Cultural characteristics of Cordyceps militaris preserved in EFCC, Kangwon National University were investigated for the mass production. The higher mycelial density of C. militaris was observed in Sabouraud's yeast and Yeast Malt agars, but the higher mycelial growth in Mushroom Minimal agar than other agars. The mycelium of C. militaris was observed to grow well at $25^{\circ}C$ and pH 6.0 respectively. The dextrose was found the best suitable energy source among the carbohydrates used for its mycelial growth, while the fructose or lactose observed to be well for mycelial growth. Hemoglobin was observed to be the best among the protein sources used for mycelial growth, while tryptone found to be the best in the spore formation. Similarly, the mycelial growth was best in mineral salts of $KH_2PO_4$ or $K_2HPO_4$ and the optimum C/N ratio was 100 : 1.
In order to develop an efficient micropropagation system for a rare tree species, Empetrum nigrum var. japonicum K. Koch, the effect of medium salt, cytokinins and auxin at different concentration were evaluated. Shoot induction from axillary bud was better on WPM medium than on MS medium. Although there was no significant differences observed in shoot induction among the salt strengths of WPM medium, whereas healthy shoots were developed on basal WPM medium. In comparison of the cytokinins affecting shoot proliferation, zeatin was better than BA, whereas BA exhibited more effectiveness on shoot elongation. In vitro root formation was better on WPM medium than on 1/2MS medium and achieved the highest rooting rate when 5.0 mg/L IBA treatment. 93% of rooted plantlets were survived on artificial soil mixture after 4 weeks of acclimatization. Above results suggest that a rare tree species, E. nigrum var. japonicum can be micropropagated via axillary bud cultures.
This study was conducted to investigate the morphological characteristics and cultural conditions for artificial fruiting body(synnemata) production of Paecilomyces japonica. In the morphological characteristics of P. japonica, the size of it's conidia was ranged from $5.0{\sim}1.5\;to\;7.9{\sim}2.4\;{\mu}m$. The artificial fruiting body showed yellow in color, shape was confirmed ellipsoidal or obovoid type, and the length was $50.6{\sim}104.5\;mm$. The mycelial growth on the PDA medium treated with pH7, at $25^{\circ}C$ was superior to that of other treatments. The formation period of an artificial fruiting body of P. japonica treated with polypropylene and glass bottle culture was 30 days and 50 days, respectively. The length and number of fruiting body was longer and higher in the polypropylene bottle culture than those of the glass bottle culture. As the results, the artificial fruiting body production in the polypropylene bottle increased 1.2g per bottle compared to that of the glass bottle. It also increased in $100{\sim}400\;lx$ illumination, whereas the elongation of synnemata, pinheading and fruiting body growth were inhibited by continuous use of 900 lx illumination. The results of these experiment indicated that fruiting body formation seemed to be lower as the light intensity increased. The fruiting body formation was also dependent on the light color. There was a higher incidence in red color light and fluorescent light treatment than that of incandescent and blue color light. The fruiting body of the naked barley medium had so much better growth compared to other media that it would be able to use for it's production. The growth of fruiting body was affected by $CO_2$ concentration. It increased after putting the lid on the bottle.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2002.11b
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pp.29-29
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2002
참오갈피(Acanthopanax pedunculus)는 국내 고유한 자생 종이며 현재 몇 그루 만이 존재하는 것으로 추정된다. 이 수종은 대체적으로 다른 오갈피 수종에 비해 잎 및 열매는 물론 식물 전체 부위가 다소 커서 경제성이 높다고 판단된다. 본 실험에서는 참오갈피의 세포배양 기술을 이용한 묘목 및 약용원료의 산업적 대량 생산 기술을 개발하고자 수행 하였다. 참오갈피 접합자배를 적출하여 무균적으로 배양한 다음 자엽단계로 성숙한 이들 접합자배를 1 mg/1 2,4-D가 첨가된 MS 배지에 배양하여 배형성 캘러스를 유도하였다. 배형성 세포의 유도율은 약 72%에 달했다. 유도된 배형성 캘러스는 2,4-D가 첨가된 같은 고체 및 액체 배지에서 계대배양하여 배형성 캘러스 및 세포를 유지하였다. 배형성 캘러스를 2,4-D가 첨가되지 않은 배지에 옮겨주면 이들 세포로부터 체세포배가 발생되었다. 약 2개월의 기간을 거쳐 자엽단계로 성숙된 체세포 배는 발아되지 않기 때문에 5 mg/1 GA$_3$가 첨가된 1/2 MS 배지에 옮겨 발아 및 식물체로 재생 시켰다. 약 7 cm 크기로 재생된 식물체를 인공토양에 옮겨 1달간 순화시키고 난 후 토양에 옮겼을 경우 87%가 생존하였다. 기내에서 유도된 참오갈피 식물체는 특별한 처리를 하여주지 않아도 뿌리로부터 배발생 세포를 형성 할 수 있었다. 따라서 이들 식물체로부터 배발생세포 유도는 세포주의 보존 및 증식에 효과적으로 이용될 수 있었다. 한편 참오갈피 세포는 5-10 리터 바이오리엑터 배양을 통하여 배형성세포, 자엽단계의 배, 유식물의 대량생산의 가능성을 확인하였다.
Kim, Myung-Uk;Kwon, Oh-Jun;Woo, Hi-Seob;Cho, Young-Je
Applied Biological Chemistry
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v.50
no.1
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pp.1-5
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2007
For the purpose of application for biomass of Pleurotus eryngii, the optimum culture condition were tested. It was found that the optimum culture condition for spot culture of pleurotus eryngii were 24$^{\circ}C$ for 18 days with PDA medium. And the optimum culture condition of bioreactor for biomass were pH 5.5, 18$^{\circ}C$ and 27 days with PDMP broth. It was possible to artificial cultivation of mycelial from Pleurotus eryngii using bioreactor for biomass under the optimum conditions, and it was also possible for Pleurotus eryngii biomass because the forming of fruiting body when Pleurotus eryngii was cultivated using mass artificial cultivated mycelial in the bioreactor.
The optimal temperature for mycelial growth the F. fomentarius was $30^{\circ}C$ and the range of the temperature for mycelial growth wsa about 10~30. The optimal pH for the growth was 4.0. The percentage of weight loss percentage wsa 17.4%. The percentage of WEC extractives wsa increased to 2.24%. The observation of micromorphological showed that the detected cell wall were erosive and thinning as typical degradation pattern of white-rot fungi.
To compare the morphological and cultural characteristics of Cordyceps militaris, forming conditions of artificial fruiting body production were investigated in this experiment. The stroma shapes of artificial fruiting body were confirmed to club and/or stick. However, both shapes were same color as a orange. Perithecia of stroma was semi-egg shape and was ranged from $30{\sim}90{\times}90{\sim}130\;{\mu}m$ and it's asci was narrowly cylindric. Ascospore of perithecia was belong to filiform and multiseptate. The conidia of C. militaris was centurally grown and shaped with globose, long clavate type, floccose, centrally raised during anamorph stage. When it was cultured between glass and PP bottle, production of artificial fruiting body, pinheading ratio and total yield were higher in PP bottle. The optimum illumination was 1,000 lx for the those production. The culture medium of barley, wheat and hulled rice showed higher artificial fruiting body compared to that of silkworm. Pinheading and yield of it's isolates was decreased at more than three subsequent transculture.
The embryos(6-8mm) isolated from seeds of Diospyros kaki were cultured on Murashlge-Skoog(MS), Woody Plant Medium(WPM), Campbell Durzen(CD), Lictvay's Medium(LM), Kao-Michaluk(KM), Nitsch, White, Heller, Wolter-Skoog(WS) media. The results showed that MS and WPM media were most suitable to the development of embryos into plantlets with length of $5.4{\pm}1.2 cm$ and 5-6 leaves. However, when LM and KM media were used, the addition of 1 to $2{\mu} moles/\ell GA_3$ was required for the germination of the embryos. Superoxide dismutase (SOD) activities, one of the changing factors in leaves according to physiological status displayed to be exceptionally significant in the leaves of plantlets germinated from seeds in potting sand soil contrary to those of cultured embryos specially around germination period.
In order to develop effective acclimatization methods for Aralia elata plantlets regenerated from somatic embryos, various acclimatizing conditions were compared regarding both survival rate and growth of the plantlets. The plantlets were transplanted into plastic boxes containing artificial soil in the presence of either several levels of MS liquid media, distilled water, 2% sucrose or 0.1% hyponex solution. They were then cultured by spraying of distilled water twice a week and maintained in the normal tissue culture room. Perlite was proved to be better than vermiculite on survival rate and growth of the plantlets. As the size of perlite (larger than 0.2 cm in diameter) increased, both the survival rate and growth of the plantlets improved. Among the various MS liquid media and different aqueous solutions tested, distilled water appeared to result in the best survival rate and growth. MS media were also effective in increasing survival rate and supporting growth when diluted to 1/4 and/or 1/8. The acclimatized plantlets could be transplanted directly onto the nursery bed and grown normally. The above results suggest that plantlets regenerated from somatic embryos of Aralia elata be effectively acclimatized using a plastic box containing perlite with distilled water treatment.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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