뎅기열은 열대와 아열대지역에서 호발하며, Aedes aegypti 모기에 의해 전파되는 바이러스성 급성 발열 질환이다. 뎅기열은 발열과 인플루엔자 유사증상, 피부발진으로 특징지어지며, 뎅기출혈열의 경우 발열과 출혈증상, 혈장삼출 등을 동반하며, 심한 경우 혈장삼출에 의한 저혈량성 쇼크가 발생할 수 있고, 이를 뎅기쇼크증후군이라 하며 적절한 치료가 없을 경우 사망까지 이를 수 있다. 국내에서는 뎅기열의 발생빈도가 낮아 접하기가 쉽지 않고, 따라서 감별진단으로 고려하기 어려운 점이 있다. 저자들은, 11개월간 유학생으로 필리핀에 거주하였던 14세 남아가 뎅기출혈열로 진단된 증례를 경험하였기에 문헌고찰과 함께 보고하는 바이다.
To search for anit-H5N1 influenza virus agent, the anti-viral activity of methanol and aqueous extracts from thirty medicinal plants were examined in this study. The plant material (30 g) was extracted with methanol (300 mL) for 24 hr at room temperature. Methanol extracts were filtered and evaporated, then freeze-dried. Aqueous extracts were prepared with dried plant material (30 g) and hot distilled water (300 mL). After 3 hr, the aqueous extracts were filtered and evaporated, then lyophilized. Extracts prepared from different plants were tested the antiviral activity against influenza viruses [A/vietnam/1194/04 (H5N1)-NIBRG-14] using the hemagglutination (HA) assay. Among the test plants, Asarum sieboldii was found to be a potent inhibitor of H5N1 influenza virus in MDCK cell culture. Virus titers were 7 log, whereas with methanol extract of Asarum sieboldii for 48 hr titers were 3 log, indicating that methanol extract of Asarum sieboldii inhibited the H5N1 influenza viruses from the infected cells.
In this study, we developed a rapid, sensitive and specific reverse-transcriptase loop-mediated isothermal amplification (RT-LAMP) assay for detection of swine influenza viruse (SIV) including major subtypes of swine influenza viruses H1N1, H1N2 and H3N2, and a novel subtype of influenza A virus that accidentally infected in pig population. The RT-LAMP was completed in 40 min at $58^{\circ}C$ and the sensitivity of the RT-LAMP ($1copy/{\mu}L$) was 10-fold higher than conventional reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) ($10copy/{\mu}L$) and the same to real time RT-PCR ($1copy/{\mu}L$). Also, the result of the RT-LAMP can be confirmed without any detection system. Therefore, the RT-LAMP could be a alternative diagnostic method for SIV detection in national SIV monitoring system and clinical diagnostic laboratory in the future.
Objectives: For our survey of the incidence of influenza viruses among respiratory viral infections in Seoul, we evaluated their prevalence among infectious acute respiratory viral patients in Seoul from 2010 to 2012 through regular surveillance. Methods: For influenza virus detection, we conducted real-time PCR analyses on 2,544 throat specimens collected from patients with respiratory viral infections in Seoul between 2010 and 2012. They were collected and then tested for the presence of influenza viruses through reverse transcription (RT) - polymerase chain reaction (PCR). Results: 19.1% (486/2,544) of the throat specimens were determined to be positive for influenza viruses. The incidences of influenza viral infection in the case of respiratory viral infections through regular surveillance in Seoul were 23.0% (212/923) in 2010, 6.4% (47/738) in 2011, and 25.7% (227/883) in 2012, and 10.8% (275/2,544) of type A, and 8.3% (211/2,544) type B influenza viruses. In addition, the greatest prevalence was in the 20-49 age group (51.6% ), which shows that influenza viruses constituted a major causative agent of acute respiratory viral infections. Conclusions: The distributions of influenza viruses and the epidemiologic patterns of the viral pathogen in acute respiratory viral infectious patients may provide potentially effective data for epidemiological studies in Seoul, Korea.
In this study, we propose an immunosensor using zinc oxide nanorods (NRs) inside PDMS channel for detecting the influenza A virus subtype H7N9. ZnO with high isoelectric point (IEP, ~9.5) makes it suitable for immobilizing proteins with low IEP. In this proposed H7N9 immunosensor structure ZnO NRs were grown on the PDMS channel inner surface to immobilize H7N9 capture antibody. A sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) method with was used 3,3',5,5' tetramethylbenzidine (TMB) for detecting H7N9 influenza virus. The immunosensor was evaluated by amperometry at various H7N9 influenza antigen concentrations (1 pg/ml - 1 ng/ml). The redox peak voltage and current were measured by amperometry with ZnO NWs and without ZnO NWs inside PDMS channel. The measurement results of the H7N9 immunosensor showed that oxidation peak current of TMB at 0.25 V logarithmically increased from 2.3 to 3.8 uA as the H7N9 influenza antigen concentration changed from 1 pg/ml to 1 ng/ml. And then we demonstrated that ZnO NRs inside PDMS channel can improve the sensitivity of immunosensor to compare non-ZnO NRs inside PDMS channel.
Canine influenza virus (CIV) is an emerging pathogen that causes severe and acute respiratory disease in dogs. In 2006, the H3N2 CIV was first identified in dogs from Guangdong province in China. The nine isolates were grouped together with the canine H3N2 viruses isolated from dogs and cats in Korea. The possible interspecies transmission of influenza A virus is very important. We carried out a serological retrospective study using invited canine serum. The hospital invited 123 dogs, first vaccination group were revealed with CIV antibody positive rate of 81.8%. the second vaccination group were detected a positive rate of 91.2%. Antibody generation rate was higher in 3~10 years dogs. Protective antibody titers were detected from 2 weeks to 12 months. thereafter below the protective antibody. The results indicate that H3N2 CIV may have been consistently circulating in dog populations. Recently. These findings showed that H3N2 CIV has the capacity to replicate in and transmit among cohoused dogs and underscore the need for continued public health surveillance. Considering the result continuous management and prevention system against CIV is required at the concentrated animal care centers. The importance of CIV surveillance in this region for understanding the genesis of this virus, and it is important to remain aware of the potential of H3N2 CIV to be transmitted from dogs to the human population.
Swine influenza is an acute, infectious respiratory disease caused by type A influenza viruses in pigs. In the previous studies, serological surveys have indicated the presence of H3N2 swine influenza virus (SIV) since 1995 in Korea. And the percentage of the antibody-positive rate was 39.12% in the survey determining the prevalence of H1N1 SIV antibodies in 2002. The purpose of this study was therefore to investigate the sero-prevalence of SIV regard to the age of the pig and the season between June 2004 and May 2005. In this study, a total of 932 sera were used. These sera were randomly selected from blood samples, which were submitted to Department of Veterinary Pathology, Kangwon National University and Department of Veterinary Virology, Seoul National University from June 2004 to May 2005. These sera have been tested by ELISA test kit (IDEXX Lab, USA) for the SIV H3N2, H1N1 respectively. SAS version 9.1 was used for the statistical analysis based on the age of the pig and the season. The overall sero-prevalence of the antibody against H3N2 SIV was 20.82% (194/932). The overall sero-prevalence of the antibody against H1N1 SIV was 37.23% (347/932). The overall dual sero-prevalence of the antibody against H3N2 and H1N1 SIV was 10.62% (99/932). H3N2 has significant difference in statistically regarding the age of the pig and the season (p<0.0001). H1N1 has significant difference in statistically regarding the age of the pig (p<0.0001) but has not significant difference in statistically regarding the season (p=0.5882).
Objectives: This study evaluated the virucidal efficacy against avian influenza virus (AIV) of a disinfectant spray containing 0.25% grapefruit seed extract, 0.2% citric acid, 0.0625% malic acid and 0.0125% benzalkonium chloride. Methods: The disinfectant spray was diluted several times with hard water (HW) and organic matter (OM). Two point five mL of each diluent was added into each test tube, and 2.5 mL of AIV suspension was inserted into each test tube. After 30 minutes of virus-disinfectant contact reaction at $4^{\circ}C$, 2.5 mL of 10% inactivated fetal bovine serum was added into each test tube to neutralize the sanitizer efficacy. The neutralized solutions were serial 10-fold dilutions with phosphate buffer solution, and 0.2 mL of the diluents was injected into the allantoic cavity of five ten-day-old-chickens per dilution time. After incubation of the embryos for five days, the viability of the AIV was examined by hemagglutination titer. The valid dilution of the disinfectant spray was estimated according to the dilution time that the virus titer was inactivated more than $10^4$ 50% egg-infective dose (EID50)/mL compared with pathogen control. Results: In HW and OM conditions, the valid dilutions of the disinfectant spray against AIV were seven- and three-fold dilutions, respectively. The AIV titer of the pathogen control was more than 6.1 log10EID50/mL, and there was no embryonic toxicity. Conclusion: The present study showed that this disinfectant spray has effective virucidal activity against AIV.
조류 인플루엔자 바이러스(AIV) 아형을 ultra-time PCR법(UPCR)을 이용하여 초스피드로 진단할 수 있는 방법을 고안하였다. 표적 대상의 프라이머는 AIV H5N1 아형의 hemagglutinin(HA) 유전자 중 가장 상보성이 높은 133 bp의 부위를 선택하였고, 실험의 안전을 위하여 인공합성의 방법으로 제작하였다. 압타머와 결합한 molecular beacon 기반 Mini-Opticon Q-PCR 기기를 사용한 UPCR법으로, 총 UPCR 반응액의 양을 10 ${\mu}l$으로, UPCR과 용융온도 분석시간을 15분 이내로 매우 짧게 단축시켰다. 민감도 측정에서 최소의 주형인 5분자의 HA 유전자만으로 정확히 AIV의 특이적 133 bp를 합성하였다. UPCR로 디자인된 이 PCR은 AIV 아형의 진단에 적용될 수 있을 뿐 아니라, UPCR이 기반되는 진단을 이용하여 다른 병원체에도 널리 적용 될 수 있을 것으로 기대된다.
Cause of high lethality and dissemination to human being, new development of rapid method for the detection of highly pathogenic Avian Influenza Virus (AIV) is still necessary. For the detection of AIV subtype H5N1, typical pathogenic AIV, new method to confirm sub-typing of this virus is also needed. For the purpose of ultra-rapid detection and sub-typing of hemagglutinin and neuraminidase of AIV, this study was planned. As the results we could demonstrate an ultra-rapid multiplex real-time PCR (URMRT PCR) for the detection of AIV In this study, the URMRT PCR were optimized with synthesized AIV H5- and AIV Nl-specific DNA templates and GenSpector TMC, which is a semiconductor process technology based real-time PCR system with high frequencies of temperature monitoring. Under eight minutes, the amplifications of two AIV subtype-specific PCR products were successfully and independently detected by 30 cycled ultra-rapid PCR, including melting point analysis, from $1{\times}10^3$ copies of mixed template DNA. The URMRT PCR for the detection of AIV H5N 1 developed in this study could be expected to apply not only detections of different AIVs, but also various pathogens. It was also discussed that this kind of the fastest PCR based detection method could be improved by advance of related technology in near future.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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