• 제목/요약/키워드: 유세포분석기

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유세포분석기, 형광현미경, 용균반검사 분석을 이용한 Weissella cibaria 박테리오파지 정량분석 및 상관관계분석 (Enumeration of Weissella cibaria phage with cytometry, epifluorescence microscopy, and plaque assay)

  • 박원정;임가연;박종현
    • 한국식품과학회지
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    • 제50권2호
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    • pp.244-247
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    • 2018
  • 유세포분석기, 형광현미경 계수법과 현재 주로 활용하는 숙주감염에 의한 용균반검사법에 의한 박테리오파지를 계수하는 방법을 Weissella cibaria 박테리오파지로 비교 연구하였다. 상관관계 분석은 피어슨 상관 통계분석, 회귀분석, 차이검정등으로 하였다. 12개의 시료로 유세포분석기와 용균반검사에 의한 계수법을 비교한 결과는 피어슨 분석으로는 96.7%의 상관관계(상관값 r=0.967, $R^2=0.9352$)와 차이검정은 1.063을 보였다. 형광현미경과 용균반검사에 의한 계수법 비교결과는 피어슨 분석으로는 99.0% (상관값 r=0.990, $R^2=0.9811$) 상관관계와 차이검정은 1.605이였다. 그러므로 유세포분석기와 형광현미경 계수법은 용균반검사 계수법과 같이 W. cibaria 박테리오파지 계수에 적합할 것으로 사료된다.

세포 이미징 기능을 겸비한 생체 유세포 분석기 (In vivo Imaging Flow Cytometer)

  • 이호
    • 한국가시화정보학회지
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    • 제5권1호
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    • pp.9-11
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    • 2007
  • 유(流)세포분석기(flow cytometer)는 일정한 체적 내에 존재하는 세포의 종류 및 개체 수 등을 계측하는 장비로써 생체에서 추출한 유액상태(혈액 또는 림프액)의 세포를 모세관(micro-channel)을 통과시킬 때 발생하는 산란 및 형광 빛을 이용하여 계측한다. 유세포 분석기는 신약의 투석 후 세포수의 증감, 암세포의 전이 및 세포주기의 분석 등을 연구하는 데 사용되며 현재 Becton-Dickinson's 등에서 상용화된 제품을 생산 판매하고 있으며, 계측을 위해서는 생체에서 세포를 추출해야 한다는 단점을 가지고 있다. Harvard 의과대학에서 최근에 개발한 생체 유세포분석기(In vivo Flow Cytometer)는 생체에서 세포를 추출하지 않고 세포의 수를 계측할 수 있다[1]. 레이저가 혈관의 특정한 부위에 조사되고 있고, 이곳을 세포가 통과하면서 발생하는 형광을 계측함으로써 주어진 시간 동안 특정세포군이 얼마나 지나가는 지를 계측할 수 있는 장비이다. 본 특별기사에서는 혈류 가시화 분야의 독자를 위해 최근에 "Optics Express"에 "In vivo imaging flow cytometer"라는 제목으로 최근에 개제된 논문의 내용을 하여 소개한다[2].

마이크로컨트롤러를 활용한 표적 암세포 검출기 개발 (Design of microcontroller-based cancer cell detection system)

  • 조경래;서정혁;최세운
    • 한국컴퓨터정보학회:학술대회논문집
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    • 한국컴퓨터정보학회 2019년도 제60차 하계학술대회논문집 27권2호
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    • pp.395-396
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    • 2019
  • 표적 암세포 또는 마이크로미터 단위 이하의 미세 입자의 검출하기 위해 다양하게 사용되는 유세포분석기는 레이저와 같은 특정 파장의 광원 및 파장대별 선택이 가능한 필터, 고성능 광탐지기로 구성되어있다. 이 분석기는 표적물질의 광학적 산란특징에 기인하여 입상도와 크기, 농도 등의 물리적 정보제공이 가능하나, 고가이며 사용자의 요구에 따른 다양한 광원 및 필터의 선택이 제한적이라는 단점을 가지고 있다. 본 논문에서는 상용화된 마이크로컨트롤러, 발광다이오드, 광검출기와 필름형식의 광학필터를 사용하여 저가의 표적 암세포 검출기를 개발하고자 한다. 또한, 3D 프린터를 사용하여 사용자의 필요에 따른 설계변화와 이동이 용이하므로, 공간의 제약을 받지 않고 다양한 분야에 적용이 가능하다. 제안된 검출기의 광감지 수치는 세포의 농도에 따라 높은 선형성을 보였으며, 세포수량기를 사용한 결과 값과 비교하였을 때 무의미한 통계학적 차이를 보였다.

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유동세포분석에 의한 참전복(Haliotis discus hannai) 세포내 DNA 함량 분석 최적화 (A flowcytometric determination of DNA content in Pacific abalone, Haliotis discus hannai cell)

  • 박인석
    • 환경생물
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    • 제38권2호
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    • pp.248-253
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    • 2020
  • DNA 함량 조사는 진화의 유전적 기작을 예측하여 종분화를 파악하게 한다. 본 연구의 목적은 참전복(Haliotis discus hannai)의 DNA 함량을 측정하고 유세포분석기(flowcytometry)로 고정(fixation) 없이 DNA 함량 측정에 최적인 조직들을 파악하는 것이다. DNA 함량 (pg nucleus-1)에 있어, 원생생물에 오염된 아가미조직(2.5±0.08)은 3.2±0.02 pg nucleus-1의 DNA 함량을 보인 근육조직과 외투막조직에 비하여 유의하게 낮았고(p<0.05) standard reference보다도 낮은 반면, 근육조직과 외투막조직은 standard reference보다 높았다. 본 연구 결과들을 고려 시, 참전복에서 고정 없이 유동세포분석에 적절한 조직은 근육과 외투막이며 본 연구에 적용된 고정 과정이 없는 유세포분석법은 참전복 DNA 함량 분석 시 정확하고, 신속한 방법임이 판명되었다.

Treponema denticola sonicated extract에 의한 임파구 세포주기 차단 기전에 관한 연구 (SONICATED EXTRACT OF TREPONEMA DENTICOLA IMPAIRS THE LYMPHOCYTE PROLIFERATION)

  • 이우철
    • Restorative Dentistry and Endodontics
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    • 제27권5호
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    • pp.473-478
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    • 2002
  • 근관내 spirochetes의 존재유무가 명확하게 밝혀져 있지 않았으나 최근 PCR을 사용한 연구에서 Treponema denticola균주가 감염근관의 50% 이상의 경우에서 발견됨에 따라 이 세균이 치수 및 치근단 질환에 관여하는지에 대한 관심 이 높아졌다. 하지만 그 정확한 기전은 아직 밝혀져 있지 않다. 이와 관련하여 Shenker등이 T. denticola의 sonicated extract에서 순수분리된 단백질 (SIP)이 임파구 proliferation을 방해함을 보고한바 있다. 따라서 본 연구의 목적은 면역억제단백질 SIP이 어떤 기전에 의해서 임파구증식을 억제하는지를 밝히는 데 있다. 건강한 혈액 공여자로부터 추출해낸 T세포에 PHA (phytohemagglutinin)로 증식자극을 주게되는데 이 과정에서 SIP을 처리하거나 처리하지 않은 경우를 비교하여 세포주기 진행과정을 유세포분석기 (Becton-Dickinson FACS$^{tarplus}$) 를 통하여 평가하였다. 실험결과 세단계의 chromatography과정을 통해 순수정제된 SIP은 50kDa와 56kDa의 두가지 polypeptide로 구성되어 있고 0.25$\mu\textrm{g}$으로 처리된 T 임파구는 42.5%의 [$^3$H]thymidine incorporation 억제가 그리고, 0.5$\mu\textrm{g}$으로 처리한 경우는 75.1%의 억제가 일어나 dose-dependent한 양상이 나타났다. Propidium iodide와 유세포 분석기를 사용하여 세포주기를 분석한 결과 medium으로만 처리한 경우 97%이상의 임파구는 G$_0$/G$_1$ phase에 머물러 있었으나 PHA자극을 받은 경우 G$_0$/G$_1$ phase에서 58%, S phase에서 34.6%, G$_2$/M phase에서 7.4%로 분포되어 나타났다. SIP으로 전처리한 경우 세포 증식이 감소하여 0.25$\mu\textrm{g}$을 첨가한 경우 75.1%가 G$_0$/G$_1$ phase에 머물러 있었고 더 강한 농도의 0.5$\mu\textrm{g}$을 첨가한 경우는 87.7%가 G$_0$/G$_1$ phase에서 S phase로 진행되지 않고 머물러있었다. 따라서 SIP으로 전처리된 T 임파구는 그 증식이 G$_0$/G$_1$ phase에서 차단된 것으로 보인다. 이러한 면역억제현상이 in vitro 상태뿐 아니라 in vivo에서도 진행된다면 spirochete가 치수 및 치근단 질환의 병인론에 연관된 면역반응저하기전에 중요한 역할을 하는 것으로 추론할 수 있다.

카테콜기가 도입된 헤파린의 표면고정화에 의한 아데노연관바이러스의 발현 억제에 관한 연구 (Significant Attenuation of Aden-associate Virus Gene Expression by Catechol-conjugated Heparin Surface Coating)

  • 도민재;이슬기림;장재형;이해신
    • 접착 및 계면
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    • 제17권4호
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    • pp.149-154
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    • 2016
  • 일반적으로, 화학 물리적 변성이 수반되는 멸균방법을 적용하지 못하는 경우 필터여과에 의한 멸균 방법을 주로 사용한다. 하지만 바이러스의 경우 100 nm의 작은 크기로 인해 박테리아 제거에 사용되는 필터여과에 의한 멸균 방법을 적용하기가 어렵다. 본 논문에서는 화학 물리적 변성 없이 바이러스를 비활성화하는 물질 개발을 위하여, 카테콜기가 도입된 헤파린 고분자(Hep-C)를 합성하였다. Hep-C의 바이러스 비활성화 효과를 알아보기 위해서 표면이 노르에피네프린으로 코팅된 조직배양접시에 아데노연관바이러스(Adeno-associated virus; AAV)를 고정화하였으며, 그 위에 다시 Hep-C를 코팅하여 녹색형광단백질(GFP) 유전자를 전달할 수 있는 AAV의 비활성화 정도를 유세포분석기(FACS)를 이용하여 분석하였다. 그 결과 AAV에 Hep-C를 도포하면 99%에 달하는 비활성화 효과를 보였으며, 헤파린 고분자를 도포한 결과에 비해 강한 염 저항성을 확인할 수 있었다. 이러한 결과로 미루어 보아 제조된 Hep-C는 AAV 바이러스 제거의 효과적 방법으로 충분한 가능성을 가짐을 증명하였다.

강변여과에서의 은나노입자의 영향 : 실험실규모 컬럼 실험 (Effect of silver nanoparticles on the performance of riverbank filtration: Column study)

  • 이동현;노진형;김현철;최재원;최일환;맹승규
    • 상하수도학회지
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    • 제29권1호
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    • pp.77-88
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    • 2015
  • Soil column experiments were evaluated effects of silver nanoparticles (i.e., 0, 2.5, 5, and 10 mg/L) on the microbial viability which is strongly associated with the degradation of organic matter, pharmaceutically active compounds(PhACs) and biological oxidation of nitrogenous compounds during river bank filtration. The addition of silver nanoparticles resulted in almost no change in the aqueous matrix. However, the intact cell concentration decreased with addition of silver nanoparticles from 2.5 to 10 mg/L, which accounted for 76% to 82% reduction compared to that of control (silver nanoparticles free surface water). The decrease in adenosine triphosphate was more pronounced; thus, the number and active cells in aqueous phase were concurrently decreased with added silver nanoparticles. Based on the florescence excitation-emission matrix and liquid chromatograph - organic carbon detection analyses, it shows that the removal of protein-like substances was relatively higher than that of humic-like substances, and polysaccharide was substantially reduced. But the extent of those substances removed during soil passage was decreased with the increasing concentration of silver nanoparticles. The attenuation of ionic PhACs ranged from 55% to 80%, depending on the concentration of silver nanoparticles. The attenuation of neutral PhACs ranged between 72% and 77%, which was relatively lower than that observed for the ionic PhACs. The microbial viability was affected by silver nanoparticles, which also resulted in inhibition of nitrifiers.

유세포분석기를 이용한 정상치수조직과 염증성 치수조직 내의 임파구 분포에 관한 연구 (FLOW CYTOMETRIC ANALYSIS OF LYMPHOCYTES IN NORMAL AND INFLAMED PULP)

  • 김선아;배광식;임성삼
    • Restorative Dentistry and Endodontics
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    • 제22권1호
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    • pp.374-387
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    • 1997
  • The purpose of this study was to examine the distribution of lymphocyte populations in normal, reversibly inflamed and irreversibly inflamed human dental pulp tissues using flow cytometry. Flow cytometry, with specific antibody and fluorochrome reagent allows us to know cellular properties of hematolymphoid cells by measuring fluorescence of stained cells. Before extirpation of pulps in routine endodontic treatment, the clinical diagnosis were performed by symptom. The extirpated pulp tissues were divided into normal pulp group (N=5), reversible pulpit is group(N=10) and irreversible pulpitis group(N=7). The specimen was placed into RPMI 1640 medium, minced into small pieces, and then digested in medium with collagenase. The cell suspension was resuspended in PBS for monoclonal antibody staining of T lymhocytes(CD3+), B lymphocytes (CD19+), T helper cell (CD4+) and T supressor cell (CD8+). The percentages of cells were counted by FACStar(BD) flow cytometer. Following results were obtained; 1. In the most normal and inflamed pulps, the percentages of T lymphocyte, B lymphocytes, T helper cell and T suppressor/cytotoxic cell were less than 1 % in total counted pulpal cells. 2. The higher percentages of T, B, T helper and T suppressor cells were observed in irreversible pulpitis group as compared with the normal pulp and reversible pulpitis group but the differences between groups were not statistically significant (p>0.05). 3. The percentages of T helper cells (CD4 + cells) were greater than that of T suppressor/cytotoxic cells (CD8 + cells) in the inflamed pulps.

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북방전복, Haliotis discus hannai 3배체의 세포유전학적 연구 (Cytogenetic Analysis of the Triploid Pacific Abalone, Haliotis discus hannai)

  • 지영주;장영진
    • 한국패류학회지
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    • 제28권1호
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    • pp.37-43
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    • 2012
  • 북방전복, Haliotis discus hannai의 3배체를 제온자극으로 유도하고 부화유생인 trochophore를 이용하여 염색체 표본을 만들었고, 유도된 3배체와 정상 2배체 북방전복은 실내 유수식의 동일 환경에서 51개월 동안 사육되었으며 채취된 혈구를 채취하여 DNA 함량 측정에 사용되었다. 2배체 및 유도된 3배체의 염색체 수를 조사한 결과, 2배체 염색체 수는 2n = 36으로 나타났고, 3배체의 경우에는 3n = 54로 나타나 3배체는 2배체에 비해 1.5배의 염색체 수를 나타내었다. Flow cytometry로 인간의 백혈구를 control로 하여 북방전복의 DNA 함량을 측정한 결과, 북방전복의 DNA 함량은 1.743 pg/cell이었으며 3배체 북방전복의 DNA함량은 2배체 전복의 1.49배의 DNA 함량을 나타내어 3배체 특성인 모계 2n DNA 함량과 부계 n DNA함량을 나타내었다.