 있는 유용한 정보가 될 것으로 기대한다.

Thidiazuron이 반하(半夏)의 자구(子球) 및 식물체 재생에 미치는 영향 (Effect of Thidiazuron on the Formation of Micro-tubers and Plantlet Regeneration of Pinellia ternata T.)

  • 김재광;조혜경;유창연;안상득;임학태
    • 한국약용작물학회지
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    • 제5권1호
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    • pp.21-27
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    • 1997
  • 반하의 조직배양을 통한 대량증식방법 확립의 일환으로 실시한 기내배양에서의 소괴경형성 및 식물체 분화에 영향을 미치는 배지 NAA와 Thidiazuron의 최적조건을 구명하고져 실시한 실험의 결과는 다음과 같다. 1, 식물생장조절물질로 NAA와 TDZ을 단독처리 할 때 TDZ $0.5\;{\mu}M$에서 shoot수가 45개로 가장 양호하였으며 root분화는 NAA 2.0 mg/l 에서 가장 양호하였다. 2. NAA 0.1 mg/l +TDZ $2.0\;{\mu}M$ 조합처리에서 shoot분화가 가장 양호하였으며 NAA 2.0 mg/l +TDZ $2.0\;{\mu}M$ 처리시에 가장 저조하였다. 3. 반하의 소괴경 형성은 MS배지에서는 TDZ $5.0\;{\mu}M$ 단독처리와 NAA 0.1 mg/l +TDZ $2.0\;{\mu}M$ 처리에서 소괴경 형성이 가장 양호하였다. B5배지에서는 TDZ $1.0\;{\mu}M$ 단독처리와 NAA 1.0 mg/l +TDZ $5.0\;{\mu}M$ 처리에서 소괴경 형성이 가장 양호하였으나 생체중은 NAA 0.1 mg/l 와 TDZ $5.0\;{\mu}M$의 단독처리에서 생체중이 가장 무거웠다. 4. MS, MG, B5배지조성에 따른 소괴경형성은 MG배지에서 30일배양후 가장 양호하였으며 생체중도 좋았다. 5. 분화된 식물체 뿌리분화에는 IAA보다 NAA가, MS 보다 1/2MS가 더 효과적인 결과를 보여 1/2MS배지에 NAA 2 mg/l 를 처리하였을 때 23.3개의 뿌리가 유도되어 가장 높은 결과를 보였다. 완전분화된 식물체를 vermiculite가 담긴 포트에 이식하여 온실에서 순화시킨 결과 80%정도의 생존율을 보였다.

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시판 약물의 시토크롬 2J2 약물대사효소 저해능 탐색 (Screening of Potential Anticancer Compounds from Marketed Drugs: Aripiprazole, Haloperidol, Miconazole, and Terfenadine Inhibit Cytochrome P450 2J2)

  • 류광현
    • 생명과학회지
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    • 제21권11호
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    • pp.1558-1564
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    • 2011
  • CYP2J2는 치료약물 및 아라키돈산과 같은 내인성 화합물의 대사에 중요한 역할을 수행하고 있는 효소이다. 최근, CYP2J2 단백질이 인체 종양 조직이나 종양 세포주에 과발현되어 있고, CYP2J2 효소의 작용에 의해 생성된 에폭시에이코사트리에논산(EETs)이 세포사멸을 방지한다는 것이 보고되었다. 본 연구는 시판중인 약물 120종을 대상으로 시토크롬 2J2 동종효소에 저해능을 가지는 화합물을 발굴하고자 하였다. 인체 간 마이크로솜 시료에 아스테미졸과 NADPH 재생성계 및 약물(50 ${\mu}M$)을 첨가한 후 15분간 반응시켜 생성된 대사물을 LC/MS/MS를 이용하여 분석하여 시토크롬 2J2 동종효소 활성의 변화를 평가하였다. 그 결과 할로페리돌, 터페나딘, 아리피프라졸, 미코나졸의 순으로 CYP2J2 효소 활성 저해능을 보였다. 미코나졸은 CYP2J2에 의해 매개되는 에바스틴($IC_{50}$=11.2 ${\mu}M$) 및 터페나딘($IC_{50}$=2.2 ${\mu}M$) 대사를 강력하게 저해하였다. 터페나딘 또한 CYP2J2 매개 에바스틴 대사를 농도 의존적으로 저해하였다($IC_{50}$=13.6 ${\mu}M$). 향후, 이들 약물을 대상으로 한 항암 활성 평가가 필요할 것으로 판단된다.

혈소판 농축 혈장과 혼합된 합성골 및 이종골 이식재가 치주 조직의 재생에 미치는 효과 (A Comparative Study of the effects of Synthetic and Xenogenic Bone grafts with PRP (Platelet Rich Plasma) technique on Periodontal Regeneration)

  • 김영주;임성빈;정진형
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • 제31권4호
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    • pp.737-747
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    • 2001
  • Regeneration of Periodontium with PRP does not only improve regeneration rate and density of bone but have a possibility to estimate faster healing process for soft tissue. And also, synthetic bone and xenogenic bone graft are effective on regeneration of periodontium. The purpose of this study is to evaluate the effectiveness of synthetic bone ($Biogran^{(R)}$) and xenogenic bone ($BBP^{(R)}$) grafts with the PRP technique on regeneration of periodontium. 52 Generally healthy Pt. who had pocket depth 5mm at any of 6 surfaces of the teeth were in the study at Dept. of Perio. in Dankook Dental Hospital. Open Flap was treated for 18 infra-bony pockets as control group, $Biogran^{(R)}$ with PRP was inserted for 25 infrabony pockets as first test group, and $BBP^{(R)}$ with PRP was inserted for 22 infrabony pockets as 2nd test group. Then evaluation was made after 3 and 6 months 1. 6 months after surgery, each difference of average probing pocket depth was $2.61{\pm}0.23$ for control, $3.40{\pm}0.30$ for 1st test, and $3.45{\pm}0.37$ for 2nd test group. 2. 6 months after surgery, each difference of clinical probing attachment level was $1.39{\pm}0.12$ for control, $2.88{\pm}0,24$ for 1st, and $2.86{\pm}0,27$ for 2nd test group. 3. 6 months after surgery, each difference of Maximal probing attachment level was $1.11{\pm}0.16$ for control, $3.28{\pm}0.30$ for 1st, and $3.27{\pm}0.35$ for 2nd test group. 4. There were significant differences for clinical change of each three group which were between average probing pocket depth and clinical attachment level of 3,6 months and minimal and maximal attachment level after 6 months 5. There were significant differences for average probing pocket depth which were only at control group and 2nd test group between 1 and 6months. For clinical attachment level and minimal and maximal proving attachment level, there was a significant difference after 6month of surgery. 6. There was no significant difference between two test groups for average probing depth, clinical attachment level, and minima1 and maximal probing attachment level. As the result, PRP with bone graft is very effective for regeneration of periodontium and there is no difference between xenogenic bone and synthetic bone.

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Tetracycline 처리된 조직유도재생술용 차폐막의 약제유리양상 및 구조적 변화 (Desorption Kinetics and Structural Changes of Tetracycline Treated Barrier Membranes for Guided Tissue Regeneration)

  • 이성미;정현주
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • 제27권1호
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    • pp.1-17
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    • 1997
  • Tetracycline is known to be effective in eliminating periodontopathogens and have collagenolytic activity. This study was performed to observe the desorption kinetics and structural changes of tetracycline-treated barrier membranes for guided tissue regeneration. Four kinds of barrier membranes were tested : $Tefgen^{(R)}$(American Custom Medical, USA) and $Gore-Tex^{(R)}$(W.L. Gore & Associates Inc., USA) as nonresorbable membranes ; Resolut(polyglycolide & polylactide copolymer, W.L. Gore & Associates Inc., USA) and $Biomend^{(R)}$(collagen, Collatec Co., USA) as resorbable membranes. The membranes were cut into discs(diameter : 4mm) and were immersed in 5% tridodecylmethylammonium chloride(TIMAC) ethanol and air-dried. The membrane discs were absorbed with $100{\mu}g/ml tetracycline solution(pH8) for one minute and dried. For desorption kinetics, TC treated discs were immersed in phosphate buffered saline solution (PBS, pH 7.4). PBS was exchanged daily and TC concentration was measured by absorbance at 276nm on UV spectrophotometer. To measure remaining antibacterial activity, discs of 1 day to 4 weeks after desorption were placed on Mueller Hinton agar containing Bacillus cereus and incubated aerobically in $37^{\circ}C$ for twelve hours and the inhibition diameters were measured. To observe the structural change of membranes after TIMAC treatment or immersion in PBS, the membrane discs were examined under SEM. The results were as follows : 1. Total amounts of TC absorbed into membrane discs($0.7536mm^2$) were $2000{\mu}g$, $1800{\mu}g$, $2625{\mu}g$ and $2499{\mu}g$ for $Tefgen^{(R)}$, $Gore-Tex^{(R)}$, $Biomend^{(R)}$ and $Resolut^{(R)}$. 2. The concentration of TC released from barrier membrane discs was maintained over $4{\mu}g/ml$ until the fifth day in nonresorbable membranes and $Resolut^{(R)}$, but until the fourth day in $Biomend^{(R)}$, Until the ninth day in nonresorbable membranes and until the seventh day in resorbable membranes, the TC concentration was maintained over $1{mu}g/ml$. 3. The four membrane discs in the first day showed similar size of inhibition zone. One to four weeks later, the inhibition zone was much smaller in resorbable membrane discs than nonresorbable membrane discs. 4. Any structural change due to treatment of TIMAC was not observed on the nonresorbable membranes. $Resolut^{(R)}$ did not show any structural change except fibrillar loosening during immersion period, but Biomend showed destruction of membrane structure from the first week of immersion. This study indicates that tetracycline treated barrier membranes lead to the sustained release of tetracycline for over 7 days. This slow release pattern of tetracycline may contribute to the favorable clinical outcome of guided tissue regeneration.

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혈소판유래 성장인자 함유 흡수성 차폐막이 치주조직의 재생에 미치는 영향 (Effects of platelet-derived growth factor loaded bioresorbable membrane on periodontal regeneration)

  • 구영;김정은;한수부;정종평;박윤정;이승진;권영혁
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • 제27권1호
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    • pp.61-78
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    • 1997
  • PDGF-BB has been recognized as a highly potential growth factor for guided tissue regeneration in periodontal defect. This study carried out histologic and histometric evaluation of $200ng/cm^2$ PDGF-BB loaded bioresorbable membrane made from polyglycolic and polylactic acid. It was tested for its biocompatibility, ability to prevent epithelial downgrowth and amount of periodontal regeneration. Without membrane and PDGF-BB unloaded bioresorbable membrane were used as control. Healthy six beagle dogs were used. Each dog was anesthetized and buccal flaps were reflected in the mandibular and maxillary premolar areas. Buccal alveolar bone between the mesiobuccal and distobuccal line angles was surgically removed on the lower 2nd and 4th premolar in mandible, 2nd premolar in maxilla, to a level 4mm apical to the cementoenamel junction with creating a Class II buccal furcation defect for available space. Care was taken not to remove the root cementum layer and rubber impression materials were placed over each surgically created defect. Flaps were repositioned and sutured. Reconstructive surgery was performed 1 month after defect preparation. PDGF-BB loaded membranes and controls were randomly placed on maxillary 2nd premolars and mandibular 2nd and 4th premolars. Plaque control regimen was instituted with daily brushing with a 0.1% chlorhexidine digluconate during experimental periods. The animals were sacrificed 2 and 5 weeks after surgery and undecalcified specimens were prepared for histologic evaluation. The degree of coronal regrowth of new bone, new cementum and the amonut of new bone areas formed on the defected area of the PDGF-BB loaded membrnae turned superior to without membrane and drug unloaded membrane. Experimental membrane could prevent the epithelial downgrowth irrespective of drug loaded or not and showed good biocompatiblity, These results implicated that PDGF-BB loaded bioresorbable membrane could be highly useful tool for guided tissue regeneration of periodontal defects.

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다양한 단백질과 폴리펩타이드로 코팅된 PLGA 표면과 슈반세포와의 상호관계 (Interaction of Schwann Cells with Various Protein- or Polypeptide-Coated PLGA Surfaces)

  • 박기숙;김수미;김문석;이일우;이종문;이해방;강길선
    • 폴리머
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    • 제30권5호
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    • pp.445-452
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    • 2006
  • 본 연구에서는 슈반세포와 다양한 세포 부착인자로 코팅된 고분자 표면과의 상호관계에 대해 연구하였다. 세포 접착인자로 알려진 피브로넥틴, 피브리노겐, 라미닌, 비트로넥틴, 폴리-D-라이신 및 폴리-L-라이신을 PLGA 필름에 코팅하고 물 접촉각 측정과 ESCA 분석을 실시해 표면특성을 평가하구 접착인자로 코팅하거나 하지 않은 PLGA 필름의 표면에 슈반세포를 배양한 후 세포 계수와 SEM 관찰을 통해 세포 부착과 성장을 알아보았다. 세포 계수 결과에서 세포 부착은 PLGA 표면의 단백질 흡착과 관련 있음을 확인할 수 있었으며, 세포의 성장은 배양액의 우태아혈청 함량의 영향을 받는 것으로 나타났다. 이러한 결과를 통해 슈반세포의 접착과 성장이 특정한 세포 접착인자에 의해 영향을 받음을 알 수 있었다. 본 실험의 결과를 통해 조직공학적 신경 재생에 응용하기 위한 신경유도관의 개발에서 세포의 부착과 성장을 향상시키기 위해서는 세포의 종류 및 배양조건에 따라 신경유도관이 적절한 표면환경을 제공해야 함이 필수적임을 알 수 있었다.

기내 배양을 통한 국내 콩(Glycine max L.) 품종의 식물체 재분화 (Plant Regeneration by in vitro Tissue Culture in Korean Soybean (Glycine max L.))

  • 김동건;비파다칸타요스;김동관;박흥규;김행훈;나의식;이성춘;배창휴
    • 한국자원식물학회지
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    • 제29권1호
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    • pp.143-153
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    • 2016
  • 국내 콩 품종의 기내 재생 효율을 개선하고자 국내 장려품종인 우람, 진품2호, 청자3호, 태광콩 품종의 기관형성 및 자엽 크기별 체세포배발생을 검토하였다. 식물체 조직절편 부위별 (자엽, 배축, 자엽+배축 절편) 신초 형성율을 조사한 결과, 자엽과 배축을 포함한 절편(자엽 + 배축)이 절편 당 분화된 신초수가 가장 많았다. 반면에 자엽 절편과 배축 절편에서는 신초가 형성되지 않았다. 배지 종류별로는 B5 배지보다 MS 배지에서 신초형성이 양호했으며, BA 2 ㎎/L 처리구가 TDZ 2 ㎎/L을 첨가한 배지보다 신초 형성율이 높았다. 공시한 4 가지 품종 중 태광콩이 BA 2 ㎎/L를 포함한 MS배지에서 신초형성율이 83.3%로 가장 높았다. 또한 체세포 배발생을 통한 캘러스 유도율을 조사하기 위하여 미성숙 자엽을 크기(S: 1∼2 ㎜, M: 3∼5 ㎜, L: 6∼8 ㎜) 별로 구분하여 배양한 결과, 4 가지 품종 모두 중간 크기(M, 3∼5 ㎜)에서 가장 높았으며, 태광콩이 65.8%로 가장 높은 캘러스 유도율을 보였다.