본 연구에서는 시스플라틴과 백작약 에틸아세테이트 분획물의 병용 처리에 의한 암세포 성장억제 및 PMA에 의해 유도된 MMP-2 및 MMP-9 암전이 억제 효과를 조사하였다. 세포생존율 측정은 MTS법에 의해 조사하였고, MMP-2/-9의 유전자발현과 활성은 RT-PCR과 Zymography법을 통하여 확인하였다. 결과에 의하면, 백작약, 시스플라틴의 농도가 증가함에 따라 세포 성장억제 효과가 증가함을 보였다. 또한, 단독 처리에 비해 200 μM의 시스플라틴과 50 ㎍/ml의 백작약 병용 처리에 의해서는 YD-10B 세포의 성장이 50% 감소하였다. PMA 처리된 YD-10B 세포에서 50 ㎍/ml의 백작약과 200 μM의 시스플라틴을 병용 처리하였을 때, MMP-2 및 MMP-9의 mRNA 발현과 단백질 활성들이 모두 유의하게 억제하였다. 그러므로 본 연구에서는 시스플라틴과 백작약의 병용 처리는 시스플라틴 단독 처리보다 구강암의 암 침윤을 억제할 수 있는 효과적인 항암제로서의 가능성을 기대할 수 있다.
본 연구는 녹차폴리페놀이 시스플라틴의 항암작용과 신장 독성에 미치는 영향을 유방암 세포(EMT6)와 암세포 이식마우스를 이용하여 in vitro와 in vivo 실험으로 관찰하였다. 배양한 EMT6 세포에서 녹차폴리페놀은 시스플라틴에 의한 세포 독성을 증가시켰다. 마우스에 EMT6 세포를 주사하여 유발된 종양의 크기가 시스플라틴군(CP)보다 시스플라틴+녹차폴리페놀군(CP+GTP)에서 유의하게 작았고, 종양조직 p53와 caspase-3 활성화가 시스플라틴군(CP)보다 시스플라틴+녹차폴리페놀군(CP+GTP)에서 유의하게 높았으며, 신장 GGT와 AP 활성은 시스플라틴군(CP)보다 시스플라틴+녹차폴리페놀군(CP+GTP)에서 유의하게 높았고, 신장 조직학적 소견에서 신세뇨관 확장과 괴사가 시스플라틴군(CP)보다 시스플라틴+녹차폴리페놀군(CP+GTP)에서 유의하게 낮았다. 이상의 결과 녹차폴리페놀은 EMT6 유방암 세포를 이용한 in vitro 및 in vivo 실험에서 시스플라틴의 항암작용을 증강시키면서 신장에 대한 독성 부작용은 감소시키는 효과가 있는 것으로 추측된다. 녹차폴리페놀의 시스플라틴 항암작용 증강과 신장 독성 억제 및 감소 효과는 시스플라틴에 의한 암 치료 시 화학요법제의 보조제로서 이용가치가 있는 것으로 생각되며, 항암화학요법제에 대한 보조제로의 개발을 위해서는 대규모 동물실험을 통한 효과 입증 및 부작용에 대한 실험과 임상연구가 뒷받침되어야 할 것으로 사료된다.
본 실험에서는 녹차추출물이 항암화학요법제의 항암작용 증강제로서의 이용가능성을 추정하기 위하여 광범위 항암화학요법제인 시스플라틴의 항암작용에 미치는 녹차추출물의 영향을 생쥐 대장암세포를 이용하여 관찰한 결과, 생쥐대장암세포인 CT26 세포를 배양하여 녹차추출물이나 EGCG을 투여하면 시스플라틴에 의한 세포독성이 증가되었는데, 시스플라틴의 세포독성에 미치는 EGCG와 녹차추출물의 효과 차이는 없었다. 생쥐에 CT26 세포를 주사하여 유발된 종양의 성장이 시스플라틴군보다 시스플라틴+녹차추출물 병합 투여로 현저히 감소되었다. 이상의 결과 녹차추출물은 화학요법제인 시스플라틴과 병합 투여할 경우 화학요법제 단독 투여 시보다 대장암 세포의 활성도 감소가 더 크고, 생쥐대장암의 크기를 감소시키는 작용도 더 크기 때문에 녹차추출물을 화학요법제와 병행투여하면 항암치료 효과가 증가될 것으로 생각된다. 따라서 녹차추출물은 항암화학요법제에 의한 암치료에서 치료효과를 증강시킬 수 있는 보조제로서 이용될 수 있을 것으로 기대되며, 이러한 효과를 입증하기 위한 더 많은 연구가 있어야 할 것으로 사료된다.
시스플라틴은 지난 몇 십년간 가장 많이 사용되고 있는 항암제 중 하나이다. 2가의 시스플라틴의 가장 큰 단점은 암세포 뿐만 아니라 정상세포도 공격하여 부작용을 나타낸다. 본 연구에서는 이러한 단점을 줄이기 위해 목표로 한 타겟을 공격하여 빠른 시간 내에 암세포를 죽일 수 있는 4가의 백금화합물 3과 4를 합성하였다. 합성된 $Pt(IV)-Bu_2$ 3 and $Pt(IV)-Val_2$ 4는 NMR과 질량분석기를 통하여 구조를 확인하였다. 합성된 Pt(IV) 화합물 3과 4는 위암세포주인 MCF-7을 대상으로 한 MTT assay를 통해 항암효과를 조사하였다. 그 결과 시스플라틴은 39%, $Pt(IV)-Bu_2$ 3와 $Pt(IV)-Val_2$ 4는 $50{\mu}M$ 농도에서 각각 54%와 84%의 세포사멸을 보였다.
항암 화학요법제의 항암작용을 증가시키거나, 부작용을 감소시켜 항암 치료를 효과적으로 할 수 있는 항암치료 보조제(modulator)에 대한 개발의 일환으로 녹차 추출물의 이용가능성을 추정하기 위하여 사람 폐암 세포주인 A549 세포를 배양하여 시스플라틴과 독소루비신의 항암성에 미치는 녹차 추출물과 EGCG의 영향을 비교 관찰하였다. A549 세포에 독성을 나타나는 농도는 녹차 추출물 $400\;{\mu}g$/mL, EGCG $300\;{\mu}g$/mL, 시스플라틴 $10\;{\mu}g$/mL 및 독소루비신 $8\;{\mu}g$/mL로, 녹차 추출물이 세포독성을 나타내는 농도는 시스플라틴이나 독소루비신에 비하면 낮았다. A549 세포에서 시스플라틴 $10\;{\mu}g$/mL 이상의 농도에서 세포활성이 감소되었고, EGCG나 녹차 추출물 $100\;{\mu}g$/mL를 첨가하면 시스플라틴 $6\;{\mu}g$/mL 이상의 농도에서 세포활성이 감소되어 EGCG나 녹차 추출물 첨가로 시스플라틴의 세포독성이 증가되었다. A549 세포에서 독소루비신 $8\;{\mu}g$/mL 이상의 농도에서 세포활성이 감소되었고, EGCG나 녹차 추출물 $100\;{\mu}g$/mL를 첨가하면 독소루비신 $4\;{\mu}g$/mL 이상의 농도에서 세포활성이 감소되어 EGCG나 녹차 추출물 첨가로 독소루비신의 세포독성이 증가되었다. A549 세포에서 녹차추출물 투여 후 p53 및 caspase 3에 대한 Western blot을 시행한 결과 p53및 caspase-3의 유전자 발현이 증가되었다. 이상의 실험결과 녹차추출물은 광범위 항암제 시스플라틴이나 독소루비신의 세포독성을 증강시키는 효과가 있고, 녹차추출물에 의한 p53이나 caspase-3 등과 같은 세포자살유도 단백질의 발현 증가는 녹차추출물에 의한 세포독성 증강효과와 연관이 있을 것으로 추측된다. 녹차추출물의 시스플라틴이나 독소루비신 세포독성 증강효과는 항암화학요법제의 용량을 늘리지 않고 항암력을 증대시킬 수 있기 때문에 항암화학요법 보조제로서 이용될 수 있는 가능성이 높은 것으로 생각되며, 이러한 효과를 규명하기 위한 연구가 필요할 것으로 사료된다.
연구방법 : 근치적 목적의 동시항암방사선치료를 시행받은 비인강암 환자들을 대상으로하여 치료 효과와 독성에 대한 후향적 분석을 시행하였다. 환자 및 방법 : 1993년 8월부터 1999년 3월까지 원격전이가 없는 50명의 비인강암 환자들이 방사선 치료기간 중 주 1회의 시스플라틴 $20mg/m^2$을 투여받았고, 1999년 4월부터 2000년 4월까지 20명의 환자가 상기 용량의 시스플라틴에 더하여 경구용 UFT300mg을 추가적으로 투여받았다. 총 70명 환자들의 임상기록과 병리 기록지를 검토하였다. 결 과: 연령의 중앙값은 47세 (범위 $18{\sim}76$)였고, 남자와 여자가 각각 53명과 17명 이었으며, 병기 II, III, IVA, IVB가 각각 23명, 14명, 15명, 18명이었다. 치료에 대한 반응율은 92.8%(95% C.I. $42{\sim}143%$)였고(완전반응 57명, 부분반응 8명), 총 34개월의 추적 관찰 기간 동안에 완전반응을 보인 57명 중 21명에서 재발(국소재발 5, 원격전이 11, 복합전이 5)을 하였다. 3년 무진행 생존율은 51.5%였으며 5년 생존율은 60.3%였다. 경구용 UFT의 추가적 사용은 주 1회 시스플라틴 항암치료에 비하여 반응율과 생존율 및 독성에 유의한 영향을 미치지 않았다. 결 론: 주 1회 저용량 시스플라틴$\pm$경구용 UFT를 이용한 동시항암방사선요법은 비인강암 환자의 치료에 있어서 비교적 적은 독성으로 높은 반응율을 나타내었으나, 향후 재발율을 감소시키기 위한 연구가 지속되어야 할 것으로 사료된다.
붉은색을 나타내는 홍영감자(Solanum tuberosum Linnaeus)는 국내에서 개발되었다. 이는 항산화, 항염증, 항바이러스 및 항암효과를 갖고 있는것으로 알려져 있으나, 아직까지는 YD-10B 구강암세포에서의 홍영에 의한 성장억제 및 세포사멸 효과 연구는 보고된 바가 없다. 본 연구에서는 시스플라틴과 홍영 에탄올 추출물의 병용처리에 의한 암세포 성장억제, 세포사멸 유도 및 MMP-2/-9 암전이 억제 능력을 확인하였다. 세포생존율 측정은 MTS법에 의해 조사하였고, 세포사멸 유도 능력은 FACS 분석기를 이용하여 분석하였고, MMP-2/-9의 유전자 발현과 단백질 활성은 RT-PCR과 Zymography법을 통하여 측정하였다. 결과로는, 홍영 에탄올 추출물의 농도가 증가함에 따라 구강암 세포 성장억제 효과가 증가함을 보였다. 시스플라틴 단독처리보다 200 µM의 시스플라틴과 500 ㎍/ml의 홍영 에탄올 추출물 병용처리로 YD-10B 구강암세포의 성장이 50% 이상 감소하였다. PMA 처리된 YD-10B 구강암 세포에서 500 ㎍/ml의 홍영 에탄올 추출물과 200 µM의 시스플라틴을 병용처리 하였을 때, MMP-2/-9의 mRNA 발현과 단백질 활성들이 모두 감소하였다. 또한, 시스플라틴 단독처리보다 200 µM의 시스플라틴과 500 ㎍/ml의 홍영 에탄올 추출물 병용처리로 세포사멸 능력을 나타내는 Sub-G1의 세포비율이2배 이상 증가하였다. 따라서, 본 연구결과는 시스플라틴과 홍영 에탄올 추출물의 병용처리가 구강암의 효과적인 항암제로서의 가능성을 시사하고 있다.
Purpose: The purpose of this study was to examine the effect of anorexia and neuropathic pain induced by cisplatin on hindlimb muscles of rats. Methods: Adult male Sprague-Dawley rats were divided into two groups, a cisplatin-treated group (n=10) and a control group (n=10). In the cisplatin-treated group, cisplatin at a dose of 2 mg/kg was injected intraperitoneally two times a week up to a cumulative dose of 20 mg/kg over 5 weeks, and in the control group saline (0.9% NaCl) was injected intraperitoneally at the same dose and duration as the cisplatin-treated group. At 34 days all rats were anesthetized, after which the soleus and plantaris muscles were dissected. Withdrawal threshold, body weight, food intake, activity, muscle weight, Type I and II fiber cross-sectional areas and myofibrillar protein content of the dissected muscles were determined. Results: Compared with the control group, the cisplatin-treated group showed significant decreases (p<.05) in withdrawal threshold, activity, food intake, body weight, Type I and II fiber cross-sectional areas, myofibrillar protein content and weight of the soleus and plantaris muscles. Conclusion: Muscular atrophy in hindlimb occurs due to anorexia and neuropathic pain induced by the cisplatin treatment.
Purpose: The purpose of this study was to examine the effects of Cu/Zn SOD on reduction of hindlimb muscular atrophy induced by cisplatin in rats. Methods: Forty-two rats were assigned to three groups; control group, Cisplatin (CDDP) group and cisplatin with Cu/Zn SOD (CDDP-SOD) group. At day 35 hindlimb muscles were dissected. Food intake, activity, withdrawal threshold, muscle weight, and Type I, II fiber cross-sectional area (CSA) of dissected muscles were measured. Relative SOD activity and expression of MHC and phosphorylated Akt, ERK were measured after dissection. Results: Muscle weight and Type I, II fiber CSA of hindlimb muscles in the CDDP group were significantly less than the control group. Muscle weight and Type I, II fiber CSA of hindlimb muscles, food intake, activity, and withdrawal thresholds of the CDDP-SOD group were significantly greater than the CDDP group. There were no significant differences in relative SOD activities of hindlimb muscles between the CDDP-SOD and CDDP groups. MHC expression and phosphorylated Akt, ERK of hindlimb muscles in the CDDP-SOD group were significantly greater than the CDDP group. Conclusion: Cu/Zn SOD attenuates hindlimb muscular atrophy induced by cisplatin through increased food intake and activity. Increment of phosphorylated Akt, ERK may relate to attenuation of hindlimb muscular atrophy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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