• 한국미생물·생명공학회지
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• 제17권3호
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• pp.188-192
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• 1989

토양에서 분리된 알카리 내성 Bacillus sp. YA-14의 chromosomal DNA로부터 B. subtilis 207-25 에 cloning된 promoter 유전자들을 그 공여 균주로 재형질전환시킬 수 있었다. 그 결과 promoter 유전자들은 공여 균주내에서 대부분의 특성들이 B. subtilis 207-25 내에서와 유사하였다. 재조합 plasmid p-12, p-l2Bl 및 p-l2B2의 CAT 비활성은 B. subtilis 207-25의 형질전환체보다 약간 높게 나타났으며 반면 pPL708의 CAT 비활성은 Bacillus sp. YA-14에서 오히려 상대적으로. 낮게 나타났다. Chloramphenicol에 의한 induction 정도도 월등하게 높은 것으로 나타나 이를 이용한 expression vector의 유용성이 높은 것으로 생각되었다.

• 농약과학회지
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• 제21권1호
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• pp.26-32
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• 2017

6종의 인산염 화합물을 선발하여 고추 역병균 P. capsici JHAW 1-2와 탄저병균 C. acutatum JC24에 대한 항균활성 및 역병과 탄저병에 대한 방제효과를 조사하였다. 실험한 6종의 인산염 화합물은 고추 탄저병균보다는 역병균에 대한 항균활성이 더 우수하였다. 역병균에 대해서도 균사생장에 대한 억제효과보다는 P. capsici JHAW 1-2의 유주포자 나출, 유주포자낭 발아, 유주포자 발아 등에 대한 억제효과가 우수하였다. 6종의 인산염 화합물 중에서는 P. capsici JHAW 1-2에 대해서 $H_3PO_3$와 $H_3PO_4$가 가장 우수한 항균활성을 보였다. 유묘와 열매를 가지고서 실시한 병 방제 효과 검정에서도 실험에 사용한 6종의 인산염 화합물은 탄저병보다는 역병에 대한 방제효과가 우수하였다. $H_3PO_3$를 고추 유묘에 $100{\mu}g\;mL^{-1}$의 농도로 관주처리하였을 때에는 약해가 발생하여 유묘가 고사하였지만, $10{\mu}g\;mL^{-1}$의 농도를 관주처리하였을 때는 100% 방제효과를 보였다. 하지만 $H_3PO_4$는 우수한 항균활성을 보였음에도 불구하고 $100{\mu}g\;mL^{-1}$의 농도에서조차 56.7%로 효과가 낮았다. C. acutatum JC24를 고추 열매에 상처와 무상처 접종하며 인산염의 병방제 효가를 조사하였다. 6종의 화합물 중에서 $H_3PO_3$와 $H_3PO_4$의 $100{\mu}g\;mL^{-1}$의 처리구에서만 70% 이상의 효과를 보였을 뿐 다른 처리구에서의 효과는 미미하거나 인정할 수 없었다.

• 한국환경농학회지
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• 제14권3호
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• pp.296-301
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• 1995

약제, 계면활성제, 수용성 유기용매, 증류수의 조성을 가지는 농약스크리닝용 약제용액중에서 각 성분들의 역할을 명확히 이해하는 동시에 약제용액에 보다 우수한 성질을 부여할 수 있는 계면활성제를 선발하기 위하여 Tween 20을 포함한 6종의 비이온성 계면활성제 수용액의 제초제 원제 18종에 대한 용매성, 벼와 콩에 대한 전착력 및 약해를 시험하고 평가하였다. 제초제 원제에 대한 계면활성제-아세톤 수용액의 용매성은 아세톤의 첨가비에 의존하였으며, 이에 대한 비이온 계면활성제의 역할은 미미하였다. 시험한 계면활성제중 polyoxyethylene nonylphenyl ether HLB 16.0(NP-16.0)을 함유하는 아세톤 수용액이 약간 더 양호한 용매성을 보였다. 콩잎에 대한 전착력은 모든 계면활성제 수용액이 고르게 양호하였으나, 벼에 대한 전착력은 polyoxyethylene lauryl ether HLB 13.6(LE-13.6)를 함유하는 아세톤 수용액만이 양호하였다. 대부분의 계면활성제 수용액이 벼에 대해서는 약해를 유발하지 않았으나, 콩잎에 대해서는 Tween 20 0.1%, LE-13.6 0.01% 및 NP-16.0 0.01% 수용액만이 약해를 유발하지 않았다. 약제에 대한 유화성, 식물체에 대한 전착력 및 약해 안전성을 모두 만족시킬 수 있는 계면활성제는 찾지 못하였으나 시험한 계면활성제중에서는 LE-13.6이 가장 적당하였다.

• 농약과학회지
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• 제12권2호
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• pp.118-126
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• 2008

침투성 증진을 목적으로 계면활성제가 첨가된 dimethomorph 제제를 살포하였을 때 오이 엽면 침투성에 영향을 미칠 수 있는 요인들을 조사하고 비교 평가함으로써 실용적인 견지에서 각 요인을 고려한 dimethomorph의 제제와 이의 사용 방법을 제시하고자 하였다. 시험한 모든 환경요인과 식물요인 중 dimethomorph의 침투성에 가장 크게 영향을 미치는 요인은 약제를 살포한 후의 온도와, 오이 재배시 채광량과 습도 등의 인자를 반영하는 오이 잎의 왁스량이었다. 약제 살포 후 채광이 양호한 경우 침투성이 증가하였으며, 수화제나 친수기 polyoxyethylene의 길이가 긴 비이온성 계면활성제를 함유하는 아세톤 수용액과 같은 가용화 제제가 습도 변화에 안전하였다. 오이 품종에 따른 dimethomorph의 엽면 침투성 변화는 그리 크지 않았다. 이와 같은 연구 결과를 고려할 때 침투성이 증진된 dimethomorph 제제는 polyoxyethylene의 길이가 긴 비이온성 계면활성제를 함유하는 수화제가 가장 적합하였다. 또한 이러한 제제는 살포 후 온도를 적당하게 유지하고, 너무 강한 햇빛을 피하게 하는 것이 합리적인 사용방법이 될 수 있을 것이다.

• 농약과학회지
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• 제15권1호
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• pp.1-7
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• 2011

벼의 줄기에 주로 발생하는 잎집무늬마름병에 대한 thifluzamide의 방제 효과를 증진하기 위하여 벼 경엽을 통한 thifluzamide의 침투성을 강화하거나 벼 부착량을 증진할 수 있는 계면활성제를 선발하고 이를 함유하는 제제의 병 방제 효과를 측정하였다. 수화제 현탁액에 dodecaethylene glycol monohexadecyl ether를 첨가함으로써 벼 잎에 대한 thifluzamide의 침투성을 증진할 수 있었으나 병 예방효과는 오히려 감소하였다. 비이온성 계면활성제와 음이온성 계면활성제를 혼합하여 수화제 현탁액에 첨가하였을 때 유효성분 부착량이 약 5배 증대되었으나 잎집무늬마름병 예방효과는 약간 증가하여 $EC_{50}$가 5.8 mg $L^{-1}$에서 각각 4.4 mg $L^{-1}$와 3.4 mg $L^{-1}$로 감소하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제17권6호
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• pp.587-592
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• 1989

토양으로부터 분리한 호알카리성 Bacillus sp. YS-309의 조효소액을 조제하고 제핵산, ammonium sulfate 침전, DEAE-cellulose column chromatography, Sephacryl S-200 gel-filtration, DEAE-Sephadex A-50 chromatography 등을 단계적으로 수행하여 6.9배 정제된 순도 98%의 정제효소를 얻었으며, 활성염색을 실시하여 정제한 효소단백질이 $\beta$-galactosidase임을 확인하였다. 정제효소의 분자량은 205,000으로 monomer의 분자량이 56,000인 동일크기의 tetramer로 구성되어 있다고 판단되었다.

• 농약과학회지
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• 제15권2호
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• pp.166-176
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• 2011

제주도의 녹차 밭에 서식하는 딱정벌레목인 청동풍뎅이 (Anomala albopilosa)의 사체와 녹차 밭 토양에서 분리한 Bacillus thuringiensis CAB530 균주의 생물효과를 검토하였다. 이 균주는 몇 종류의 해충에 대한 살충활성에서 난방제 농업해충 가운데 하나인 파밤나방에 높은 효과를 나타냈다. 파밤나방 2령 유충에 대한 살충활성 검정에서 CAB530 균주는 $LC_{50}$값이 $1.49{\times}10^4$(cfu/$m{\ell}$)으로 고활성을 보였다. 이 균주가 생산하는 살충성 독소단백질의 SDS-PAGE에서는 파밤나방에 살충활성이 있는 기존의 B. thuringiensis subsp. kurstaki와 비슷한 130kDa의 밴드를 나타내었다. 또한 파밤나방 중장액으로 반응을 시킨 후에 약 65kDa의 활성 독성단백질을 확인할 수 있었다 PCR수행에서 CAB530 균주는 cry1Aa, cry1Ab, cry1C, cry1D, cry1F 그리고 cry1I등 6 개의 유전자가 존재하는 것으로 밝혀졌으며, B. thuringiensis subsp. kurstala기준 균주와 차이가 있었다. 딱정벌레목에서 분리 선발한 B. thuringiensis CAB530균주는 crystal의 형태와 SDS-PAGE의 결과는 B. thuringiensis subsp. kurstaki와 유사하게 나타났지만, 살충활성 검정과 PCR product 전기영동 결과는 B thuringiensis subsp. aizawai와 유사하게 나타났다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제47권3호
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• pp.339-343
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• 2004

음이온성 계면활성제인 sodium dioctyl sulfosuccinate(SDSS), sodium dodecylbenzene sulfonate(NaDBS) 및 비이온성 계면활성제인 polyoxyethylene oleyl ether(OE-7)를 선발하여 토마토 역병, 고추 역병 및 오이 노균병에 대한 예방효과, 치료효과 및 약효 지속성을 조사 하였다. 이들 계면활성제는 토마토 역병, 고추 역병 그리고 오이노균병에 대하여 우수한 1일전 예방효과를 보였다. 이들 중에 NaDBS는 가장 높은 살균 활성을 보였으며, $500\;{\mu}g/ml$ 처리에서도 토마토 역병, 고추 역병 및 오이 노균병에 대해 각각 99%, 100% 및 85%의 방제가를 나타냈다. 그러나 세 계면활성제는 접종 1일 후의 약제처리에 의해서는 낮은 치료효과를 보였다. SDSS와 NaDBS는 토마토 역병과 고추 역병에 대하여 우수한 약효 지속성을 보였으며, 특히 $NaDBS(500\;{\mu}g/ml)$는 접종 7일 전 약제처리구에서 토마토 역병과 고추 역병에 88% 이상의 방제가를 보였다. 이상의 결과로부터 SDSS와 NaDBS는 고추 역병, 토마토 역병 및 오이 노균병에 대하여 포장에서도 우수한 방제효과를 보일 것으로 판단되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제17권2호
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• pp.148-153
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• 1989

Cyclodextrin(CD) 생성효소(CGTase)를 생산하는 미생물을 토양으로부터 알칼리 (pH10.3) 조건하에서 1주 분리하여 동정한 결과, pH 7.5~ll.0까지 생육하는 절대 호알칼리성 Bacillus sp.이었다. 분리균주가 생산하는 효소는 전분으로부터 $\beta$-CD를 우선적으로 생성하는 효소임을 HPLC를 통해 분석하였으며, 이때의 $\alpha$-, $\beta$-, ${\gamma}$-CD의 생성비율은 1:10:1.5이었으나 분리균주의 효소생산 조건은 1% $Na_2$CO$_3$가 탄소원으로, 5% corn steep liquor를 질소원으로 하여 호기적 조건에서 37$^{\circ}C$, 48~60시간 진탕배양하였을 때 배양상징액으로 부터 최대 효소생산을 얻었다. Ethanol 침전방법을 이용하여 얻은 조효소액의 효소적 특성에 있어서 본 효소의 최적활성 pH는 6.0이었으며 pH 안정성은 pH 5~9까지 안정하였다. 최적활성 온도는 5$0^{\circ}C$이었으며 열안정은 5$0^{\circ}C$까지 안정함을 보였다. 본 효소의 활성염색 전기영동 결과, 대조균인 호알칼리성 Bacillus sp. ATCC 21783의 효소와 비교시 단백질의 성상에 있어서 차이점을 확인할 수 있었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제14권3호
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• pp.239-244
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• 1986

새로운 알카리내성 숙주균주를 개발하기 위하여 토양으로부터 알카리조건하에서 생육하는 미생물을 분리하고 이들 중에서 amylase활성과 Protease활성 및 항균력을 동시에 가지며 plasmid pUB 110이 형질전환 되어 이 plasmid가 안정하게 유지되는 균주를 선정하여 알카리내성 Bacillus sp. YA-14로 동정하였다. 분리균주의 amylase와 protease는 각각 pH 8.0과 pH 7.5에서 가장 활성이 높았으며 피검균으로 사용한 B. subtilis와 Sarcina lutea에 항균력을 나타내었다. 분리균주의 형질전환에는 0.4% MgSO$_4$ 가 함유된 modified SPI배지 (MSPI, pH8.0)를 사용하였으며 말기대수증식기의 균체가 적당하였다. Transformant는 20세대 계대배양 후에도 pUB,110plasmid가 안정하게 유지되어 형질발현되었다. 이 결과로부터 분리균주는 Bacillus속의 host-vector계에서 새로운 알카리내성 숙주균주로서 이용할 수 있는 가능성을 보여주었다.