연두·금파리에서 혈구 세포가 면역반응의 일환으로 일으키는 결절형성(nodule formation) 현상을 형태학적으로 관찰하고자 본 실험이 수행되었다. 연두금파리 종령 유충 체내에 정상 효모, 고정된 대모, 세포액이 제거된 원형질체의 효모를 각각 주입하여 면역반응 과정을 전자현미경으로 관찰하였다 먼저 정상 효모를 주입하였을 경우, 효모와 접촉한 헐구의 과립방출과 곧 이은 혈구의 파괴 그리고 효모 주위에 혈림프와 함께 점액성응혈(clot)의 형성을 관찰 할 수 있었다 점액성 응혈에는 여러 유형의 파괴된 혈구가 포함되어 있었다. 이같은 면역반응에는 체내 혈구 중 과립혈구(granulocyte)가 가장 활발히 반응였고 응혈의 대부분을 형성하였다. 결절의 중심부인 응혈은 대모와 파괴되지 않은 혈구 대 파괴된 혈구 그리고 방출된 과립들로 차 있었고, 효모 주입 3시간 까지는 이같은 응혈은 계속 확대되었다. 그러나 10시간 이후에는 응혈이 관찰되지 않았으며 이때 체강내에서 효모가 관찰되곤 하였다. 고정된 효모를 주입하였을 경우에는 혈구파괴나 과립방출 등이 관찰되지 않았으며, 고정된 효모에 대한 혈구의 식 세포작용만이 관찰되었다. 이 식세포작용은 주입후 10시간 까지 계속되었다. 원형질 체의 효모를 주입하였을 경우에는 혈구에의한 면역반응이 관찰되지 않았다.
연구 목적 : 면역 반응에서 B-1 세포의 정확한 역할은 아직 명확히 규명되지 않았으나 최근 B-1 세포가 면역의 내성을 야기하고 유지하는데 필요한 특성들을 가지고 있음이 밝혀지고 있다. 이에 본 연구에서는 B-1 세포 유래 단클론 항체의 특성과 항원 자극에 대한 B 세포의 동시자극자 (MHC Class, B7-2, 7-2) 발현을 평가하여 B 세포의 면역조절 기능을 알아보고자 한다. 연구 대상 및 방법 : B-1 세포 유래 단클론 항체를 형성하는 잡종세포주를 이용하여 다양한 내, 외인성 항원에 대한 단클론 항체의 반응 양상을 평가하였다. 여러 내, 외인성 항원으로 면역한 쥐의 복강과 비장 B 세포의 동시자극자의 발현을 Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS)을 이용하여 평가하였다. 결과 : 최종적으로 단클론을 형성하는 2개의 클론을 형성하였고, 이 B-1 세포 유래 단클론 항체는 dose-saturable pattern을 띄는 다중 반응성을 나타내었다. FACS를 이용한 동시자극자의 발현 검사에서는 MHC 발현은 복강과 비장의 B 세포가 유사하였으나, B7-1과 7-2는 복강의 B 세포에서 더 뚜렷한 발현을 보여주었다. 결론 : B-1 세포 유래 단클론 항체는 다양한 내, 외인성 항원 자극에 대해 dose-saturable한 다중반응성을 나타낸다. 복강과 비장의 B세포는 내, 외인성 항원의 면역에 있어서 동시자극자 발현이 명확히 다른 양상을 나타냄을 확인할 수 있었다.
호흡기 바이러스 감염은 모든 연령층의 천식에 상당한 영향을 미치는 데 영아에서 RSV는 천명을 야기하고 대부분 일시적이나 재발성 일수도 있다. 어릴 때 바이러스 감염은 면역체계 형성에 영향를 미쳐 알러지와 천식의 위험을 완하할 수있다고 한다. 또한 소아와 성인 천식에서 RV같은 감기 바이러스는 천식의 급성 증상을 유발한다. 호흡기 바이러스 감염에 대한 면역반응이, 기관지로 부터 바이러스 제거 기능외에 기도수축과 호흡기 증상에 관여한다고 한다. 이러한 변화가 일어나는 기전은 호흡기 바이러스가 proinflammatory 사이토카인과 매개체 생성을 유도하는 능력과 연관성이 있는 것 같고 이들이 상하기도 호흡기 증상 및 기도반응 변화에 관여하는 것으로 생각된다. 호흡기 바이러스 감염에 대한 면역반응을 요약하면 바이러스 감염으로 상피세포, 내피세포, 과립백혈구가 활성화되며, 상피세포는 사이토카인, 키모카인, 매개체들을 분비하여 항 면역 반응를 주도하다. 이와 같은 상피세포와 다른 기관지 세포들의 조기 활성화로 내피 세포에 유착분자 표현을 증가시켜 백혈구 동원 증가 및 혈관 투과성을 증가시켜 부종과 분비물을 증가시킨다. 바이러스 또는 바이러스 유발 사이토카인에 의해 활성화된 과립 백혈구, 대식세포, T세포들도 기도염증 증가, 기도폐쇄를 야기하고 기도반응을 증가시킨다. 세포독성 임파구에 의한 바이러스 감염세포의 분해, TGF-$\beta$ IL-10 같은 사이토카인에 의해 부분적으로 염증억제, 기도 remoldeling에 의한 기도구조의 재생등이 바이러스 감염후 기관지 기능의 지속적 변화를 결정한다. 끝으로 천식환자에서 RV 감염의 병인에 관한 기본적 문제는 RV감염이 정상인에서는 경한 증상을 나타내는 데 천식환자에서는 왜 심한 임상증상을 나타내는지 아직 완전히 밝혀지지 않았다. 항 바이러스에 대한 면역반응이 천식환자에서 손상되었는지 또는 천식환자에서 RV감염에 의한 중증의 임상증상은 어떤 다른 세포가 관여하는지? 이들에 대한 답은 기도염증이 천식에서 어떻게 조절되는지 또한 바이러스 감염에 의한 악화된 증상을 어떻게 치료할 것인가에 대한 방향을 제시해줄 것이다.
The distribution and the frequency of endocrine cells in the GIT of the Amur lizard(Takydromus amurensis) were investigated using silver techniques and immunohistochemical method. Only argyrophil cells stained by the Grimelius technique were found numerous in the pyloric glands and moderate in the duodenum. Two types of immunoreactive endocrine cells were identified by immunohistochemical method. Bovine CG-immunoreactive cells were demonstrated the entire GIT. BPP-immunoreactive cells were restricted in the duodenum and the ileum. The results showed that: the number of argyrophil cells was lower than the number of cells stained with bovine CG antiserum. Therefore, bovine CG-immunostaining and the Grimelius silver technique did not correspond with various endocrine cells in the Amur lizard.
In order to observe the antigenic localization in the tissues of the adult Clonorchis sinensis, immunogold labeling method was applied using serum immunoglobulins (IgG) of either worm·infected rabbits (group I) or antigen-immunized rabbits (group II) (by the body quid obtained from the adult worms). The electron micrographs of the sectioned worm tissue antigens, embedded in Lowicryl HM 20 medium and stained with protein A-gold complex (particle sixte: 12 nm), were compared between the group I and group II. The gold particles were observed in the interstitial matrix of the worm parenchyma, the epithelial lamellae of the cecum, and the cecal lumen both in group I and II. But the particles were in general more concentrated in group II. The gold particles were not observed on the basal lamina of the tegument or on vitelline glands in group I, while they were highly concentrated on those areas in group II. There were also differences in the antigenicity of interstitial matrix(reacted with group I IgG) and head part(reacted with group II IgG) of the sperm cells in the seminal receptacle. Conclusively, it is suggested that the substances comprising the basal lamina of the tegument or vitelline glands act as specific antigens reacting with antigen(body quid) immunized rabbit IgG. On the other hand, the substances in the cecal lumen and cecal epithelial lamellae are thought to be the specific antigen that react with the worm-infected rabbit IgG.
연두금파리 유충의 뇌와 복신경절에 분포하는 세로토닌 면역반응성 세포를 면역조직화학적 방법을 이용하여 동정하였다. 세로토인세포는 뇌에 28개, 제1식도하신경절의 첫째마디에 6개, 둘째마디에 10개 그리고 세째마디에 6개가 각각 존재하였다. 그리고 앞가슴신경절에 6개, 가운데가슴신경절에 4개 그리고 됫가슴신경절에 4개가 각각 위치하였다. 또한 복부신경절에서는 첫새 마디부터 일곱째 마디까지 각각 4개가 존재하였고 마지막마디인 여덟째마디에서는 단지 두개의 세포만이 관찰되었다. 결국 연두금파리 유충의 중추신경계에는 모두 94개의 세로토닌 면역반응성 세포들이 분포하였다. 이들 세포로부터 뻗어나온 축색들은 뉴로파일내에서 분지하거나 횡연합섬유를 이루었다.
Flow cytometer(유식세포분석분리기:FCM)는 부유되어 있는 세포의 여러 특성을 측정할 수 있도록 고안되었기 때문에 동물의 체내에 있는 세포중 자연적으로 부유되어 있는 혈구세포를 분석하기가 가장 용이하다. 면역계에서 가장 중추적인 역할을 담당하며 면역반응에 특이성과 기억능력 등을 부여하는 림프구와 탐색작용을 가장 왕성히 나타내는 과립구나 단구 등이 혈액내에 존재하기 때문에 FCM을 이용하여 개체의 방어기능을 맡고 있는 면역세포를 분석하는 일이 가장 먼저 활발히 이루어졌음은 당연하였다. 도한 1970년대 면역학이 큰 발전에 이룩한 단크론항체가 Miller와 Kohler에 의하여 개발되었기 때문에 면역세포의 분화항원에 대한 여러 종류의 단크론항체는 FCM의 이용으로 면역세포를 여러 아형으로 분석하고 분리가 가능하게 하였다. 마지막으로 FCM이 최근에 개발된 것에 맞추어 세포성 면역학이 30년 전부터 급속도로 연구되었으므로 면역학적 연구가 FCM의 이용으로 더욱 활성화되었음은 주지의 사실이다. 이런 시점에서 저자는 FCM의 원리와 면역생물학에서의 FCM의 역할에 대하여 간단히 소개하려고 한다.
Purpose: The purpose of this study was to investigate the immunoreactivity of calretinin in Brazilian opossum (Monodelphis domestica) retina. Calcium-binding protein calretinin is known to play a key role in calcium-mediated signal transduction. Methods: Experiments have been performed by standard immunocytochemical techniques on retina of the Brazilian opossum. Results: Calretinin-immunoreactivity was exhibited within the horizontal subpopulations, AII amacrine and ganglion cell subpopulations in the Brazilian opossum retina. Especially, all calretinin-immunoreactive AII amacrine cells also expressed parvalbumin. Conclusions: Similar to other mammalian retinas, calretinin-immunoreactivity was also observed within the AII amacrine cells in the Brazilian opossum retina. Thus, calretinin can be a marker of AII amacrine cells in the Brazilian opossum retina.
This study was performed to investigate the distribution and differentiation of choline acetyltransferase (ChAT)-immunoreactive cells in the basal nucleus of Meynert of the postnatal and adult rat forebrains, utilizing techniques of immunocytochemistry. According to the cell shape and the ratio of long axis vs short axis of cell soma, the ChAT-immunoreactive nerve cells in the basal nucleus of Meynert of the adult rat were classified into six types. In the adult rat, the frequency distributions (FD) of round, oval, elongated, fusiform, triangular and polygonal cells were 9.4%, 35.5%, 32.1%, 5.9%, 9.1% and 8.0%, respectively. The FD of oval and round nerve cells on the postnatal day (PND) 14 were observed to be 18.7% and 51.5%, respectively. Those were shown to be progressively decreased during developmental process to the adult. Also, those of elongated and triangular nerve cells on the PND 21 were observed to be 30.4% and 10.1%, respectively. Those were shown to be same phenomenon a,1 those in the round and oval cells. Meanwhile, those of the triangular and polygonal nerve cells were progressively increased from the early postnatal stage to the adult. The total mean volumes of ChAT-immunoreactive cell somata in the PND 7 rat were the lowest $(1,083{\mu}m^3)$ and those in the PND 21 rat were shown to be the highest $(5,045{\mu}m^3)$. But in the adult, those were decreased to $(2,731{\mu}m^3)$. Those in the PND 21 rat were shown to be about 84.7% larger than those in the adult. On the electron micrography, the cell organelles such as ribosomes, polysomes, rough endoplasmic reticula (RER) and mitochondria were well developed in the PND 21 rat forebrains, but Golgi complexes were shown to be proliferating phase. Especially, ribosomes, polysomes and RER were immunoreactive in the tissues treated with 0.05% triton X-100. According to the observations in the present study, it is considered that the ChAT-immunoreactive nerve cells in the basal nucleus of Meynert of the rat forebrains are differentiated throughout the following processes of changes during the postnatal development: 1) increase of cell soma volumes with the differentiation of tell organelles and neurites, 2) increase in the FD of differentiated tell types and 3) cell schrinkage without cell loss. The ribosomes, polysomes and RER are considered to be closely related to the intracellular localization and biosynthesis of the ChAT but not Colgi complex.
The pancreatic endocrine cells, glucagon and somatostation, of the Korean tree squirrel. Sciurus vulgais corea, were investigation by means of light and electron microscopic immunohistochemistry using the PAP and protein A-gold techniques. Glucagon-immunoreactive cells were distributed the periphery and occasinonaly central region of the pancreatic islets. Also, isolated cell was found between the pancreatic ancinar cells. The glucagon cells contraine granules with a diameter of 240~320nm and the electron dense core usually surrounded by a halo of less dense granular material. The core of granule was labelled strongly with gold particles. Somatostatin-immunoreactive cells were weakly stained in scattered along the peripheral pancreatic islets and were distributed as singly or small groups with in the pancreatic acinar cells. The somatostatin cells were spherical with a diameter of 250~275nm, moderately electron opaque (Gold particles were mostly demonstrated on the entire granule.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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