This study aimed to find out suitable culture conditions for the differentiation of human amniotic membrane-derived stem cells(HAM) into hepatocyte-like cells. Almost homogenous population of fibroblast-like cells was successfully isolated from the amniotic membrane. In comparison to the non-coated plates and in the absence of insulin/transferrin/selenium(ITS), HAM cultured on the fibronectin-coated plates and in the presence of ITS showed the more intense immunocytochemical staining against the albumin. Addition of both fibroblast growth factor(FGF)-1 and -2 to the differentiation medium gave stronger staining compared to the treatment with FGF-1 or -2 alone. Periodic acid Schiff's base staining of glycogen and morphological turnover of fibroblast-like appearance of HAM into round shape matched the results of immunocytochemical studies. When the efficiency of two-step culture method was examined on the differentiation of HAM into hepatocyte-like cells, all of the results of immunocytochemical staining, periodic acid Schiff's staining and morphological change exhibited effective hepatic differentiation of HAM compared to the continuous culture method. Immunoblot analyses of HAM- conditioned media against the albumin showed that the culture of HAM in the presence of both ITS and fibronectin always gave a stronger staining intensity than those in the absence of them, and that the addition of ether mixture of FGF-4 and either FGF-2 or transforming growth $factor(TGF)-{\alpha}$ to the culture medium significantly enhanced the albumin secretion by HAM. Based on these observations, it is suggested that HAM could differentiate into hepatocyte-like cells under a culture condition consisting of fibronectin and ITS, and addition of FGF-4 with either one of FGF-2 or $TGF-{\alpha}$ could enhance the hepatic differentiation of HAM.
This study is to investigate whether young Korean children have understanding for testing hypothesis. Questions explored are; First, do children have notions of testing hypothesis? Or, do they just produce an effect? Second, choosing between conflicting hypotheses, can children distinguish between experiments that would produce conclusive and inconclusive evidence? For this study, 15 first grade and 15 second grade children in elementary school located in Kyunggi area near Seoul participated. Data collection and analysis were based on interviews with children for two weeks. Children were presented two conflicted hypotheses to decide which one is correct through conclusive evidence and inconclusive evidence in the interview. The results showed that children(1st: 93.3%, 2nd: 81.3%) of each grade can distinguish between hypothesis and evidence to do testing hypothesis, and distinguish between conclusive and inconclusive evidence. In conclusion, most young children have understanding of testing hypothesis based on their familiar experiences, so it was possible for them to differentiate hypothesis from evidence in certain situations.
Flow cytometer(유식세포분석분리기:FCM)는 부유되어 있는 세포의 여러 특성을 측정할 수 있도록 고안되었기 때문에 동물의 체내에 있는 세포중 자연적으로 부유되어 있는 혈구세포를 분석하기가 가장 용이하다. 면역계에서 가장 중추적인 역할을 담당하며 면역반응에 특이성과 기억능력 등을 부여하는 림프구와 탐색작용을 가장 왕성히 나타내는 과립구나 단구 등이 혈액내에 존재하기 때문에 FCM을 이용하여 개체의 방어기능을 맡고 있는 면역세포를 분석하는 일이 가장 먼저 활발히 이루어졌음은 당연하였다. 도한 1970년대 면역학이 큰 발전에 이룩한 단크론항체가 Miller와 Kohler에 의하여 개발되었기 때문에 면역세포의 분화항원에 대한 여러 종류의 단크론항체는 FCM의 이용으로 면역세포를 여러 아형으로 분석하고 분리가 가능하게 하였다. 마지막으로 FCM이 최근에 개발된 것에 맞추어 세포성 면역학이 30년 전부터 급속도로 연구되었으므로 면역학적 연구가 FCM의 이용으로 더욱 활성화되었음은 주지의 사실이다. 이런 시점에서 저자는 FCM의 원리와 면역생물학에서의 FCM의 역할에 대하여 간단히 소개하려고 한다.
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.26
no.1
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pp.1-16
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2000
Keratinocyte 는 피부 표피충의 대부분을 차지하고 있으며, 세포간 신호전달물질 cytokine을 생성분비함으로써 주위의 다른 피부세포의 활성 및 분화능력을 조절한다. 특히 melanocyte 한 세포는 keratinocyte 30 여 세포와 직접적으로 접촉하고 있으며 활발한 신호 전달을 통하여 피부생리의 동적평형 유지에 기여하고 있다. 본 연구에서는 실제 피부에서와 유사한 조건에서 keratinocyte 의 세포의 배출 신호물질인 cytokine 의 변화를 유도하는 물질이 melanocyte 의 피부색소형성과정에 기여하는 바를 평가하기위하여 keratinocyte-melanocyte 의 공동배양계 실험조건과 아울러, UVB 조사에 의해 keratinocyte 로부터 유리되는 물질이 melanocyte를 자극하여 melanin 생합성 유도를 촉진하는 기본 실험 System 을 확립하였고, 가능성있는 친연추출물 원료, 즉, 신이, 강황등의 melanin 생합성 억제능을 본 공동배양계에서 1차 평가한 후 소규모 임상실험에서 미백효능을 최종 평가하였다.
In order to establish a micropropagation system of Naricissus, the ability of bulblet regeneration among propagation materials was compared, and the adequate growth regulators and concentrations for each cultivar were investigated. The inorganic components were also assayed in the parts of propagation materials. In propagation materials, scape with based plates showed hightest rate of bulblet formation and rapid growth of formed bulblets in vitro, comparing to other parts of it. In comparing of varieties, 'Dutch Master' and 'Golden Harvest' showed a high ability for bulblet regeneration. The ability of bulblet regeneration was most favorable in the medium, supplemented with 5.0 mg/L BA and 2.5 mg/L NAA in 'Dutch Master', and 5.0 mg/L BA and 1.0mg/L NAA in 'Golden Harvest', respectively. In inorganic component analysis of propagation materials, the White part of scape contained 1.18 mg/L$P_2O_5$, 2.57 me Ca, 0.94 me Mg and 3.20 mg/L total N. It showed higher levels in concentration of inorganic components as compared to those of the other part of scape. In addition, leaves and yellow part of scape contained significantly high levels of Ca and Mg while scales bulb showed considerably low levels in all inorganic compounds.
This study was carried out to establish a reproducible culture system for callus formation and adventitious shoot development from young stem segments of Vigna radinta, and histological work for orgin of callus tissue and adventitious shoot. Induction of callus from young stem explants of Vigna radiata was very effective on MS inorganic salts supplemented with 0.5 mg/L 2,4-D and 1.0 mg/L kinetin. For the adventitious shoot regeneration from the callus tissues, the hormone combination of 0.75 mg/L NAA, 1.5 mg/L kinetin and MS salts resulted in about 21% efficiency. Histological examination showed that callus tissues originated from out-growths by callus cambium rings with do novo meristematic activities, which were localized at the outside of the vascular cambium. Adventitious shoots were developed from shoot apical meristem originated from the surface of callus masses. The shoot apical meristem produced leaf primordium, which then became leaf.
Kim, Yun-Hye;Park, Hyun-Myung;Jung, Ji-Yong;Kwon, Tack-Min;Jeung, Soon-Jae;Yi, Young-Byung;Kim, Gyung-Tae;Nam, Jae-Sung
Horticultural Science & Technology
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v.28
no.3
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pp.449-455
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2010
'Moulinrouge' was selected as the best regenerating cultivar among 18 different spray-type chrysanthemum cultivars bred in the Gyeongnam Flowers Breeding Research Institute. When the leaf explants from standard- and spray-type chrysanthemum 'Jinba' and 'Moulinrouge' were incubated on MS basal medium supplemented with $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ BA and $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ NAA, both 'Jinba' and 'Moulinrouge' induced adventitious shoots that can be regenerated into plantlets. Based on these regeneration conditions, we developed an efficient $Agrobacterium$-mediated chrysanthemum 'Moulinrouge' transformation method by using sequential selection of shoots from low ($10mg{\cdot}L^{-1}$) to high ($30mg{\cdot}L^{-1}$) concentrations of kanamycin after co-cultivation of leaf explants with $Agrobacterium$ for 10 days and induction of shoots. All kanamycin resistant plants investigated with genomic PCR analysis carried the report gene, $AtSICKLE$, in their genome. Although expression levels of the report gene in the transgenic plants investigated with RT-PCR were relatively low because of inefficiency of CaMV 35S promoter in chrysanthemum, transgenic lines expressing $AtSICKLE$ efficiently showed leaf epinasty phenotype. We expect that our results will provide a useful method that can perform a high-throughput investigation of genes isolated and studied well in model plants for molecular breeding of chrysanthemum.
The study compared the anti-aging, anti-adipogenesis, and anti-tumor effects of epigallocatechin-3- gallate (EGCG) in various cancer cell lines (SNU-601, MKN74, AGS, MCF-7, U87-MG, and A-549) and normal cell lines (MRC-5 fibroblasts, dental tissue-derived mesenchymal stem cells [DSC], and 3T3-L1 pro-adipocytes). Half inhibitory concentration ($IC_{50}$) values were significantly (p<0.05) higher in normal cell lines (~50 uM), when compared to that in cancer cell lines (~10 uM). For anti-aging effects, MRC-5 and DSC were exposed to 10 uM EGCG for up to five passages that did not display any growth arrest. Population doubling time and senescence-related ${\beta}-galactosidase$ ($SA-{\beta}-gal$) activity in treated cells were similar to untreated cells. For anti-adipogenic effects, mouse 3T3-L1 pre-adipocytes were induced to adipocytes in an adipogenic differentiation medium containing 10 uM EGCG, but adipogenesis in 3T3-L1 cells was not inhibited by EGCG treatment. For anti-tumor effects, the cancer cell lines were treated with 10 uM EGCG. PDT was significantly (p<0.05) increased in EGCG-treated SNU-601, AGS, MCF-7, and U87-MG cancer cell lines, except in MKN74 and A-549. The level of telomerase activity and cell migration capacity were significantly (p<0.05) reduced, while $SA-{\beta}-gal$ activity was highly up-regulated in EGCG treated-cancer cell lines, when compared to that in untreated cancer cell lines. Our results have demonstrated that EGCG treatment induces anti-tumor effects more efficiently as noted by decreased cell proliferation, cell migration, telomerase activity, and increased $SA-{\beta}-gal$ activity than inducing anti-aging and anti-adipogenesis. Therefore, EGCG at a specific concentration can be considered for a potential anti-tumor drug.
The red algae Gracilaria vermiculophylla is widespread on seashores worldwide and has been used as food in Asian countries. Previous studies have reported that extracts of Gracilaria red algae have beneficial anti-oxidant and anti-inflammatory effects. The present study examined the anti-senescence effects of Gracilaria vermiculophylla extracts (GV-Ex) in replicatively senescent human bone marrow mesenchymal stem cells (hBM-MSCs). GV-Ex pretreatment improved the cellular viability of hBM-MSCs that had been injured by oxidative stress. These effects of GV-Ex were confirmed by MTT assay and immunoblot analysis using the apoptotic proteins p53 and cleaved caspase-3. The reactive oxygen species (ROS) levels were examined in long-term cultured Passages 17 (P-17) mesenchymal stem cells (MSC) and compared to P-7 MSC. The ROS accumulation was greater in the P-17 than in the P-7. However, these increased ROS levels in the P-17 were decreased significantly after treatment with GV-Ex, and restoration of the levels of the anti-oxidant enzymes SOD1, SOD2, and CAT was also observed under these conditions. In addition, P-17 hBM-MSC treated with GV-Ex had decreased levels of the senescence proteins p53, p21, and p16. The results show that the ability of P-17 hBM-MSC to differentiate into osteocytes and adipocytes was improved by GV-Ex treatment, suggesting that GV-Ex ameliorates the functional decline of senescent stem cells.
This experiment was conducted to investigate the growing process, nitrogen content of leaves and grain weight of the tillers of three wheat and one barley cultivars under space planting condition. The rates of the ear-bearing tillers were highest in the main stem (MS) and followed by the Ist, 2nd, 3rd tiller of the first order tiller. The leaf emergencies on main stem and tillers of barley were found simmilar results to synchronously emerging leaf theory reported by katayama, however, one or more leaves were emerged from the tillers of wheat comparing to the theoretical numbers. The orders of the ear primordia development were MS 1st 2nd 3rd tiller. The differences of ear development between main stem and tillers were greatter in wheat than in barley. Total nitrogen content in leaf decreased accompanying with growth and the highest content were found on the higher ordered tillers. The order of the proportion of each stem grain weight to the grain yield per unit area was MS > 1st≒2nd > 3rd tiller.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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