• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• v.30 no.4
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• pp.261-269
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• 2003

목 적:본 연구에서는 생쥐 난소 주기에 따른Dazla 유전자의 발현 조절 양상을 관찰하고자 하였다. 연구재료 및 방법: 생후 27일된 암컷 미성숙 생쥐 (total 33EA; each 3 EA)로 부터 Pregnant Mare Serum Globulin (PMSG) 투여전, PMSG 투여 3시간, 6시간, 12시간, 24시간, 48시간 후 난소 조직과 hCG 투여 3시간, 6시간, 12시간, 24시간, 48시간 후 난소 조직을 획득하였다. 암컷 성숙 생쥐 난소와 (n=3) 수컷 성숙 생쥐 (n=3)로부터 고환 조직을 획득하여 대조군으로 사용하였다. 각각의 획득된 조직에서 Dazla mRNA 의 발현 여부를 RT-PCR과 in situ hybridization (ISH) 방법으로 확인하였다. 호르몬 투여 시기에 따른 Dazla 유전자의 발현 강도를 ISH 방법으로 비교하여 정상 난소주기에서 PMSG와 PMSG+hCG 에 의한 Dazla 유전자의 발현 조절 양상을 관찰하였다. 결 과: 미성숙 생쥐, 성숙 생쥐 난소 내 난자 모두에서Dazla 유전자의 발현이 관찰되었다. 성숙 생쥐 고환 내 정자에서도 Dazla 유전자의 발현이 관찰되었다. 미성숙 및 성숙 생쥐의 난포에서는 난포의 성장에 따라 Dazla 유전자의 발현 강도가 강하게 관찰되었다. 미성숙 생쥐에 투여된 PMSG와 PMSG+hCG에 의한 유전자의 발현 강도는 난포의 크기가 같을 경우 호르몬 투여전과 비교하여 차이가 없었다. 결 론: Dazla 유전자는 난소내 난자에서 특이하게 발현되며, 난포의 크기에 따라 난자에서의 dazla유전자 발현의 강도도 증가한다. 그러나 PMSG와 PMSG+hCG에 의하여 유전자 발현이 조절되지 않은 것으로 보아 난소의 배란주기에 따른 유전자의 발현 양상에 변화가 없는 것으로 생각된다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• v.29 no.3
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• pp.159-166
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• 2002

연구목적: 본 연구에서는 생쥐 Dazla 유전자의 난소내 발현 위치를 확인하고, 배아의 발달에 따른 Dazla 유전자의 발현 양상을 관찰하고자 하였다. 연구재료 및 방법: 임신 제 7일, 10일, 11일, 14일의 태자 (각각 n=9)와 생후 27일된 암컷 미성숙 생쥐 (n=32), 8주령의 암컷 성숙 생쥐 (n=9)로 부터 난자, 과립막세포, 난소 조직을 획득하였으며, 9주령의 수컷 성숙 생쥐 (n=3)로부터 고환 조직을 획득하였다. 각각의 획득된 조직과 세포에서 Dazla mRNA의 발현 여부를 RT-PCR, in situ hybridization (ISH) 방법 등으로 확인하였다. 성선자극호르몬을 투여하지 않은 미성숙 및 성숙 생쥐에서 획득한 미성숙 난자 (GV)와 PMSG와 hCG를 투여한 미성숙 및 성숙 생쥐에서 획득한 성숙 난자 (MII)에서 RT-PCR로 Dazla 유전자의 발현 여부를 확인하였다. 미성숙 및 성숙 생쥐의 난소 조직과 성숙 생쥐의 고환 조직에서 RT-PCR 및 ISH 방법으로 Dazla 유전자의 발현 여부를 확인하였다. 결 과: 난소의 과립막세포에서는 미성숙 및 성숙 생쥐, PMSG와 hCG 투여 여부 등과 상관없이 모두 Dazla 유전자의 발현은 음성으로 판정되었다. PMSG 및 hCG를 투여하지 않은 난소에서 획득한 미성숙난자 (germinal vesicle, GV) 또는 PMSG 및 hCG 투여 후 채취한 성숙 난자 (metaphase II, MII) 모두 Dazla 유전자가 발현되었다. Dazla 유전자의 발현은 수정 직후 (2PN) 음성으로 전환되었으며, 착상 직전의 배반포 시기까지 유전자 발현이 음성으로 지속되었다. Dazla 유전자는 임신 제 7일 (PCD 7), 10일 (PCD 10), 11일 (PCD 11)의 태자에서도 유전자 발현이 계속 음성으로 관찰되었으나, 성 분화가 일어나기 시작하는 임신 제 $12{\sim}14$일 (PCD $12{\sim}14$)의 태자에서 유전자 발현이 다시 관찰되었다. 결 론: Dazla 유전자는 난소 내 난자에서만 특이적으로 발현하는 난자 특이 유전자 (oocyte specific factor)로서 Dazla 유전자가 난소 내 난포 생성과 관련성이 있음을 제시하고 있다. 향후 조기 폐경 환자에서의 연관성 등을 확인한다면 임상적으로 유용한 지표가 될 수 있을 것으로 사료된다.

• Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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• 2003.10a
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• pp.96-96
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• 2003

Acyl-CoA synthetase 4는 생쥐에 있어서 거의 모든 조직에서 발현하며 아라키돈산에 특이적인 효소이다. 아라키돈산은 세포막의 인지질로부터 cPLA2에 의하여 유리되고 cyclooxygenase-1, -2에 의하여 eicosanoid로 변환된다. 이렇게 생산된 prostaglandin과 같은 eicosanoid는 배란, 수정, 임신에 있어서 중요한 기능을 수행하고 있다. 그러나 세포막으로부터 유리된 아라키돈산은 acyl-CoA synthetase 4에 의하여 다시 세포막으로 재에스테르화되어 eicosaniod의 생산을 조절하는 것으로 생각되어지고 있다. 또한 acyl-CoA synthetase 4 유전자 한쪽이 knock-out된 heterozygote mouse에서는 사산, 유산과 난소에 있어서 황체 수의 증가 등을 보고하고 있다. 그러므로 본 연구에서는 정상 생쥐 (C57BL/6) 임신 기간 중 acyl-CoA synthetase 4 유전자의 발현을 확인하기 위하여 자궁, 난소, 태아에서 RT-PCR을 수행하였다. 또한 cPLA2, cyclooxygenase-1, cyclooxygenase-2 유전자의 발현 양상을 분석하여 eicosanoid 생산에 관여하는 유전자 상호간의 발현 을 확인하였다. acyl-CoA synthetase 4는 임신 0 day에서부터 19.5 day까지 자궁과 난소에서 모두 발현하고 있었다. 또한 5.5 day에서부터 19.5 day까지의 태아에서도 그 발현이 확인되었다. 그리고 cPLA2와 cyclooxygenase-1은 acyl-CoA synthetase 4와 유사한 양상을 보였으나 cyclooxygenase-2는 임신기간 중의 자궁, 난소, 태아에서 전혀 발현하지 않았다. 그러므로 임신 중 생쥐 자궁, 난소, 태아에 있어서 eicosanoid 생산에는 cPLA2, cyclooxygenase-1, acyl-CoA synthetase 4 유전자가 관여하고 있는 것으로 생각된다.

• Development and Reproduction
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• v.3 no.1
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• pp.95-100
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• 1999

Growth differentiation factor-9 (GDF-9) is a member of the transforming growth factor $\beta$ (TGF-$\beta$) superfamily. It has been known that GDF-9 is a growth factor having a crucial role in normal folliculogenesis and its expression is oocyte-specific. The present study was aimed to elucidate the expression of GDF-9 mRNA in the mouse primordial follicles as well as in the other developmental stages. The semiquantitative analysis of GDF-9 mRNA expression was conducted. Total RNA was extracted from the ICR mice ovaries at gestational day 19, postnatal day 1, day 10, day 21, and day 28, and RT-PCR was performed to measure GDF-9 and $\beta$-actin mRNA levels. Level of GDF-9 mRNA were normalized against the level of $\beta$-actin mRNA, and compared among different stages. GDF-9 mRNA was detected in all samples including the fetal ovaries that mainly consists of primordial follicles. The highest level of mRNA was observed in ovaries obtained at day 10 that mainly consists of growing follicles. The present result suggests that GDF-9 may play an important role in the early stage of folliculogenesis.

• Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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• 2004.07a
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• pp.29-29
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• 2004

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• v.33 no.1
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• pp.35-35
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• 2006

Objective: The purposes of the present study were to investigate the effect of ${\gamma}$-radiation on the expression of inhibin-${\alpha}$ proteins and genes for inhibin ${\alpha}$, ${\beta}A$, and ${\beta}B$ in the ovary. Methods: Immature mice were whole-body ${\gamma}$-irradiated with 25% of a lethal dose. At time 0, 3, 6, 12, and 24 hours after the irradiation, the ovaries were collected and used for immunohistochemistry for inhibin-${\alpha}$, and RT_PCR for inhibin-${\alpha}$, ${\beta}A$, and ${\beta}B$. Results: The expression of the immunoreactive inhibins-${\alpha}$ was maintained at 12 hours post-irradiation and reduced thereafter. The expression of inhibin-${\alpha}$ mRNA was significantly increased with the time after the irradiation. However there were no significant changes in the expression of ${\beta}A$ and ${\beta}B$ mRNAs. Conclusion: It might be thought that inhibin acts as one of the regulatory factors in the ${\gamma}$-radiation-induced follicular atresia in mice

• Development and Reproduction
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• v.4 no.2
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• pp.181-186
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• 2000

The expression of glucosamine-6-phosphate deaminase (GNPDA) was examined in mouse ovary from neonate to aduit. In western blot, band of Mr. 31 kDa antigen sharply increased 2 weeks after birth onward. In irmmunostaining of the adult ovary, GNPDA expression was constitutive in the theca and interstitial cells. However, expression in the granulosa cells was different according to folliculogenesis. Cytoplasm of the oocyte of some primary follicle showed positive signal but not in the antral follicle. Granulosa cells of antral follicles showed no visible sign of GNPDA expression. In the corpora lutea, the signal intensity in granulosaluteal cells increased according to luteal development and became the highest in the luteolytic phase. In summary, the differential expression of GNPDA was found in follicle cells according to folliculogenesis. It suggests that GNPDA might be involved in tissue remodeling in mouse ovary.

• Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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• 2005.10a
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• pp.47-48
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• 2005

• Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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• 2005.10a
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• pp.47-48
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• 2005

• Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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• 2004.10a
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• pp.47-48
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• 2004