Transformed hairy roots were induced from in vitro grown plantlets of Trichosanthes kirilowii by infection with Agrobacterium rhizogenes strain ATCC15834. Transformed hairy roots exhibited active growth with high branching of roots on plant growth regulators-free medium. Cloned line (TR-03) of hairy root was tested for its growth and extracellular protein accumulation in medium under various culture conditions. Among the culture media tested, a full-strength MS medium had a pronounced effect on root biomass and extracelluar protein accumulation in medium. The maximum root biomass (2.4 g DRW/flask) and extracellular total protein contents $(28.3ug/m\ell)$ in medium was obtained at inoculum size of 2 g (FRW) and in MS medium supplemented with 4% sucrose. In addition, the optimal shaking speed for root growth and extracellular protein accumulation in medium were 100 rpm. The total extracellualr protein concentration reached a maximum of $28.3ug/m\ell$ at 4 weeks and decreased thereafter. Protein translation inhibitory activity was observed in culture broths and reached levels of 21.3 unit. These studies demonstrate that the transformed hairy roots can be utilized for the in vitro production of ribosome-inactivating proteins.
Poliovirus is a member of enterovirus which causes paralytic poliomyelitis, encephalitis and aseptic meningitis. Since poliovirus is spread by the fecal-oral route and poliovirus-contaminated water could be a potential threat for public health, detection of poliovirus in drinking water resource is important. Infectious poliovirus and poliovirus inactivated by heat or UV were used to test three detection methods such as cell culture method, reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and integrated cell culture (ICC)-PCR. Infectious poliovirus was detected by all three methods and ICC-PCR was the most sensitive and fast in detecting poliovirus. Inactivated polioviruses could not be detected by cell culture or ICC-PCR methods. On the other hand, heat- inactivated viruses could be detected by RT-PCR. Thus it is suggested that ICC-PCR method is the most sensitive and effective in detecting infectious polioviruses in water sample.
Until now, it was diIliculi to overproduce lignin peroxidase(LiP) fiom Pl~anemchaete ch~ysosporium since the lack of optimized growth conditions. In this paper, we optimized the LIP production conditions and monitored LIP isozyines of fl chqsospoi.ium PSBL-1. The optimized condition includes sponge matrix support, no addition of $MnSO_4$, excess addition of niixogen source(48 inM diarmnonium), and addition of stabilizer(2 mM verakyl alcohol). Finally we obtained Lip activity of 1,800 unitsll. HI isozyne was overproduced when inyceliuin was cultivated in media containing $Mn^{2+}$ (2.73 inM) and excess nitrogen(48 11d4 diannnonium). Three azo dyes(acid yellow 9, congo ued, orange IT; each concenimtion of50 $\mu$M) we1-e rapidly decolorized within 2 inins by 0.4 un~t or Lip.
Candida brumptii was one of the best isolates which could grow on alcohol distillation slops (reported in the previous paper). Attempts were made to investigate the cultural conditions for cell mass production by this strain, and the results obtained were as follow. The supernatant of the alcohol distillation slops without dilution support ed better growth of the strain than diluted ones. The addition of ammonium sulfate (0.2%), ammonium phosphate (0.1-0.2%), potassium phosphate (0.2%) to the supernatant resulted in positive effects for the growth, among the various inorganic nitrogen and other salts supplements. BOD and COD of the supernatant were reduced approximately 30% and 20%, respectively in 3 days culture. Cell production was maximized when grown at $35^{\circ}C$ and pH 5.0. The yield of cell mass was 1.03% by dry weight and its crude protein content was about 52.65%
This study was conducted to determine the effect of extract of Cervi pantotrichum cornu on human sperm motility, Four different types of media were prepared such as plain Ham's F-10 medium(control medium), control medium containing 0.3% bovine serum albumin(BSA)(medium A), control medium containing the extract of Cervi pantotrichum cornu aqua-acupuncture medium(medium B) and medium B containing 0.3% BSA(medium C). Human semen were washed and divided into 4 fractions and sperm were cultured in those medium for up to 72 hours at 37$^{\circ}C$ in a humidified atmosphere of 5% $CO_2$ in air. A total twenty eight semen samples including 14 normozoospermia and 14 asthenospermia were used for this study. In normozoospermia group, motility of control medium and medium A, B and C were 4.1%, 1.3%, 64.5%, and 77.1%, respectively after 24 hours of incubation, and were 0.0%, 0.0%. 8.8% and 44.9%, respectively after 48 hours of incubation. In asthenospermia group, motility of control medium and medium A, B and C were 2.0%, 2.2%, 58.3% and 85.1%, respectively after 24 hours of incubation, and decreased to 0.0%, 0.2%, 5.8% and 29.6%, respectively after 48 hours of incubation. In both groups, highest sperm motility was observed in medium C group when compared with other media. Furthermore motile sperm were found in medium C after 72 hours of incubation while no motile sperm was observed in the other media. Therefore it could be concluded that the extract of Cervi pantotrichum rornu affects on the human sperm motility.
Park, Yun-Young;Cho, Moon-Soo;Lee, Young-Deuk;Chung, Jong-Bae;Park, Shin;Jeong, Byeong-Ryong;Park, Sang-Gyu
Journal of Plant Biotechnology
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v.34
no.1
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pp.1-6
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2007
Effect of BA concentrations and culture methods on in vitro plant multiplication from shoot-tip cultures of Wasabia japonica was studied. Shoot-tips with leaf primordia and apical meristem were cultured on MS basal medium for all the experiments. Liquid medium for 2 weeks followed by semi-solid medium for 4 weeks containing 1.0 mg/L BA was the best to number of shoots (22.8) and shoot length (3.5 cm). Shoots proliferated could be divided into ca. 5 to 11 of cultures for the multiplication of plantlets. Divided plantlets showed root formation (90%) well onto MS basal medium without growth regulators like IBA and NAA. After rooting, all the plantlets transferred into the pots containing composed soil (bio-media Co., peatmoss $8{\sim}10%$, coir dust $66{\sim}70%$, zeolite $13{\sim}17%$, vermiculite $3{\sim}7%$, perlite $2{\sim}4%$) and grown well into whole plants with multiple shoots.
Proceedings of the Korean Society for Agricultural Machinery Conference
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2002.02a
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pp.457-463
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2002
이 연구는 x-선 투과영상을 이용하여 홍삼의 내공을 검출하기 위하여 수행되었다. 이를 위하여 x-선관에 조사되는 x-ray 양의 차이에 따른 위치별 밝기 값 차이를 보정하고 내공 검출에 적합한 영상처리 알고리즘을 개발하였다. 주요연구 결과를 요약하면 다음과 같다. 1) x-선관에 조사되는 x-ray양은 중심에서 가장자리로 갈수록 감소하며, 이것은 위치에 따른 gray 값의 분포가 달라지게 되는 원인이 되었다. 2) 홍삼을 2치화 하기 위해서는 동일한 x-선 조사강도에서 입력된 원 영상에서 빈 영상을 뺀 감산 영상을 만들어 줌으로써 가능하였다. 3) 조사강도 별 감산영상처리 결과 36kV/4.15mA와 39kV/4.15mA에서는 조사량이 많아서 홈삼 지근 부분의 영상이 손실되는 경우가 발생하였다. 4) 내공 검출을 위해서는 정상부분과 내공부분의 자기 값 차이를 크게 하는 전처리 영상을 만들 필요가 있었고, multiple 감산영상에서 뚜렷한 골짜기가 나타났으나 주근의 내공부분의 밝기값 보다 지근의 정상부분의 자기 값이 더 낮게 나타나 이를 보정하기 위하여 홍삼 위치에 따라 부분 보정된 알고리즘을 개발하였다. 5) x-선관의 놓인 위치에 따라서 내공판정시험 결과 중심에 있을 때에 비해 가장자리에 있을 때는 영상이 일부 손실되었으며, 중심 위치에서 서로 다른 굵기의 홍삼에 대해서는 모두 양호한 결과가 나타났다. 6) 완전한 홈삼으로 내공판정시험 결과 내공주위의 정상부분가지도 일부 내공으로 잘못 검출되었으나 이것을 재차 line profile에 의해 한 라인씩 문턱 값을 설정하여 내공만을 정확하게 판정하는 알고리즘을 개발하였다.양체의 접종작업은 모든 배양실이 인력에 의존하였으며, 배양체를 배지와 분리하여 불필요한 부분을 제거하고 배양작물에 따라 생육정도를 2~3등급으로 구분하여 배양용기의 배지 위에 치상하는 과정으로 수행되었으며, 작업능률은 호접란의 경우 배양병에 25본을 접종하는데 시간당 6병, 심비디움은 원형 플라스크에 25본을 접종하는데 시간당 10병 정도였다. 바. 식물체의 대량증식에 사용되는 플라스크, 배양병, PE용기 등 배양용기의 세척작업은 농원의 1개배양실에서 간이식 세척기, 이 외의 9개배양실은 모두 물에 담겨 두었다가 세제와 브러쉬 등을 사용하여 인력으로 세척하고 있어 생력화 기술개발이 요구되었다.도가 빠를수록 건조속도가 빨라졌으며, 건조에너지도 1,334kcal/kg.water로 비슷하게 소요되었다. 마. 시험구와 대비구의 건감률은 시험구에서 1.08~1.36w.b./h로 나타나 대비구보다 약 9.9~18.3%가 높게 나타났고, 건조에너지는 10.2~14.6%가 절감되었다. 발아율은 열풍온도가 낮을수록 높게 나타났고 시험구가 대비구보다 발아율이 낮게 나타났으며, 동할률 증가량도 원적외선.열풍 복합건조방법이 높게 나타나 이것은 곡물 표면에 원적외선 방사에의한 복사열이 전달되어 열장해를 받았기 때문으로 판단되며, 금후 더 연구하여 적정 열풍온도 및 방사체 크기를 구명해야 할 것이다.으로 보여진다 따라서 옻나무 유래 F는 포유동물의 생식기능에 중요하게 작용하는 것으로 사료된다.된다.정량 분석한 결과이다. 시편의 조성은 33.6 at% U, 66.4 at% O의 결과를 얻었다. 산화물 핵연료의 표면 관찰 및 정량 분석 시험시 시편 표면을 전도성
Optimal conditions for utilizing the slaughtered porcine blood and liver for yeast culture and the effects of the yeast cultures on the growth of broiler chicks were investigated. The quantity of yeast cultured for 24hours in the BSG medium containing blood extracts containing 5% glucose and in the LSG medium containing liver extracts containing 5% glucose were higher by 4% and 10%, respectively, than that in the YEPD medium containing 1% yeast extracts, 2% bacto pepton and 2% glucose. Optimal concentrations of ammonium sulfate supplementation to the BSG medium to increase the quantity of yeast cultured for 24 and 48 hours were 100 mM(1.3%) and 50 mM(0.65%), respectively. The optimal pH for yeast culture in BSG medium ranged from 6 to 7. One percent supplementation of either ammonium sulfate or taurine to LSG medium increased the quantity of yeast by 18% and 9%, respectively, compared to no supplementation. The body weight of chicks fed with 2% and 4% yeast culture supplementations cultivated increased at the 4th week by 10%, with relative to no supplementation. The results from this study suggest that the slaughtered porcine blood and liver can be utilized for yeast culture which is used in animal diets.
Park Eun-Joon;Kim Jin-Ae;Lee Jong-Suk;Jang In-Chang;Yoon Michung;Chung Sang-Ho;Kim Moonza
Journal of Plant Biotechnology
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v.32
no.1
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pp.37-44
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2005
Microspores were isolated from pepper (Capsicum annuum L.) anthers by using a micro-blender and cultured in modified NLN medium at $25^{\circ}C$. The influence of pretreatment period at $32^{\circ}C$, adding the 2-hydroxynicotinic acid to a pretreatment medium, and co-pretreatment anthers with microscopes on the induction of embryo were examined. Globular and torpedo embryos were observed from 3 weeks after culture. Embryo development was not synchronized within culture. After 4 weeks in culture, in addition to globular and torpedo embryos, cotyledonary embryos were observed. Normal cotylodonary embryos developed into plantlets when transferred to a solid hormone free B5 medium containing $2\%$ sucrose. Embryo yields were significantly higher after 1- and 2-day pretreatment at $32^{\circ}C$. However the development of embryo ceased at the globular or heart stage. In contrast, embryo yields were lower after 3- to 6-day pretreatment at $32^{\circ}C$ and embryo developed at the cotyledonary stage. After adding the 2-hydroxynicotinic acid to anther pretreatment solution, embryo yields were slightly increased. However most embryos occurred were at the globular or heart stage. Co-pretreatment of microspores with anthers was deleterious for embryo induction and development. AS far as we know, this is the first report of success in obtaining high frequency of embryogenesis and plantlets formation from isolated microspores of pepper. Although the culture conditions have to be optimized further, this promising microspore culture system can be used for genetic transformation, selection for dominant and recessive traits as well as for the production of homozygous doubled haploid plants.
Lee Hyung Sik;Park Hong Kyu;Hur Won Joo;Seo Su Yeong;Lee Sang Hwa;Jung Min Ho;Park Heon Joo;Song Chang Won
Radiation Oncology Journal
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v.16
no.2
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pp.91-98
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1998
Purpose : The relationship between environmental PH on the radiation induced-apoptosis in SCK mammary adenocarcinoma cells and cell cycle dependence was investigated. Material and Methods : Mammary adenocarcinoma cells of A/J mice(SCK cells) in exponential growth phase were irradiated with a $l37^Cs$ irradiator at room temperature. The cells were irradiated 1 hour after the media was replaced with fresh media at a different pHs. After incubation at $37^{\circ}C$ for 0-48 h, the extent of apoptosis was determined using agarose gel electrophoresis and flow cytometry. The progression of cells through the cell cycle after irradiation in different pHs was also determined with flow cytometry. Bssults : The induction of apoptosis by irradiation in pH 6.6 medium was markedly less than that in pH 7.5 medium. When the cells were irradiated and maintained in pH 7.5 medium, the percentage of cells in $G_2/M$ phase rapidly increased to about $70\%$ at 12 h after an exposure to 120y and returned to control level by 36 h. The percentage of cells in G1 phase decreased as the percentage of cells in $G_2/M$ increased. On the other hand, in pH 6.6 medium the percentage of cells in G2/M phases gradually increased to about $45\%$ at 24 h after 12Gy irradiation and then slowly recessed and consequently, as much as $30-35\%$ of the cells were still in the Ga/M phase 48 h after irradiation. The percentage of cells in G1 phase then increased as the Ga/M arrest began to recede. The radiation-induced Ga/M arrest in PH 0.0 medium lasted markedly longer than that in pH 7.5 medium. Conclusion : Radiation-induced apoptosis in SCK tumor cells are reversely suppressed in an acidic environment. Radiation-induced Ga/M arrest is prolonged in an acidic environment indicating that the suppression of radiation-induced apoptosis and prolongation of radiation-induced Ga/M arrest in an acidic environment are related.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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