문치가자미의 정자형성과정을 미세구조적으로 관찰한 결과 체외수정을 하는 다른 경골어류의 정자형성과정과 유사한 것으로 나타났다. 정자변태과정 동안 염색질은 과립형태에서 구상으로 점차 응축하여 성숙 정자의 두부에서는 치밀하고 균질하게 된다. 정자는 두부와 미부로 구성되며, 첨체는 가지지 않는다. 두부 후방에서는 cytoplasmic collar가 관찰되었으며, cytoplasmic collar는 여덟개의 미토콘드리아를 가진다. 미부에서는 잘 발달된 axonemal lateral fin을 관찰할 수 있다. 미부 편모축사의 횡단면은 "9+2"의 미세소관 구조를 나타내며, 세포질내에 많은 수의 공포를 가진다.
본 연구에서는 소 난자 세포질내 원형정자 및 원형정자 핵을 미세주입 후 수정과정과 체외 배 발달을 조사하였다. 원형정자 주입 3시간 전에 인위적 자극을 주고 원형정자를 주입했을 때 난자들의 수정률이 주입 직후에 자극을 준 것들과 자극을 주지 않은 것들 보다 높았다. 원형정자 주입과 원형 정자핵을 주입한 후 전핵 형성률과 전핵 이동률을 조사하였으나 유의차를 발견할 수 없었다. 전핵의 형성과 이동중에 미세소관의 움직임을 간접형광면역법 및 공촛점 현미경을 사용하여 조사해 본 결과, 난활성 직후 난자의 표층에서 미세소관이 발생해서 이것에 의해 웅성 및 자성전핵이 난자 중심부로 이전됨을 볼 수 있었다. 수정 후 원형정자의 세포질내 Mitochondria의 분포상태를 알아보기 위해 MitoTracker에 노출시킨 원형정자를 주입한 후 형광현미경에서 관찰해 보았다. 그 결과 원형정자의 Mitochondria가 주입 후 4-cell 이 전까지 는 관찰되었으나 그 이 후에는 발견 할 수 없었다. 원형정자를 미세주입한 후 소 난자를 체외에서 배양했을 때 2.5%의 난자가 배반포로 발달하였다. 이상의 결과는 체외 배양한 소 난자 내에 원형정자 혹은 원형정자 핵을 미세 주입하여 정상적인 수정과 배발달이 가능한 것을 보여 주는 것이다.
불염여성에서 복강내액의 독성 유무를 알기 위해서 콤퓨터 정액 분석기를 이용하여 복강내액의 정자 활동성을 분석하였다. 연구대상은 자궁내막증 환자 14예와 자궁내막증이 없는 불염환자로부터의 복강내액 9예로 하였다. 연구방법은 건강인의 정자를 셰척 분리하여 대상환자의 복강내액과 Hams F10 배양액을 동량 흔합하여 (50%) 배양후 정자 활동성을 측정하였다. 정자 활동성의 감소는 배양전 0시간의 수치와 비교해서 1시간, 4시간 그리고 24시간후의 결과를 비교 분석하였다. 자궁내막증 제 1기 및 제 2기 환자와 자궁내막증이 없는 환자의 복수에서의 정자 활동성의 감소는 통계학적으로 의의있는 차이는 없었다. 그러나 자궁내막증이 심한 제 3기의 환자군에서는 의의있는 차이가 있었다(p<.05). 실험군간의 정자 활동성의 평균치 차이는 없었으나,각 군에서의 환자별 개인 성적은 정자 활동성이 현저히 감소한 독성있는 복강내액과 비독성의 복강내액을 쉽게 구별할 수 있었다. 결론적으로 정자 배양을 이용한 복강내액 독성 검사는 비교적 간단하고 경제적이므로 염상적으로 최근에 대두된 복강내 수정 치료법의 예비검사로서 유용할 것으로 사료된다.
본 연구는 개량조개과에 속하는 동죽, Mactra veneriformis, 개량조개, M chinensis, 북방대합, Spisula sachalinensis, 왕우럭, Tresus keenae을 대상으로 정자의 미세구조를 조사하였다. 조사한 4종 모두 primitive type의 정자를 가지고 있었다. 첨체모양은 4종 모두 유사한 형태로 첨체의 앞쪽은 전자밀도가 낮은 부분 (elp)이고, 첨체의 뒤쪽은 전자밀도가 높은 부분 (edp)로 나누어지는 변형된 모자모양이다. 4종의 정자의 핵 모양은 상대적으로 차이가 있어 구분이 가능하며, 특히 Mactra 속의 2종은 핵의 모양이 서로 유사하다. 그리고 정자의 중편부를 구성하고 있는 미토콘드리아수는 4종 모두 4개로 나타났다. 개량조개 과 조개의 정자형태는 종 특이성을 가지고, 특히 첨체는 다른 과의 조개류와 다른 과수준의 특이성으로 판단된다.
흰쥐 정자의 성숙과정중에 일어나는 부정소 상피세포, 내강 및 정자 사이의 상호관계를 알아보기 위하여 각 실험군 별로 웅성호르몬 투여에 따른 탄수화물 관기의 함량 변화를 측정하였고, tunicamycin 투여 후 hexosamine의 할량 변화를 살펴봄으로써 glycosylation되는 장소를 확인하였다. 부정소두와 부정소이 상피세포내의 hexose 함량은 거세 후 5일군부터 유의성있게 감소하였고, testosterone 투여시는 각각 5일 , 10일군부터 유의하게 증가하였으며 , hexosamine과 sialic acid의 경우도 통계적으로 유의하게 변화하는 시기는 달랐으나 hexose와 유사하게 증가와 감소하는 경향이 나타났으므로 이러한 하나하나의 탄수화물 관기의 함량 변화는 웅성호르몬에 의존적임을 알 수 있었다. Tunicamycin을 투여하여 hexosamine의 함량 변화를 측정하였을 때 투여 기간에 따라 상피세포와 내강액에서 유의하게 감소하였으나, 정자에서는 일관성있게 감소되지 않았으므로 정자가 직접 hexosamine또는 여러 당단백질 합성에 관여하는 것은 아니며 부정소상피세포나 내장에 의하여 영향받을 수 있다는 가능성을 확인하였다.
북방산개구리의 성체 수컷들 년중 채집하여 gonadosomatic index(GSI)와 정자형성과 정 및 정소내 testosterone양의 변화를 조사하였다 정자형성은 8월에 시작되어 9월에 가장 활발하게 진행되었으며 이때 GSI도 가장 높았고 세정관의 단면적도 가장 넓었다 번식기(2월) 이후 일정기간 동안에는(3월-7월) 정자형성이 정지되었으며, GSI나 세정관의 단면적도 최저치를 나타내었다. 정소내 testosterone양은 11월부터 급격히 증가하여 2월에 가장 높았으며 3월부터 급격히 감소되어 10월 까지 매우 낮은 농도를 유지하였다. Interstitial cell의 수도 동면기간이 찰동기 보다 훨씬 많았으며 핵의 크기도 동면기간이 훨씬 컷다. 따라서 testosterone의 생성 증가와 interstitial cell의 활성화가 일치함을 알 수 있었다. 본 결과들은 북방산개구리의 정 소에서는 정자형성과정이 불연속적으로 일어난다는 것과 2월 이후에는 testosterone의 양이 급격히 줄어드는 것으로 보아 이 개구리의 번식기가 2월임을 확인해 주고 있다.
본 연구는 인공수정 센터에서 이용되고 있는 종모돈의 인공수정 분만율의 차이를 기준으로 하여 정액의 보존 일에 따른 정자의 생존율, CASA, HOST, IVP 및 SCSA를 조사하여 이들 정자의 분석법들과 인공수정 분만율과의 상관관계를 조사하여 종모돈의 수정 능력을 예측할 수 있는 정액 평가법을 개발하고자 실시하였다. 종모돈의 액상정액을 대상으로 CASA, HOST, IVP 및 SCSA 기법을 적용한 정액의 평가 결과는 다음과 같았다. 정액의 보존 일별 HOST 결과는 보존 일이 경과함에 따라 유의적으로 감소하였고(P<0.05), IVP 결과 난자 당 침투 정자 수는 보존 3일째에 유의적으로 감소하였다(P<0.05). 보존 0일과 6일에 HOST는 분만율이 80% 이상인 종모돈 군이 70% 미만인 종모돈 군 보다 유의적으로 높았고, 3일에서는 80% 이상인 종모돈 군이 다른 종모돈 군에 비하여 높았다(P<0.05). IVP는 보존 0일에 분만율이 80% 이상인 종모돈 군이 70% 미만인 종모돈 군보다 난자당 침투 정자 수가 유의적으로 많았다(P<0.05). %Red는 보존 0일과 3일에는 분만율이 80% 이상과 70% 미만인 종모돈 군 간에 유의적인 차이를 보였으나 보존 6일에서는 모든 종모돈 군간에 유의적인 차이가 있었다(P<0.05). %Red(r=0.79, P<0.01 ; r=0.86, P<0.01 ; r=0.88, P<0.01)는 정액의 보존 일이 증가함에 따라 분만율과의 부의 상관 계수가 증가하였다. 이상의 결과를 종합해 보면 SCSA는 정액의 수정 능력을 평가하는데 있어서 매우 유용한 방법이며, 정액의 보존 일은 여러 가지 정자 기능과 SCSA 결과에 크게 영향을 주는 것으로 나타났다. 정액의 수정 능력을 평가함에 있어서 정액의 보존 일령을 고려하고 정자 기능 검사와 SCSA를 병행하여 실시할 경우 종모돈의 수정 능력 평가 시 정확성을 더욱 높일 수 있는 유용한 방법이 될 수 있을 것으로 사료된다.
본 연구는 미성숙 혹은 성숙된 3년생 무지개 송어(Oncorhynchus mykiss) 수컷 150마리의 뇌하수체와 정자형성세포의 형태적인 변화를 조사하기 위해서 실시되었다. 3월부터 그 이듬해 2월까지 번식주기에 따라 광학현미경, 투과 및 주사전자현미경으로 정자 형성과 정자완성시기의 미세구조적 변화를 연구하였다. 뇌하수체 호르몬 분비세포의 성숙은 휴지기 (3월부터 8월까지), 정자형성기 (9월부터 11월가지), 번식기 (12월부터 2월까지)의 3가지 시기로 구분되었다. 뇌하수체 호르몬 분비세포의 미세구조가 변하는 추세는 정소의 주기적 변화와 대체적으로 일치하였다. 정자형성초기에는 여러 단계의 세포군이 하나의 세정관안에 위치해 있었다. 정원세포로부터 정자세포까지 사류ㅕ볼 때 핵과 세포질의 크기는 각 발달단게마다 점진적으로 감소하였다. 제2차 정모세포 및 정자세포의 세포질 외측에 작은 크기의 미토콘드리아가 확인되었다. 정자세포의 2개의 미토콘드리아는 세포질의 한쪽에 위치하면서 길게 늘어지기 시작하였다. 정자의 경우, 핵의 크기가 감소하였고, 핵막과 세포질막은 두부의 핵과 근접해 있었따. 2개의 미토콘드리아는 다른 척추동물과 달리 그 수가 적었고, 축사로부터 분리되어 있었다. 무지개송어의 축사구조는 축추동물의 전형적인 "9+2"형을 나타내었다. 투과 및 주사전자현미경으로 여러 단계의 정자형성세포들을 관찰한 결과 그 두부의 크기와 형태의 구체적인 차이를 확인할 수 있었다.확인할 수 있었다.
가축유전자원으로서 흑염소 정액은 가축의 증식 및 유전적 개량을 위하여 동결정액으로서 보존될 필요성이 높으나 아직까지 연구 결과가 많이 누적되어 있지 않은 것으로 판단된다. 국내의 흑염소 동결유전자원의 생산성과 효율성 분석을 위하여 가축유전자원센터에서 보유 중인 흑염소 3 계통을 이용하여 전기자극방법에 의하여 채취된 정자와 정소상체유래 정자를 동결 보존하였다. 동결 전 Triladyl 난황희석액을 이용하여 흑염소의 정액과 혼합하여 $17^{\circ}C$에서 2시간 보존하면 응고현상을 관찰할 수 있었으며 42.9%의 비율로 난황이 변화한다는 것을 육안으로 관찰할 수 있었다. 정장 제거용 배양액으로 전기자극 유래 정자를 세정 후 동결 보존하면 융해 후 정자 생존율이 정액 세정용 배양액 $53.8{\pm}5.2%$로 나타났으며 정소상체 정자는 $74.6{\pm}10.6%$로 유의적으로 높게 관찰되었다. 융해된 정자의 장수성을 $17^{\circ}C$에서 조사해 보면 정소상체 유래 정자가 전기자극 유래 정자보다 우수한 것으로 조사되었다. 그러므로, 염소 동결 유전자원을 보존하는 방법으로 정소상체 정자는 활용성이 인정되며, 염소의 개량과 선발을 위하여 농가에서 활용 가능한 동결정액의 생산과 융해 후 생존성 증진을 위하여 더 많은 동결 보존 연구가 필요하다고 판단된다.
본 연구는 흰쥐의 정소에 방사선을 조사하였을 때 시간이 경과함에 따라 나타나는 정소세포 및 정자의 변화를 현미경학적으로 얻은 영상을 기초로 영상처리에 의한 정량분석을 통하여 정자의 변화에 대한 결과를 정량화함으로써 더 정확하고 객관적인 결과를 얻고자 하는데 그 목적을 두고 있다. 연구에는 8주 수령의 흰쥐를 대상으로 하였으며, 6 MV의 X선을 1회 2 Gy를 전신 조사하였다. 총 30 마리의 흰쥐를 대상으로 방사선을 조사하지 않은 정상대조군과 실험군을 조사 즉시, 조사 2시간, 4시간, 8시간, 24시간 후에 각 실험군 마다 5마리의 정소를 각각 적출하였다. 적출 후 Periodic acid Schiff 염색을 시행하여 정상대조군과 실험군에서의 정소세포와 정자의 상태를 관찰하였다. 방사선조사 후 24시간까지, 정소세포수와 정자수가 점차 감소하는 것을 정성적 및 정량적으로 유의함을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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