Sa, Young-Hee;Choi, Chang-Shik;Lee, Ki Hwan;Hong, Seong-Karp
Proceedings of the Korean Institute of Information and Commucation Sciences Conference
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2018.10a
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pp.444-447
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2018
Baculovirus expression systems have many known advantages including fast and cost-effective methods to generate large amounts of recombinant proteins in comparison to bacterial expression systems, particularly those requiring complex post-translational modifications. Especially, recombinant baculoviruses can transfer their vectors and express their recombinant proteins in a wide range of mammalian cell types. In this study, baculoviral vectors which were reconstructed from pcDNA3.1 vector, were recombined with cytomegalovirus (CMV) promoter,uroplakin II promoter, polyhedron promoter, vesicular stomatitis virus G (VSVG), enhanced green fluorescent protein (EGFP), and protein transduction domain (PTD). These recombinant vectors were infected with various cells and cell lines. The baculovirus vector thus developed was analyzed by comparing the metastasis and expression of the recombinant genes with conventional vectors. These results suggest that the baculovirus vector has higher efficiency in metastasis and expression than the control vector.
Adenomyoepithelioma (AME) is a rare breast neoplasm composed of both epithelial and myoepithelial cells with biphasic proliferation. Although most AMEs are benign, malignant transformation of either or both cellular components may occur. This report describes an unusual rapid local tumor recurrence a month after excision of the myoepithelial carcinoma arising in an AME. Ultrasound and MRI showed small recurrent masses in the superficial part of a hematoma. This report suggests the benefit of immediate postoperative breast imaging in patients with malignant AME with potential for local recurrence, such as those with narrow resection margins or high mitotic activity.
The marine microalga Spirulina maxima was extracted using water or ethanol at 100 or $80^{\circ}C$ and by ultrasonification in water at $60^{\circ}C$. The ultrasonification technique generated the highest yield (19.8%). To be therapeutically useful, the extraction should yield a product with low cytotoxicity and high immunity against skin infections. The cytotoxicity of all extracts (1.0 mg/mL) was below 25%. Moreover, the cytotoxicity of the extract generated by ultrasonification was 5%. Extracts prepared in the described manners could inhibit hyaluronidase activity by up to 40% compared to the control. Increased growth of human B, T and NK cells and an increase in cytokine secretion were observed, confirming the interrelationship between both human immune and skin immune activity. The extract prepared by ultrasonification increased the growth of human B, T and NK cells up to $10.3{\times}10^4$ cells/mL, $11.3{\times}10^4$ cells/mL and $19.1{\times}10^4$ cells/mL, respectively. The extract prepared by ultrasonification also greatly increased the secretion of both IL-6 and $TNF-{\alpha}$. Moreover, it was estimated that protein, Na and leucine occupy a high ratio. Accordingly, this study has confirmed that extracts prepared as described have the potential to effectively increase skin immunity.
Kim, Ji-Hyun;Lee, Ji-Young;Kim, Woo-Kap;Hwang, Woo-Ik
Applied Microscopy
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v.29
no.2
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pp.137-147
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1999
Comparative differences between the fine structure of cultured LL/2 cell in vitro and tumor cells in vivo which were induced in the lung by inoculation of LL/2 cells to C57 BL/6 mouse via tail vein during 21 days are not observed except for cell configuration which was changed spindle shape into oval shape. At first tumor cells appeared at lymphatic nodules and around capillary in the lung. Tumor cells divided actively by mitosis, so they became tumor nodules. The pulmonary aveoli around tumor nodules were observed somewhat flattened in shape but the cells in the aveoli appeared to be in normal condition. Furthermore the normal lung cells were observed in the tumor nodules and some apoptotic tumor cells appeared in the large tumor nodules. A lot of neutropiles were observed in the aveoli and tumor nodules of C57 BL/6 mouse lung after inoculation 22 days and 31days.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.33
no.8
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pp.1237-1245
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2004
Agaricus blazei Murill is a medicinal mushroom native to Brazil. It used to be a source of antitumor and immunoactive compounds and considered a health food in many countries. In the present study, it was examined the effects of water extract of A. blazei (WEAB) on the growth of human lung carcinoma cell line A549 in order to investigate the anti-proliferative mechanism by WEAB. Treatment of A549 cells to WEAB resulted in the growth inhibition, morphological change and induction of apoptotic cell death in a dose-dependent manner as measured by MTT assay and flow cytometric analysis. Flow cytometric analysis revealed that WEAB caused G2/M phase arrest of the cell cycle, which was associated with a down-regulation of cyclin A in both transcriptional and translational levels. WEAB treatment induced a marked up-regulation of cyclin-dependent kinase (Cdk) inhibitor p21, however, the levels of Cdk2, Cdc2, Wee1, Cdc25C and p53 expression were remained unchanged in WEAB treated cells. In addition, WEAB treatment inhibited the levels of cyclooxygenase (COX)-2 mRNA and protein without alteration of COX-l expression. Taken together, these findings suggest that WEAB may be a potential chemotherapeutic agent for the control of human lung carcinorma cells and further studies will be needed to identify the active compounds that confer the anti-cancer activity of WEAB. Once such compounds are identified, the mechanisms by which they exert their effects can begin to be characterized.
Resveratrol, a phytoalexin found at high levels in grapes and in grape products such as red wine, has been reported to possess a wide range of biological and pharmacological activities including antioxident, anti-inflammatory, anti-mutagenic, and anti-carcinogenic effects. According to recent studies, this compound is an effective inhibitor of cell growth in general, triggers partial arrest of the cell cycle and induce apoptosis. In this study, the anti-proliferative effects of resveratrol in A549 human lung carcinoma cells were investigated. It is shown that resveratrol induced the growth inhibition in a time-dependent manner and morphological changes of A549 cells, which were associated with induction of S phase arrest of the cell cycle and apoptotic cell death. The Bcl-$X_L$levels were markedly down-regulated in resveratrol treated cells, however, Bax and Bcl-2 were remained unchanged. Resveratrol treatment induced the proteolytic degradation of Sp-l and proliferating cell nuclear antigen protein, and inhibited the expression of $\beta$-catenin protein. Resveratrol treatment also induced a marked up-regulation of cyclin-dependent kinase (Cdk) inhibitor p21 and inhibited the kinase activities of Cdk2 and Cdk4. In addition, resveratrol treatment inhibited the levels of cyclooxygenase (COX)-2 mRNA and protein, and the release of prostagladin E2 without alteration of COX-1 expression. Taken together, these findings suggest that resveratrol may be a potential chemotherapeutic agent for the control of human lung carcinorma cells.
Epigallocatechin-3-gallate (EGCG) is a polyphenolic compound frequently found in green tea, and its physiological actions have been extensively investigated. In the present study, changes in chemical stability and cytotoxic properties of EGCG in the presence of different types of antioxidants were investigated. The antioxidants used modulated the chemical stability of EGCG. Superoxide dismutase (SOD) significantly increased EGCG stability; EGCG was less stable in the presence of catalase. Ascorbic acid, N-acetylcysteine (NAC), and glutathione (GSH) stabilized EGCG concentration dependently. The $H_2O_2$ level generated from EGCG was decreased by catalase, SOD, and NAC but not by GSH. The cytotoxic effects of EGCG also decreased in the presence of NAC, catalase, and SOD. GSH, however, showed a complicated modulatory pattern according to the EGCG and GSH concentrations, and ascorbic acid rather enhanced EGCG toxicity. The results suggest that certain antioxidants could modulate the cytotoxic properties of EGCG in a cell culture system not only by removing reactive oxygen species but by modulating chemical stability and other factors, which should be considered carefully when studying reactive oxygen species-dependent mechanisms of EGCG.
Background : Toluene diisocyanate(TDI) is a leading cause of occupational asthma. However, the pathogenesis of TDI-induced asthma is largely unknown because there is no suitable animal model. Materials and Methods : We developed a murine model of TDI-induced asthma by performing two sensitization with 3% TDI and one challenge with 1% TDI using ultrasonic nebulization. Results : Similar to occupational asthma in humans, murine TDI-induced asthma includes findings 1) increased inflammatory cells, including neutrophils and eosinophils, 2) histologic changes, including infiltration of inflammatory cells around bronchioles, thickened airway epithelium, contraction of bronchioles, and accumulation of mucus and debris in the bronchioles, 3) increased MMP-9 activity in inflammatory cells in the airway lumen, 4) airway hyperrespnosiveness. Administraion of an MMP inhibitor, MMPI-I, remarkably reduced all these pathophysiological findings. Conclusion : Therefore, we conclude that TDI-induced occupational asthma is associated with the induction of MMP-9 in inflammatory cells, and the inhibition of MMP-9 may be a good therapeutic strategy.
This study was made to investigate the effect of testosterone and cyclic-AMP (cAMP) on rat epididymis. Peritoneai injections of testosterone and cAMP to rats were earned out The activities of acid phosphatase (ACP), alkaline phosphatase (ALP) and lactate dehydrogenase (LDH) were measured and ultrastructural changes of luminal epithelial cells were observed. As a result, the activity of ACP was significanily decreased on the third day, that of ALP on the fifth day and that of LDH on the seventh day respectively in castrated group. In addition, the activities of ACP and ALP were significanily increased when treated with testosterone for 5 days, that of LDH when treated with testosterone for 7 days. In case of cAMP and cAMP - theophylline injection, the activities of ACP and LDH were increased but the range of increase was of no significance. However a significant increase in the activity of ALP was seen on both cases. On electron microscopic examination, gradually deformed Golgi complex, destructed mitochondria and disrupted stereociha were observed in castrated group. In case of testosterone injection, disrupted Golgi complex, mitochondria and stereocilia showed recovery. When cAMP and cAMP-theophylline were injected as an alternative, various cytoplasmic organelles as well as Golgi com- plex were recovered but stereocilia remained unrecovered.
Some characteristics and pathogenicity of Hyphantria cunea nuclear polyhedrosis virus (HcNPV), a potential microbial pesticide was studied. H. cunea NPV replicated in the nucleus of S. frugiperda cells cultured in the TNMFH medium. In case of virus infected cell, prepolyhedra formation was observed at 24hrs post-infection. At 48 hrs post-infection, Most of the infected cell contained many mature polyhedra which were released into culture media 72 hrs post-infection, with the cells grown in suspension culture, pH of the culture medium increased during the virus replication: the pH of fresh medium was 6.35 and rose to 6.77 within 120 hrs. Polyhedra formed a band in linear density gradient of sucrose by centrifugation, which co-sedimented with $50{\sim}55%$ sucrose. The shape of the purified polyhedra was mostly tetragonal hexahedron and its size was about $2.5{\mu}m$. Electron microscopy and phase contrast microscopy showed that many bundled nucleocapsids were occluded in mature polyhedra at 48 hrs post infection. H. cunea larvae infected with NPV showed a higher motality in the second and third instar than in the fourth instar. Death rate of H. cunea larvae in the second and third instar fed with leaves coated with $1.5{\times}10^{9}{\sim}l.5{\times}10^{7}PIBs/ml$ reached more than 90%.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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