In order to induce somatic embryogenesis from the stem explants and anther of Kalanchoe daigremontiana, the explants were cultured on MS medium supplemented with auxin (2,4-D, IAA, NAA) and/or cytokinin (BAP) for 8 weeks. Callus from explants was induced most efficiently on MS medium containing. 2.0mg/L NAA and 0.2mg/L BAP. Somatic embryogenesis in stem callus was formed by transfering embryogenic callus from induction media containing growth regulators to medium without growth regulators and then to the medium containing auxin and cytokinin (0.1 mg/L IAA and 1.0mg/L BAP). Callus formation occurred actively in the anthers at early uninucleate stage, and by low temperature pretreatment at $4^{\circ}C$ for 3days. Somatic embryogenesis from the anther callus was induced on MS medium containing 1.0mg/L NAA and 1.0mg/L BAP, 2.0mg/L NAA and 0.2mg/L BAP. The tetraploid of 5.4% was obtained among plants regenerated from anthers.
The explants of yacon (Polymnia sonchifolia Poeppig & Endlicher) were cultured to invest th8e dedifferentiation condition, and formative callus from leaf was cultured to find the regeneration and micro-crown bud formation. Basal MS medium was more effective to form callus than 1/2 MS and B$_{5}$ medium. Calli formations from leaf, petiole and lateral bud were more effective on MS medium supplemented with 1.0, 2.0 mg/L 2,4-D and 0.2, 0.4 mg/L kinetin or BA than 1.0, 2.0 mg/L NAA and 0.2, 0.4 mg/L kinetin or BA. Formative callus from leaf was proliferated about 70% on medium supplemented with 1.0 mg/L BA. When callus was proliferated, 63% regeneration rate was shown on medium supplemented with 1.0, 2.0 mg/L BA in case of subculture for 3~4 months but was not shown on medium supplemented with 1.0, 2.0 mg/L kinetin. Micro-crown bud formed as addition of BA at 3~4 months after callus culture and then was obtained many at 5~6 months, it was most formed about 82% on medium supplemented with 5 mg/L BA. Rate of micro-crown bud formation was increased as more over 5 mg/L BA concentration, when this time, however, shoot had thick leaves and short internodes, and then withered before long, Micro-crown bud was formed about 88.0% on medium supplemented with 5% sucrose, that was more increased 28% than with 3% sucrose. The buds of crown bud between harvested in field and formed in vitro were difference only in size, but both were similar in shape according to histological view.
To detect the effects of gelling agent brands and concentration on rice anther culture, anthers of rice(O. sativa L. japonica, cv, Nagdongbyeo) were inoculated on N6-Y1 basic media supplemented with 0.4~1.6% Bacto agar(Difco, 04140-01), Agarose(Sigma, Type 1) and 0.2~0.8% Gelrite(Kelco, 143364) as gelling agents. On 0.4% Bacto agar and Agarose media, the frequency of callus formation which was significantly decreased in proportion to gelling agent's concentration was 39% and 55%, respectively. On 0.6% Gelrite media, the frequency of callus formation which was not statistically significant among the 0.2~0.8% concentration was 44%. Calli derived from the higher concentration of gelling agents showed embryogenic with slow growth, small, whitish and hard shape compare to that of the lower concentration. The frequency of green plant regeneration was high not only in calli derived from the higher concentration but also in plant regeneration medium with the higher concentration after callus transfer. Calli derived from the higher concentration was effective to maintain the frequency of green plant regeneration up to 60 days after anther inoculation. Introduction of 0.6~0.8% Geltite for callus formation, then transferred 1.6% Bacto agar and Agarose or 0.8% Gelrite for green plant regeneration was effective to increase anther culture efficiency.
Kim, Young-Mun;Kang, Sung-Il;Jang, Young-Boo;Jun, Byung-Jin;Kong, Jai-Yul
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.38
no.2
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pp.249-255
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2006
The optimum culture conditions for the ice nucleating activity and the cell growth of Xanthomonas translucens KCTC 2751 were investigated. The optimum initial pH and temperature for the cell growth and the ice nucleating activity were 6.5 and $25^{\circ}C$, respectively. The optimum culture medium for the ice nucleating activity was composed of 1.0% maltose, 1.4% yeast extract, 0.8% digested of gelatin, and 0.03% KCI in distilled water. Freezing operations carried out on distilled water showed that the degrees of supercooling were $-7.90^{\circ}C$ without ice nucleators, $-1.56^{\circ}C$ with silver iodide as a commercial ice nucleator, and $-1.36^{\circ}C$ when Xanthomonas translucens KCTC 2751 were added. During progressive freeze-concentration assays, the addition of Xanthomonas translucens KCTC 2751 led to lower saccharose concentrations in the crystals, while the cells led to higher saccharose concetrations in the concentrated phase.
Sohee Kim;Sehyuk Oh;Sanghun Park;Eunjin Kim;Jungseok Choi;Hwayong Lee
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.66
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pp.60-66
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2023
Lentinula edodes is one of the most produced mushrooms in the world. In this study, the effects of L. edodes water extracts and lentinan, a beta-glucan from this mushroom, on the proliferation of Bos taurus Hanwoo myosatellite cells were studied. The betaglucan content of the L. edodes water extract was approximately 15.20% at 85 ℃ for 4 h, 13.64% at 100 ℃ for 4 h, 9.48% at 40 ℃ for 8 h and 8.21% at room temperature for 24 h. L. edodes water extract was added to the culture of Hanwoo myosatellite cells. The expression of the MyoD gene increased in the addition of the extract at 40 ℃ for 8 h and 100 ℃ for 4 h, and the expression of the Myogenin gene increased in the addition of the extract at 40 ℃ for 8 h, but proliferation and activity did not increase compared to no addition. However, the addition of lentinan to the culture of Hanwoo myosatellite cells increased the expression of Myogenin gene related to muscle formation increased and the proliferation and viability of the cells. This study proved that the components of L. edodes can affect the proliferation of Hanwoo myosatellite cells, and further research will help develop the mushroom industry and cultured meat industry in the future.
Aspergillus niger B-15 with strong Endo-polygalacturonase (Endo-PG) activities was selected out from a total of 1,573 fungal strains isolated from various testing materials. A mutant strain, U-46, was obtained from the Aspergillus niger B-15 by repeated irradition of ultra-violet light. The objectives of the study were to investigate the fungal properties of the parental and mutant strains obtained and to study the condition of enzyme production and reaction. The results obtained are summarized as follows: 1. The size of conidial head of the U-46 mutant was smaller than that of the parental strains, B-15 and the length of the conidiophore was also shorter than that of the parental strains. 2. The optimum conditions for the Endo-PG production of the parental B-15 strain in the wheat bran Koji were obtained when 40% of water was added to the wheat bran and the temperature was 30 to $35^{\circ}C$. However, the best condition for the mutant U-46 strain was attained when 60 to 70% of water was added and the temperature was $35^{\circ}C$. The optimum growing periods were two to three days for both parental and mutant strains. 3. Under the optimum producing conditions of each strains, the enzymatic activity of the mutant U-46 was 20 times higher than the Endo-PG of the parental strain, B-15. 4. When both strains were cultured in the wheat bran Koji containing 60% of water at $35^{\circ}C$ for three days, the mutant strain. U-46, was about 46 times higher in the Endo-PG activity and about 18 times greater in Exo-PG activity than the parental strain, B-15. The activities of cellulase, $\alpha$-amylase, and glucoamylase were also highly increased in the mutant strain. 5. The mutant strain, U-46, increased its Endo-PG activity up to 20% over that of ordinary case when 1.2 to 1.5% of ammonium sulphate was added to the wheat bran. 6. The optimum condition for Endo-PG activity of crude enzyme of the mutant strain, U-46, was attained when pH of reaction solution was 4.0 to 4.5 and the temperature was $50^{\circ}C$.
The genetic variations and the rate of mycelial growth in the dikaryon and the monokaryon stages of Pleurotus spp. were surveyed during their subcultures. The highest growth rate was observed on both the 3rd and the 4th subcultures. The remarkably rapid growth rate was detected in P. ostreatus dikaryon. Genetic similarities in the dikaryon and the monokaryon of P. ostreatus were more than 57.5% and 85.7%, respectively, and those of P. eryngii were more than 85.2% and 84.8%, respectively. The genetic similarities of monokaryotic P. ostreatus were higher than those of dikaryotic. The topology of phylogenetic trees showed that the divergence and the clustering patterns of branch did not correlated with the number of subcultures. This suggests that genetic variations occur very randomly on mycelial cultures. These results suggest that the monokaryotic mycelia is genetically more stable than the dikaryotic in subcultures, and that it is very useful to stock monokaryotic mycelia for making spawns and breeding of Pleurotus spp.
The present study was designed to demonstrate that ES cell lines efficiently could be isolated from explanted blastocysts of hybrid BCF1 mouse when grown on STO feeder layer derived from mouse fibroblasts in culture medium supplemented with leukemia inhibitory factor (LIF). The expanded blastocysts were attached to mitomycin C-inactivated STO feeder layer and were cultured for 4 days. Four days later the ICM was disaggregated by a short term trypsin treatment (0.25% trypsin / 0.04% EDT A for 2-3 min). The resulting cell suspension was seeded on a new STO feeder layer and covered with DMEM supplemented with 10% FCS, 0.1 mM nonessential amino acid, 0.1 mM sodium pyruvate, 0.1 mM mercaptoethanol and 1,000 U/ml LIF. Colonies of ES-like cells were observed after the second passage. These colonies were repeatedly passaged at approximately 5 day intervals. In this study, five ES-like celllines were isolated by directly explanting blastocysts, but three lines were lost after the 5th passage, possibly due to toxic effects of a new FCS batch. The characterization of developmental potential of isolated cell lines was performed with respect to in vitro differentiation and specific activity of alkaline phosphatase (AP). When cells were cultured in suspension, the aggregates of cell lines were capable of forming simple embryoid bodies (EB), and showed the capacity for forming cystic multilayer EBs. In addition, the cell lines were positive for AP staining, a biochemical marker characteristic of mouse ES cells.
Proceedings of the Korean Society for Agricultural Machinery Conference
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2002.02a
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pp.438-443
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2002
본 연구는 수도작에서 토양과 식물체의 분광반사특성과 영상처리를 이용한 기계시각 잡초검출 센서를 개발하기 위한 기초연구로서 분류하고자 하는 대상체들의 분광반사율을 조사하여 주요한 파장을 선정하고 선정된 파장을 이용한 판별분석을 통해 각 대상체에 대한 분류 정확도를 중심으로 잡초검출 가능성을 조사하기 위하여 수행하였으며, 실험으로부터 얻은 결론은 다음과 같다. 1. 토양과 식물체를 구분하는데 효과적인 파장은 마른 토양의 경우 680 nm, 배수 토양에 있어서는 810 nm로 선정하였고, 토양을 배제한 후 벼와 잡초를 구분하기에 효과적인 파장은 580, 680 nm로 선정하였다. 2. 토양과 식물체를 구분하기 위한 판별분석 결과 2가지 토양상태 모두 식물체와 완전히 구분 가능한 것으로 나타났다. 벼와 잡초를 구분하기 위한 실험에서, 벼는 98%의 분류정확도로 구분이 가능하였고, 잡초는 83%의 분류정확도로 구분이 되는 것으로 나타났다. 따라서 차후 분광학적 원리를 이용한 센서를 제작할 때 본 연구에서 선택한 주요 파장과 판별함수를 이용하여 장치를 구성하고 알고리즘을 제작한다면 벼, 잡초, 토양을 효과적으로 구분이 가능할 것으로 판단되었다. 3. 컬러 CCD 카메라를 사용하는 경우에 있어 식물체와 토양을 구분하기 위해 3 종의 파장 중 630 nm 파장만의 이용을 고려하여 그 분류성능을 분석한 결과, 식물체와 토양은 소수의 관측치를 제외하고 완전히 구분이 가능했고, 벼와 잡초를 구분한 결과에서는 비교적 높은 분류능력을 가진 것으로 나타나 차후 컬러 CCD 카메라를 이용하여 장치를 구성하는데 좋은 기초가 될 것으로 판단된다. 배양체의 접종작업은 모든 배양실이 인력에 의존하였으며, 배양체를 배지와 분리하여 불필요한 부분을 제거하고 배양작물에 따라 생육정도를 2~3등급으로 구분하여 배양용기의 배지 위에 치상하는 과정으로 수행되었으며, 작업능률은 호접란의 경우 배양병에 25본을 접종하는데 시간당 6병, 심비디움은 원형 플라스크에 25본을 접종하는데 시간당 10병 정도였다. 바. 식물체의 대량증식에 사용되는 플라스크, 배양병, PE용기 등 배양용기의 세척작업은 농원의 1개배양실에서 간이식 세척기, 이 외의 9개배양실은 모두 물에 담겨 두었다가 세제와 브러쉬 등을 사용하여 인력으로 세척하고 있어 생력화 기술개발이 요구되었다.도가 빠를수록 건조속도가 빨라졌으며, 건조에너지도 1,334kcal/kg.water로 비슷하게 소요되었다. 마. 시험구와 대비구의 건감률은 시험구에서 1.08~1.36w.b./h로 나타나 대비구보다 약 9.9~18.3%가 높게 나타났고, 건조에너지는 10.2~14.6%가 절감되었다. 발아율은 열풍온도가 낮을수록 높게 나타났고 시험구가 대비구보다 발아율이 낮게 나타났으며, 동할률 증가량도 원적외선.열풍 복합건조방법이 높게 나타나 이것은 곡물 표면에 원적외선 방사에의한 복사열이 전달되어 열장해를 받았기 때문으로 판단되며, 금후 더 연구하여 적정 열풍온도 및 방사체 크기를 구명해야 할 것이다.으로 보여진다 따라서 옻나무 유래 F는 포유동물의 생식기능에 중요하게 작용하는 것으로 사료된다.된다.정량 분석한 결과이다. 시편의 조성은 33.6 at% U, 66.4 at% O의 결과를 얻었다. 산화물 핵연료의 표면 관찰 및 정량 분석 시험시 시편 표면을
In order to investigate the production of aflatoxin in various conditions such as pH, moisture and temperature, 27 smaples were inoculated with Aspergillus flavus, and in addition 3 smaples were inoculated with the mixture of Aspergillus flavus and Bacillus subtilis and cultured under the conditions such as 20.deg.C and 30% moisture contents. The following results were obtained : 1) Aflatoxin production was the highest at pH 5.0 and relatively high at pH 7.0. Its production was decreased significantly when pH reached 9.0. 2) The yield of aflatoxin was shown comparatively high level at 30% moisture contens. The higher moisture contents was, the lower aflatoxin production was. 3) The highest level of aflatoxin production was at 20.deg,C, and comparatively high level was at 30.deg.C. However, its production was fairly low at 40.deg.C. 4) The highest crude aflatoxin production was 5,093ppm (B$_{1}$, 1.912ppm ; B$_{2}$, and the lowest one 2.197 ppm (B$_{1}$, 0.793 ppm : B$_{2}$, 0.185 ppm : G$_{1}$ ,0.102 ppm G$_{2}$, 0.381ppm) at 63% moisture, pH 9.0 and 40.deg.C. 5) When Aspergillus flavus and Bacillus subilis were cultured together under the conditions such as 20.deg.C and 30% moisture, aflatoxin production was decreased by 27% comparing with the culture of Aspergillus flavus alone.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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