• Korean Journal of Microbiology
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• v.36 no.4
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• pp.312-315
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• 2000

Paecilomyces tenuipes DGUM 32001, an entomopathogenic fungus, was examined to evaluate in vitro cytotoxicity against several human cancer cells. The fruiting bodies of P. tenuipes were extracted with methanol and fractioned with some organic solvents i.e. chloroform, ethyl acetate, and butanol. The methanol extracts of P. tenuipes showed significant cytotoxicity against human cancer cell lines; HeLa, HeLa S3, and A-431. Among the fractions tested, the ethyl acetate fraction had the highest cytotoxicity against three cancer cell lines. The $IC_{50}$ values of ethyl acetate fraction against HeLa, HeLa S3, and A-431 were 13, 35, and 30 $\mu$g/ml, respectively. However, cytotoxicity might not be due to apoptosis. The methanol extract of cultured mycelia showed high cytotoxicity against HeLa cell lines.

• Journal of Veterinary Clinics
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• v.13 no.2
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• pp.158-162
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• 1996

Comet assay 는 포유류 세포에서 DNA의 파괴를 측정하는데 있어 신속하고 단순하며 시각적이고 민감한 방법이다. Apoptosis에서는 세포핵의 광범위한 DNA의 붕괴가 일어나므로 comet assay는 종양세포에서 apoptosis가 발생되었는가를 알아내는데 유용하다. 본 연구는 apoptosis 연구의 결과가 변화되지 않도록 comet assay slides를 좀 더 오래 보관할 수 있는 방법을 개발하고자 시행되었다. 개의 종양세포를 가지고 alkali comet assay를 끝낸 뒤 slides를 진공 건조기에서 꺼내서 증류수로 점적하여 10-20분간 침수시키고 현광현미경하에서 육안적으로 관찰하였다. 건조후 3-4일, 1주, 2주, 3주, 4주 및 7주의 slides에서 apoptosis 회복율(%)은 각각 98.1, 98.3, 99.4, 80.8 및 35.2%이었다. 3주 이내의 slides에서 대조군과 비교하여 apoptosis 회복율에서 차이가 없었으나 4주 이상의 slides를 건조후 침수시키는 방법을 이용하였을 때 apoptosis 평가에서 건조 후 3주간까지는 처음의 결과와 차이가 없으며, 이 방법을 이용하여 comet slide의 좀 더 긴 기간이 보관과 보관후의 재평가에서 이용될 수 있는 좋은 방법이 된다.

• The Journal of Internal Korean Medicine
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• v.25 no.3
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• pp.451-460
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• 2004

Objective : 황금의 유방암세포주에 대한 항암효과 및 기전에 대한 연구는 아직 미흡하며, 특히 에스트로젠리셉터를 가지지않은 유방암세포주인 MDA-MB-231에 대한 효과 및 기전에 대한 연구는 아직 발표된바 없어, 이에 대한 연구가 진행되었다. Methods : 인간 유방암세포주 MDA-MB-231 MTT assay를 이용 성장방해비율을 조사하였으며. FACS analysis를 이용 cell cycle analysis를 시행하였고, Western Blot Analysis 및 Annexin V analysis를 시행하였다. Results : MDA-MB-231에 대한 황금의 IC50는 180 ug/ml 이었으며 최대 세포성장억제효과는 $500{\mu}g/ml$로 한약재중 비교적 강한 세포독성을 보여 주었다. 유세포분석 에서 황금 $500{\mu}g/ml$의 농도를 72시간 투여한 경우 세포사멸(Sub Gl) 분율이 대조군의 1.7%에 비해 21%로 높아 현저한 용량의존적인 세포사멸현상을 보여주었으며, 세포사멸을 보다 명확히 규명할 수 있는 Annexin V analysis에서도 황금 $200{\mu}g/ml$농도일때 48시간에서 17%의 뚜렷한 세포사멸효과를 나타내었다. 한편 세포사멸촉진인자인 Bax, 세포사멸실행단백질인자인 caspase 3의 활성과 PARP의 분할은 세포사멸이 세포주기정지와 더불어 세포사멸의 과정에 p53이 관여함을 알 수 있다. 앞으로의 연구는 p53발현이 다른 세포주와 각 단백질의 억제제를 통해 인과적인 관련성을 즘 더 명확히 할 필요가 있어야 할 것으로 생각되어진다. Conclusion : 유방암의 예후에 있어 호르몬치료에 부적절함으로 인해 예후가 나쁜 에스트로젠리셉터 발현이 없는 유방암에 대해서도 황금이 탁월한 항암효과를 보여주고 있으며, 임상적으로 황금단독, 다른 항암약재와의 배합, 그리고 기존의 항암화학요법이나 방사선요법과의 병용투여를 통한 초기 및 진행된 유방암의 치료에 대한 새로운 접근의 실마리를 제공할 것으로 생각된다.

• Journal of the Korean Society of Tobacco Science
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• v.30 no.1
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• pp.56-65
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• 2008

세포독성과 유전독성 측정법은 독성 평가에 있어서 통합요소이며, 잠재적인 생물학적 활성을 측정하는 방법으로서 규제 당국에 의해 인정되는 방법이다. 이들은 빠르고 경제적인 방법이고, 오랜 사용한 역사를 가지고 있으며, 양적인 독성을 평가 할 수 있는 방법이다. 담배의 안전성을 평가하기위해 널리 이용되는 3-battery 시험법은 다음과 같다. 1. 미생물을 이용한 복귀돌연변이 시험 2. 포유류 유래 세포주를 이용한 Neutral red 세포독성 3. 포유류 유래 세포주를 이용한 소핵시험

• Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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• 1994.04a
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• pp.208-208
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• 1994

코브라과 (Elapidae)에 속하는 뱀에는 극소량으로도 치사시킬수 있는 독을 가지고 있는데 독을 구성하고 있는 물질중 특정한 계열의 단백질이 매우 두드러진 약리학적 활성을 보여줄수 있다. 따라서 본 연구는 독사들의 혈액독소 및 신경독소를 우리나라에서 제일 종류가 많은 위암세포주(SNU-1)에 대해서 세포독성을 검색하고 곤충 및 해양생물의 독소에 대해서도 위암세포주를 이용하여 검색하였다. 검색 결과 king cobra계통인 Ophiophagus hannah의 분획은 SDS-PAGE에서 분자량이 66,000 부근에 나타난 것이 세포독성물질로 추측되며 더욱 정제하여 아미노산 서열을 비교하고 Phospholipase화성을 측정함으로써 세포독성물질의 규명이 가능하리라 생각된다.

• Proceedings of the KAIS Fall Conference
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• 2004.06a
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• pp.315-318
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• 2004

This study was designed to investigate the cytotoxic effect of Cephaxus koreana on human breast cancer cell lines (SCC-1395 and SK-BR-3) us ins MTT(3- [4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay. RPMII -1640 medium with $10\%$ FBS and $1\%$ of penicillin-streptomycin was used. The ethanol extrart of Cephaxus koreana after adsoption resin treatment showed higher anticancer activity against SCC- 1395 than the ethanol extract of Cephaxus koreana without adsoption resin treatment. SK-BR-3 showed higher sensitivity activity than SCC-1395 at the same concentration of 20000 ppm.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• v.56 no.5
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• pp.514-522
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• 2004

Background : Non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAID) are useful in chemoprevention of colorectal cancers. Continuous NSAID administation causes 40% to 50% reduction in relative risk for colorectal cancer. Sulindac possesses an antiproliferative effect and induces apoptosis and tumor regression on colon cancer and other types of cancers. We intended to analyze the effects of sulindac in three non-small cell lung cancer cell lines. Materials and Methods : The human lung cancer cell lines, A549, NCI-H157 and NCI-H460 were used for this study. Viability was tested by MTT assay, and cell death rate was measured by lactate dehydrogenase(LDH) release. Apoptosis was estimated by flow cytometric analysis and nuclear staining. Results: Sulindac was able to decrease the viability of non-small cell lung cancer cells in a dose- and time- dependent manner. In a parallel effect of sulindac on cell death rate, LDH release was increased in sulindac-treated lung cancer cells. Sulindac significantly increased apoptosis characterized by an increase of $sub-G_0/G_1$ fraction and morphological change of nuclei. The rate of apoptotic cells after sulindac treatment in lung cancer cells increased in a time- and dose- dependent manner in flow cytometric analysis. Apoptotic cells were defined as nuclear shrinkage, chromatin condensation and nuclear fragmentation of cells. Conclusion : Sulindac decreases viability and induces the apoptosis of lung cancer cells. Further studies will be needed to elucidate the potential mechanism of sulindac-induced apoptosis in lung cancer cells.

• The Korean Journal of Nuclear Medicine
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• v.36 no.2
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• pp.110-120
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• 2002

To clarify the difference in glucose uptake between human cancer cells and monocytes, we studied $[^{18}F]$ fluorodeoxyglucose (FDG) uptake in three human colon cancer cell lines (SNU-C2A, SNU-C4, SNU-C5), one human lung cancer cell line (NCI-H522), and human peripheral blood monocytes. The FDG uptake of both cancer cells and monocytes was increased in glucose-free medium, but decreased in the medium containing 16.7 mM glucose (hyperglycemic). The level of Glut1 mRNA decreased in human colon cancer cells and NCI-H522 under hyperglycemic condition. Glut1 protein expression was also decreased in the four human cancer cell lines under hyperglycemic condition, whereas it was consistently undetectable in monocytes. SNU-C2A, SNU-C4 and NCI-H522 showed a similar level of hexokinase activity (7.5 - 10.8 mU/mg), while SNU-C5 and monocytes showed lower range of hexokinase activity (4.3 - 6.5 mU/mg). These data suggest that glucose uptake is regulated by different mechanisms in human cancer cells and monocytes.

• Korean Journal of Acupuncture
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• v.20 no.1
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• pp.57-64
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• 2003

목적: 오가피가 mouse testis에서 유래된 Leydig 세포주에서 에탄올에 의해 유발된 아폽토시스에 미치는 영향을 조사하였다. 방법: TM3 세포주에서의 아폽토시스 변화를 관찰하기 위해서 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay, 4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI), DNA fragmentation assay, 및 reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) 방법을 이용하였다. 결과: MTT assay를 이용하여 분석한 결과 농도에 따른 세포독성의 효과가 에탄올 투여부터 관찰되었다. 또한 오가피로 전처치하고 에탄올을 처치하였을 때 세포독성이 크게 감소되었다. DAPI staining에서 오가피 투여군은 에탄올 투여군에 비해서 fragmentation이 억제되었다. RT-PCR의 분석에 의하여 caspase-3 mRNA 발현이 오가피 투여군은 알코올 투여군보다 유의성있게 억제됨을 보여주었다. 결론: TM3 Leydig 세포주에서 에탄올에 의해 유발된 아폽토시스는 전형적인 세포사멸 형태를 나타내었다. 반면에 오가피 투여군은 에탄올에 의해서 유발된 아폽토시스에서 세포보호 효과가 있음이 확인되었다.

• Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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• 1994.04a
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• pp.209-209
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• 1994

천연자원으로부터 얻어진 항암 또는 세포독성물질로는 주로 alkaloid, lignan, terpenoid, macrolide 등에 속하는 물질들이고 그 중 sesquiterpene lactone계열 화합물에서 세포독성 및 항종양 활성이 있는 물질이 다수 얻어졌으며 그 대부분은 국화과의 식물에서 분리 보고되고 있다. Achillea 속 식물은 국화과에 속하는 다년생초본으로 남한에는 톱풀과 산톱풀 2종만이 자생한다. screening 결과 이 두 식물에는 segquiterpene lactone 화합물과 Peroxide등 다수의 활성성분이 함유되어 있을 것으로 기대되어 본 연구에 착수하였다. 두 식물의 각 분획에 대하여 SNU-1(위암세포주)과 SNU-354(간암세포주)를 이용해 검색한 결과 두 식물 모두 MC ext.와 MeOH ext.에서 현저한 세포독성을 보였으며 현재 MC ext. 로부터 세포독성물질의 분리를 수행하고 있다. EtOAc ext.는 세포독성은 거의 나타내지 않았으나 flavonoid 성분이 다수 존재함을 확인하였으며 면역활성 및 enzyme inhibition등의 활성을 검토하고자 화합물을 분리하였다. 그 결과 톱풀로 부터는 luteolin-7-0-glucoside와 apigenin-7-0-glucoside를 그리고 산톱풀로부터는 luteolin-7-0-glucoside, apigenin-7-0-glucoside, luteolin, apigenin을 분리 확인 동정하였다.