To develope tea-fungus beverage(TB), media added various kinds of ingredients including black tea, persimmon leave tea, pine needle, mugwort mycelia and fruiting body of Cordyceps spp. were prepared fur fermentation. Tea-fungus beverage(TB) was prepared with tea-fungus by fermentation for 2 weeks at 30 $^{\circ}C$. Functional properties of antibacterial activity, electron donating ability and nitrite scavenging ability were investigated in tea-fungus beverage(TB) and 5 times diluted tea-fungus beverage(DTB). Antibacterial activity against pathogenic E. coli and S. aureus was excellent in TB added pine needle, mycelia and fruiting body of Cordyceps japonioa while no activity in TB added persimmon leave tea. Electron donating ability of TB were ranged from 41% to 87% in TB and were ranged from 11% to 63% in DFB, high ability was in TB and DTB added pine needle and persimmon leave tea, while low ability in FB and DTB added mycelia and fruiting body of C. militaris. Nitrite scavenging ability was 63% in TB added black tea and 44% in TB added persimmon leave tea. Other ingredients added TB had weak nitrite scavenging ability.
A cDNA library was constructed using mRNA from the cells of 7-day-old cultures of Flammulina velutipes after induction of fruiting treatment. A cDNA clone, FVFD16 (Flammulina velutipes fruiting body differentiation), was selected by differential screening. The expression property of the FVFD16 gene was examined by Northern blot analysis. FVFD16 represents mRNA that is specifically expressed during differentiation of fruit bodies. The conspicuous accumulation of the FVFD16 mRNA was detected in 4-day-old and 1-day-old cultures. The nucleotide sequence of the FVFD16 gene was determined and the mRNA contained an open reading frame that encoded a putative protein of 128 amino acid residues (13.5 kDa).
Transfer of the isolated nuclei from Lentinus edodes into protoplasts of Pleurotus florida was induced with polyethlene glycol (PEG) and $CaCl_2$. The intergeneric transfer products were classified into nuclear hybrid, heterokaryon or synkaryon, and reconstituted cell. These progenies except nuclear hybrids formed mature fruiting bodies on sawdust rice bran medium. Formation of fruit bodies was influenced by several factors such as light, temperature, nutrition and physic state of the culture media. Most of fruiting body characters were similar to those of P. florida in synkaryon and L. edodes in reconstituted cell, respectively. All these basidiocarps had clamp connections though initial heterokaryon colonies were lacking. Isozyme patterns of intergeneric progenies were quite different from those of parents. DNA polymorphisms of transfer products were also compared by random amplified polymorphic DNAs (RAPD) analysis based on polymerase chain reaction. The RAPD patterns were different from those of donor and recipient. DNA fingerprints ranged in size from 0.25 to 4.0 Kb. On the basis of RAPD, the transfer products were classified into five groups. Two synkaryon were analysed with distribution of progenies and segregation of genetic markers by random spore analyses. The genetic markers were segregated into wild type and riboflavine requiring auxotrophs.
The 2 strains of Pleurotus ostreatus showing very severe and mild symptom of brown blotch were selected, and their F1 hybrid strains were made by mating of their single spore isolates. Hydrophobicity of fruiting body surface and brown blotch severity of the parental and their 11 F1 hybrid strains showing different level of severity of brown blotch were determined. Correlation coefficient (R) between disease severity and hydrophobicity were 0.68 and 0.70 on two independent experiments. Correlation coefficient between disease severity and disease incidence that was determined in the oyster mushroom farm were 0.46 and 0.52 on two independent experiments. When GFP-tagged Pseudomonas tolaasii was monitored with confocal microscope on cap surface of fruiting body, more cells of the pathogen were clustered on the severe strain than the mild strain, which indicates that the bacterial pathogen proliferates more on the severe strain. These results suggest that hydrophobicity of oyster mushroom fruiting body affects disease severity of the brown blotch disease; the longer the bacterial suspension stays on fruiting body surface more severe symptom of the blotch develops.
The water-soluble or ethanol-soluble materials extracted from fruit bodies and cultured products (mycelium and broth) of H. erinaceum were prepared, and their inhibitory effect on acetylcholinesterase (AChE) activity from Electrophorous electricus was investigated. Inhibition of 75-85% for AChE activity at concentration of 10 mg/ml was obtained and the mechanism was due to general non-competitive inhibition. Especially, the supernatant of culture broth by ethanol treatment, exhibited a strong inhibition activity of 94% at 10 mg/ml. The samples from fruit body, mycelium and broth (supernatant and precipitate by ethanol treatment) which were extracted from H. erinaceum, were very effective to inhibit the initial stage oxidation of a linoleic acid at concentration of 0.1 mg/ml. The antioxidative activity of these samples were superior than rutin, vitamin C and tocopherol as antioxidative standards by FTC (ferric thiocyanate) method, and also showed the very strong antioxidative activity of 95% without significant difference of the samples by TBA-RS (thiobarbituric acid-reactive substance) method.
For artificial cultivation of Phellinus baumii, we have conducted a study on cultural characteristics and condition of fruitbody formation in sawdust cultivation. Mycelial density and incubation rate were higher in oak sawdust+rice bran (4 : 1) medium than oak sawdust 100% medium. However, primordia and fruitbody formation were higher in oak sawdust 100% medium than rice bran added medium. Bigger bottle capacity (1,100 ml) resulted in a little higher yield and more biological efficiency than 850 ml bottle.
This study was carried out to screen the fruiting body formation-specific genes from the medicinal mushroom Cordyceps militaris. A cDNA synthesized using total RNA from 4 stages of mushroom development, mycelium, primordium, immature fruiting body and mature fruiting body. Differential expression gene screening was performed by DD-PCR(Differential Display Arbitrary Primer PCR) with cDNA, we sequenced partial 6 genes using pGEM cloning vector. The DNA Sequence of the six DD-PCR products derived from differentially expressed genes was compared to that in the GenBank database by using the NCBI BLAST search to identify similarities to known sequences. Sequence analysis showed that six of DD-PCR products have unknown sequence.
Pholiota sp. were collected from the forest of Kangwon province (Mt. Samak, Mt. Odae and Kangwon National University Forest Experimentation) from the early of August to the end of October 1997. Among these fungi, Poliota adiposa was selected for culture experiment because it is suitable for edible mushroom. The Optimal temperature for the mycelial growth of Pholiota adiposa was in the range of $28^{\circ}C$ while that of fruit body formation was $15{\pm}1^{\circ}C$. Brown sugar as carbon source and soybean flour as nitrogen source were good for mycelial growth in commercial liquid culture. The fruit bodies of Pholiota adiposa were artifitially produced on plastic bottle including poplar sawdust and rice bran (4:1).
Five strains of Pleurotus sajor-caju were collected from some countries including India and Papua New Guinea. Four strains produced brown fruitbody but the other strain from Papua New Guinea produced white fruitbody. Monokaryons obtained from both strains producing brown fruitbody and white fruitbody were mated each other. They showed different mating types such as brown strain of $A_1A_2B_1B_2$ and white strain of $A_3A_4B_3B_4$. DNAs were isolated from mycelia of five strains of P. sajor-caju. Mitochondrial DNA was seperated from nuclear DNA by bisbenzimide-CsCl ultracentrifugation. Digestion of the fungal mitochondrial DNA with Eco RI restriction endonuclease yielded from ten to fourteen fragments. Two strains of the five strains showed different restriction pattern of mitochondrial DNA from the other three strains. Summation of the fragment sizes gave a mitochondrial DNA size of about 60 to 65kb.
Coprinellus congregatus, known as an inky cap, is autolysed into ink soon after the maturation of the mushrooms. Electron microscopy was used to examine the ultrastructural changes associated with the autolysis as an initial step to understand the role of hydrolytic enzymes in this process. During the early stages of maturation of the mushrooms, most of cytoplasm of hymenial and subhymenial tissues seemed to be transported to the developing basidiospores. The depletion of cytoplasm within the tissues and the maturation of the basidiospores may initiate the degradation of the cell walls of the tissues. Both hymenial and subhymenial tissues seemed to degraded at the same time. This study suggested that the critical steps in the autolysis of mushrooms is not the degradation of the cytoplasm, but the degradation of the cell wall by hydrolytic enzymes such as chitinases.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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