난자의 동결보존 방법은 보다 효과적 난자은행을 개발하기 위한 필수불가결한 요소이다. 본 연구에서는 보다 효과적인 유리화 동결법을 개발하기 위해 유리화 동결 응해 후 염색체와 방추사의 손상이 일어나는지를 알아보고자 본 실험을 수행하였다. 난구세포에 둘러싸인 난자를 5.5 M etylene glycol과 1.0 M sucrose 용액에 노출 후 electron microscope grid에 부착시킨 후 액체질소에서 냉동 보존하였다. 동결 융해 후 생존한 난자들은 방추사의 이상성을 보기 위해 immunostaining 방법을, 염색체의 이상성을 보기 위해 karyotyping을 시행하였다. 실험결과 염색체 이상빈도는 대조군의 경우 19.6%, 동결 융해군은 32.8%로 관찰되었고, 방추사의 이상빈도는 대조군의 경우 20.2%, 동결 융해군의 경우 32.3%로 대조군에 비해 염색체와 방추사의 이상성이 증가되었다. 결론적으로 마우스의 성숙난자를 유리화 동결시킨 후 염색체와 방추사의 이상성이 증가됨을 관찰하였다.
Purpose: The use of an autogenous fat graft has become a common procedure in plastic surgery. However, questions remain concerning on the viability of fat cells and preservation method of aspirated fat. The purpose of this study was to examine the viability of fat cells stored at $-20^{\circ}C$ in the freeze for 1 year after harvest from abdominal liposuction. Methods: Eighteen adults (aged 24 to 65 years old, 16 female and 2 male) were recruited for this study. Harvested aspirated fat tissues were obtained by suction - assisted lipectomy and frozen at $-20^{\circ}C$ commercial refrigerator for one year (average 12.5 months). The viability off at cells in specimens were measured after thawing. The numbers of viable cells were measured on a fluorescence microscope after staining with fluorescein diacetate and propidium iodide. GPDH (Glycerol - 3 - phosphate dehydrogenase) activity was measured. Cell culture was done for 3 weeks. Results: There were no viable cells under the fluorescence microscope, no detectable GPDH activity, and no cultured cells. Conclusion: These findings suggest that aspirated fat after frozen storage for one year at $-20^{\circ}C$ freezer is inadequate to reuse.
금낭화 (Dicentra spectabilis L.)는 개발가치가 있는 국내 자생화 중의 하나로서 우수한 품종의 대량생산이 절실히 요구되는 실정이다. 본 연구는 현탁배양을 통한 배발생세포의 대량증식과 체세포배 발생 및 식물체재생의 적정조건을 구명하여 효율적인 기내묘목의 대량생산 체계를 확립하고자 시도되었다. 1.0mg/L 2,4-D SH고체배지에서 유도된 배발생캘러스를 현탁배지에서 증식시킨 결과, 1.0mg/L 2,4-D를 포함한 SH배지에서 MS배지에 비해 증식율이 높게 나타났으며, 체세포배 발생율은 1/2배 SH기본배지에서 가장 높게 나타났다. 250$m\ell$ 삼각플라스크에서 5,000개 이상의 고빈도로 체세포배가 생산되었다. 체세포배로부터 발아유도시에 GA$_3$는 정상적인 식물체로의 재생을 억제하는 효과를 나타내었으며, 정상적인 식물체 재생은 1/2희석 SH배지에서 양호하였다, 신초와 뿌리를 갖는 유식물체를 모래와 원예용상토(5:1, vol)가 혼합된 토양이 함유된 포트에 이식하여 1개월 후 58%의 생존율을 나타내었다. 이상의 결과를 활용하면 체세포배로부터 금낭화의 묘목을 대량생산 할 수 있을 것으로 생각된다.
Mycobacterial cell-wall skeleton (CWS) is an immunoactive and biodegradable particulate adjuvant and has been tried to use for immunotherapy. The CWS of Mycobacterium bovis bacillus Calmette-Guerin (BCG-CWS) was studied as an universal vaccine vehicle for antigen conjugation, to develop potentially effective and safe vaccine. Although a variety of biological activities of BCG-CWS have been studied, the effects of BCG-CWS on spleen cells are not fully elucidated. Using MTT assay and trypan blue exclusion test, we found that BCG-CWS significantly enhanced the viability and proliferation of cells. Multiple clusters, indicating proliferation, were observed in BCG-CWS-treated spleen cells and surface marker staining assay revealed that BCG-CWS promoted the proliferation of $CD19^+$ B lymphocyte rather than $CD4^+$ or $CD8^+$ T lymphocyte. In addition, BCG-CWS up-regulated the expression of anti-apoptotic molecules such as bcl-2, bcl-xL. BCG-CWS increased the surface expression of CD25 and CD69 as well as IL-2 production of spleen cells, suggesting increased activation. Furthermore, BCG-CWS enhanced the antigen-specific cell proliferation and interferon-gamma production of spleen cells. Taken together, these results demonstrate the immunostimulatory effects of BCG-CWS on spleen cells via multiple mechanisms, providing valuable information to broaden the use of BCG-CWS in clinical and research settings.
본 연구는 차 카테킨인 EGCG (epigallocatechin gallate)에 의한 구강세균의 살균효과를 조사하기 위하여 수행되었다. 초기 세포밀도 $10^{7}$ cell/ml의 대상 세균에 대한 항세균 활성은 EGCG 1ml당 5mg에서 조사하였다. 선택 또는 복합배지상에서 집락생성단위(colony-forming unit, CFU)에 근거하여 EGCG의 항세균 활성은 농도에 비례하는 것을 확인하였다. Streptococcus mutans와 Streptococcus sobrinus는 5mg/ml의 EGCG에서 8시간 이내에 완전히 살균되었다. Lactobacillus acidophilus와 Lactobacillus plantarum도 동일한 조건에서 각각 2시간과 4시간 이내에 살균되었다. 2.5 mg/ml의 EGCG로 처리한 사람의 타액에서 유래하는 총 구강세균의 생존율을 BHI 고체배지상에서 조사하였으며, 총 구강세균은 10시간 이내에 완전히 살균되었다. MS 고체배지상에서 S. mitis and S. salivarius의 집락은 감소되었으며 배양 12시간 이내에서는 집락은 관찰되지 않았다. 그 결과, EGCG는 입냄새와 치석의 원인이 되는 구강세균을 살균시키고 충치를 예방하는 자연적이며 효과적인 물질임이 입증되었다.
Haloperoxidase를 생산하는 미생물을 분리하기 위하여 국내 연근해와 남북극 등의 해양시료에서 분리된 방선균 균주를 대상으로 탐색을 수행하여 남해 백도 해조류 추출물로부터 분리된 한 종류의 방선균(#1460)에서 높은 haloperoxidase 활성이 확인되었다. 본 균주의 생리.생화학적 특성은 Streptomyces 속과 유사하며 생산되는 haloperoxidase는 세포 조 추출물로부터 ammonium sulfate precipitation, High-Q column chromatography, gel permeation chromatography, Hydroxyapetite chromatography 그리고 hydrophobic interaction chromatography를 통하여 42%의 수율과 purification fold 70으로 정제하였다. 본 효소의 최적 반응 pH는 7이고 pH 8에서 더 높은 안정성을 보여 $60^{\circ}C$에서 1시간 반응에 효소활성의 50%가 생존한다. 또 cyanide와 azide 이온에 의해 강한 저해현상을 보인다.
All organisms are being exposed to harmful factors present in the environmental. The combined action of various factors is a distinguishing feature of modern life. An interaction between two chemicals is considered as synergistic when the effect produced is greater than the sum of the two single responses. The biological effects due to the combined action of ionizing radiation with the other factor are hard to estimate and predict in advance. In the current study, we investigated the synergistic effects between ionizing and $HgCl_2$ using fish hepatoma cells (PLHC-1 cells). The results showed a dramatic decrease of cell viability after simultaneous treatment of PLHC-1 cells with ionizing radiation and $HgCl_2$. Neiither of the two had any cytotoxic effect when treated alone. The cytotoxicity of ionizing radiation was enhanced in the presence of $HgCl_2$. The synergistic effects were observed after exposure of the PLHC-1 cells to ionizing radiation combined with $HgCl_2$. The synergistic interaction was due to an increase of irreversibly damaged cells after the combined exposure. Analysis of the extent of synergistic interaction enables to make quantitative estimation of irreversibly damaged cells after the combined exposure. The present study suggests that PLHC-1 cells can serve as rapid screening tools for detecting the toxicity of harmful factors.
최근 피부친화성, 흡수력, 나노 입자의 제조 등에 우수한 특성을 지닌 불포화 레시친에 대한 관심이 높아지고 있다. 이에 따라 불포화레시친의 산화안정성을 높이고, 변질되기 쉽고 독성을 지닌 합성화합물을 대체하는 천연물을 개발하고자 하였다. 결과, 하늘타리(T. kirilowii Maximowicz)의 열매와 뿌리의 성분분석을 한 결과 항산화 성분으로는 갈릭산, 카페인산, 3,5-디하이드록시벤조익산, 플라보논이 검출되었다. 총 폴리페놀 함량은 열매추출물(53.5 mg/g)보다 뿌리추출물(133.85mg/g)에서 높게 나타났고 프리라디칼 제거 및 지질산패 억제효과 또한 뿌리 추출물이 우수하였으며 뿌리 추출물은 폴리페놀 함량이 100 ppm 이상일 때 대조군으로 사용한 BHT보다 약 20.1%, 19.2% 높게 나타났다. 또한 하늘타리 추출물은 1250ppm 이하에서 95% 이상의 높은 세포 생존율을 나타내어 안전성이 우수하였다. 리포좀의 안정성에 대한 효과는 열매보다 뿌리추출물이 우수하였으며 뿌리추출물은 대조군인 BHT에 비해 항산화 효과 15.1%, 제타전위 13.9% 높았으며, 입자크기는 9.3% 낮아 기존의 합성 원료보다 우수하였다
첨가제로 맥주효모와 세포외벽을 화학처리 (protoplasted)한 것과 하지 않은 K. fragilism, C. utilis 및 빵효모를 각각 3%씩 배합사료에 첨가하여 평균체중 210mg 전후의 참전복 치패를 10주간 사육 실험한 결과, 생존율은 사료의 효모 종류 및 외벽처리에 따른 유의한 차이는 없었으며, 상품 사료와도 차이가 없었다(P>0.05). 평균증중량 및 가식부 중량은 protoplasted K. fragilis 첨가구가 대조구, 빵효모 및 맥주효모 처리구보다 유의하게 높은 값을 보였으며 (P<0.05), rm 외 실험구들은 실험구간에 차이가 없었다 (P>0.05). 최종 평균 각장은 protoplasted K. fragilis 첨가구가 대조구, 빵효모 및 상품사료보다 유의하게 높은 값을 나타내었으며 (P<0.05), 그 외 실험구들은 차이를 보이지 않았다. 가식부의 수분, 단백질, 지질 및 회분 함량은 실험구간에 유의차는 없었다. (P<0.05).
피부 각질층내의 아미노산 조성비율과 유사한 조성비로 amino acid complex을 제조하고, 제조된 amino acid complex가 피부에 미치는 영향을 알아보기 위해 세포 생존율, TIMP-1 발현 증가율, 보습 및 각질량 변화를 측정하였다. 연구 결과 amino acid complex는 독성이 없는 안전한 물질로 우수한 보습력 및 보습유지효과와 ascorbic acid와 유사한 TIMP-1 발현량 증가로 주름 예방 및 개선에 효과를 가지고 있으며, 각질량 감소 및 감소유지효과로 자극이 있는 AHA 대체 물질로의 가능성을 보였다. 따라서, amino acid complex는 다기능을 가진 노화방지 화장료 기능성분으로 유용하게 사용될 수 있음을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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