북방산개구리, 참개구리 및 옴개구리를 사용하여 성숙된 난자의 세포질에서 활성을 띠는 성숙촉진요인( maturation promoting factor, MPF)을 미세주입 법으로 확인하고 이들의 성질을 조사하였다. 핵붕괴(germinal vesicle breakdown, GVBD)된 난자의 세포질을 미성숙 난자(GV난자)에 주입하고(75-100 nl) 이들을 15-24시간 배양했을 때 대부분의 GV 난자들이 핵붕괴를 일으켰으나(약 80%) 미성숙 난자(GV 난자)의 세포질을 주입했을 때에는 약 200nl의 난자들만이 핵붕괴를 일으켰다. 핵붕괴된 난자들의 crude extract를 주입했을 때에도 역시 성숙유도 효과가 있었으며 이종간에도 효과가 있었다. 난자의 성숙을 잘 일으키지 않는 옴개구리의 난자를 사용하여 MPF를 가진 세포질을 계대주입(serial transfer)하였을 때에도 MPF가 계속 활성을 띠는 것을 확인할 수 있었다. 아울러 개구리 난자의 MPF생성과 증폭과정에 CAMP의 증가나 단백질 합성의 저해가 미치는 영향을 조사한 결과. MPF의 작용이 유의하게 이들에 의해 억제되는 것을 알 수 있었다.
Expedments were perfonned to examine the role of cAMP-dependent protein kinase (PK-A) and diacylglycerol-dependent protein kinase (PK-C) during the meiodc resumption and the first mitotic cell cycle of mouse embryogenesis. Mejoric GV oocytes and one-cell embryos derived from in vitro fertilization were cultured in vitro, and morphological changes in response to activators of PK-A and PK-C were examined. Treatments with a membrane-permeable cAMP analog, dbcAMP (0.1 mg/mi), phosphodiesterase inhibitor, IBMX (0.1 mM), biologically active phorbol ester, WA (10 nglmi), or a synthetic diacylglycerol, sn-diC8 inhibited resumption of melosis. Combination of PK-A and PK-C activator brought about furiher inhibition. On the contrary, dbcAMP (0.1 mg/mi), IBMX (0.2 mM), WA (10 nglml), and sn-diC8 (0.5 mM) did not inhibit pronucleus membrane breakdown (PNBD) when added S or G2 phase of cell cycle. However, activators of PK-C inhibited cleavage of one-cefl embryos. This result indicates that the action mechanism of PK-A and PK-C on dissolution of nuclear membrane in primary meiotic arrest oocytes may be different from that of mitotic one-cell embryos.
The effects of bacterial lysis on the rate of quartz dissolution were investigated under pH 7 condition using Bacillus subtilis cells which were either irradiated or non-irradiated with gamma ray. The amount of dissolved organic carbon (DOC) which resulted from bacterial lysis increased in slurries of quartz and bacteria mixture over experimental period. Lysis of non-irradiated bacteria led to the elevated concentration of dissolved silicon when compared with abiotic control. Concomitant increase in the amounts of DOC and dissolved silicon over time indicated that lixiviation of silicon from quartz was due to bacterial lysis. Higher amounts of DOC and dissolved silicon were present in the irradiated bacterial slurries than those of non-irradiated bacteria. The enhancement of quartz dissolution in the irradiated bacterial slurries was likely attributed to disruption of organic molecules in the bacterial cells by gamma ray and formation of effective ligands for quartz dissolution. The results suggest that the effects of bacterial lysis on mineral weathering rate should be considered for prediction of time for released radionuclides to migrate to surface biosphere in high level radioactive waste disposal site.
The stabilized $ClO_2$ gas has been used for many years by the food industry as a strong oxidizing and sanitizing agent that has broad and high biocidal effectiveness. Therefore, "stabilized $ClO_2$" gas may be used in fields of disinfectant and sterilization. But, there have been few studies on the decomposition-inhibition effect of stabilized $ClO_2$ gas with passage of time. The main purpose of this study was to examine the decomposition-inhibition effect of stabilized $ClO_2$ gas and the morphological change of kidney by measuring of the light and electron microscope. Sprague-Dawley (SD) rats weighting from 230 gm to 250 gm were used as experimental animals. Under ether anesthesia, the right kidney of rat was obtained. Put each sample in $37^{\circ}C$ and humidity $80{\pm}5%$ incubator, we obtained each sample after 0 day, 1 day, 2 days, 3 days, 4 days and 5 days. We proceeded the observation of light and electron microscope. The results obtained in this study reveal that stabilized $ClO_2$ gas is an effective decomposition inhibitor until 2 days that was conducted at $37^{\circ}C$ and humidity $80{\pm}5%$ conditions.
Proceedings of the Korea Air Pollution Research Association Conference
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2000.11a
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pp.365-366
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2000
라돈은 암석이나 토양 같은 지각물질에서 발생되는 우라늄($^{238}$ U) 붕괴계열인 라듐($^{226}$ Ra)의 붕괴과정에서 생성된다. 라돈($^{222}$ Rn)은 붕괴하면서 $\alpha$방사선을 방출한다. $\alpha$ 붕괴에 의하여 $^{218}$ Po, $^{214}$ Po, $^{214}$ Bi 등의 자핵종(Radon daughter)을 생성하며, 이 과정에서 인체의 세포를 죽이거나 염색체를 손상시킬 수 있으며, 폐암의 발생 위험률을 높이는 것으로 보고되었다$^{1)}$ . 라돈은 건물의 균열, 연결부위, 혹은 배수관이나 오수간, 주변의 틈을 통해서 실내로 유입된다. (중략)
Proceedings of the Korea Air Pollution Research Association Conference
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2000.04a
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pp.279-281
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2000
발암성 물질로 알려진 라돈($^{222}Rn$)은 원래 불활성기체로 자연계에 널리 존재하는 자연방사능으로 암석이나 토양 같은 지각물질에서 발생하는 우라늄($^{238}U$) 붕괴계열인 라듐($^{226}Ra$)의 붕괴과정에서 생성되는 방사성 가스이다. 라돈($^{222}R$)은 $\alpha$붕괴에 의하여 $^{218}Po$, $^{214}Po$등의 자핵종(Radon daughter)을 생성하며, 최종적으로 납($^{210}Pb$)으로 변한다 라돈이 폐에 흡입되면 붕괴하면서 $\alpha$방사선을 방출하는데, 이것이 인체의 세포를 죽이거나 염색체를 손상시킬 수 있으며, 폐암의 발생 위험률을 높이는 것으로 보고되었다. (중략)
VBNC (Viable but nonculturable) state is an adaptive response of cells in adverse environments, which lead cell not grow on routine nutrient agar. In this study, we induced VBNC in Escherichia coli using copper and verify the characterization of it. After treatment of copper, we didn't detect any cells via plate cultivation, namely, colony forming unit (CFU) was zero. However, we identified the existence of VBNC by staining live cells with Live/Dead BacLight bacterial viability kit and counting them through flow cytometry. Then we isolated genomic DNA and RNA from VBNC-induced cells and analyzed the stability of them. Degradation of RNA is more severe than that of DNA and RNA is degraded as specific fragments. In addition, we showed the morphology of VBNC cell by Bio-Transmission Electron Microscope (Bio-TEM). VBNC cell showed impaired periplasmic space and inner and outer membrane were separated and the amount of cytosol were significantly decreased.
It has been well known that grapefruit seed extract (GSE) have effects on the deodorization and a wide range disinfectant. But anybody do not research about the decomposition-inhibition effect of GSE. The present study was performed to investigate the decomposition-inhibition effect of GSE by measuring the microscope and electroscope observation with passage of time. A total of 30 healthy Sprague-Dawley (SD) rats weighting from 230 gm to 250 gm were used as experimental animals. One group that do not treated by GSE named control group and the other group that treated by 55% GSE named Experimental group. Under ether anesthesia, right kidney was obtained. Put each sample in $37^{\circ}C$ and humidity $80{\pm}5%$ incubator, we obtained each sample after 0 day, 1 day, 2 days, 3 days, 4 days and 5 days. 4 ${\mu}m$ of paraffin sections were obtained, stained H-E stain and observed by use of a microscope. Morphological change in tissue was similar to control 1 day group and experimental 3 days group. Therefore, decomposition-inhibition effect of GSE continued about 2 days and it protected necrosis. According to above results, the author suggest that 55% GSE is an effective decomposition inhibitor until 2 days on $37^{\circ}C$ and humidity $80{\pm}5%$ conditions.
Phosphatase의 저해제로 알려진 okadaic acid(OA)가 한국산 개구리(북방산개구리 참개구리) 난자의 성숙에 미치는 효과를 조사하였다. 북방산개구리 난자에 약 50 nl의 okadaic acid(0 5-500 mM)를 미세주입한 후 18시간 배양한 결과 0.5 mM의 농도에서 부터 난자의 핵붕괴를 일으키기 시작하였다 동면초기에 처리한 progesterone에 반응하지 않는 난자들도 OA에 의하여 성숙을 일으켰으며. 이 성숙은 배양액에 첨가한 cycloheximide(10 mg/ml)에 영향을 받지 않았다 또한 OA의 처리를 받고 일정시간 배양한 난자의 세포질에는 미성숙 난자의 성숙을 유도하는 maturation promoting factor (MPF)의 활성이 생기었다 참개구리의 난자도 역시 OA에 의해 성숙이 유도되었으며, 주입 후 6시간에서부터 핵붕괴가 일어나기 시작하였다 참개구리에서도 OA의 처리가 MPF의 활성을 촉진하는 것을 세포질내에 Hl histone kinase의 활성도가 증가하는 것으로 확인할 수 있었다 참개구리에서도 OA에 의한 성숙은 cycloheximide나 CAMP에 의해 영향을 받지 않았다 이러한 결과들은 개구리 난자의 MPF 활성화와 성숙과정에 phosphatase가 관여함을 보여주는 것이다.
Cyclic AMP (cAMP) was known to play a key role in the regulation of cumulus expansion and oocyte maturation of mammalian cumulus-oocyte complexes (COC's) in vivo and in vitro. The present experiments were conducted to know how intracellular level of cAMP in these cells is controlled. Intracellular cAMP level was modulated by culturing mouse CGC's with an adenylate cyclase stimulator, forskolin, a phosphodiesterase inhibitor, 3-isobutyl-1-methyixanthine (IBMX), human chorionic gonadotrophin (HCG), or follicle stimulating hormone (FSH). The rate of cumulus expansion and germinal vesicle break-down (GVBD) was checked after culture and used as a biological end point. Forskolin in the medium began to stimulate the expansion of the complexes at 1 nM and induced maximum expansion (80~90%) at 0 1~10 $\mu$M. The expansion rate was reduced to 60% when forskolin concentration was increased to 100 $\mu$M. Oocyte GVBD occurred normally (75~82%) in the presence of 10 $\mu$M of forskolin, but partial suppression was appeared at 100 pM of the drug (40%). IBMX also stimulated the expansion from the concentration of 0.01 pM and induced full expansion (81~89%) between the concentration of 1-1000 $\mu$M. Meiotic resumption was occurred normally under 10 $\mu$M of IBMX, but suppressed drastically from the concentration of 100 $\mu$M. The minimum exposing time to hormone or drugs required to trigger cumulus expansion was two minutes with HCG, 15~30 minutes with FSH and fors kolin, and two hours with IBMX. The data presented here seemed to imply that intracellular cAMP level in cumulus cells is regulated by both adenylate cyclase and phosphodiesterase and cumulus expansion is induced by a peak of cAMP while meiotic arrest is maintained by continuous presence of cAMP.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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