토양으로부터 levan을 분해하여 단일종의 fructooligosaccharide를 생산하는 새로운 미생물을 분리 선별하여 본 연구의 공시균주로 선택하였다. Levanase 생산을 위한 최적 배지조성은 0.5% levan, 0.3% yeast extract 0.3% $NaNO_3$, 0.1% $K_2HPO_4$, 0.05% NaCl(pH 8.0)이었으며, 500ml용 shaking flask에 배지 50ml를 넣어 $30^{\circ}C$에서 54시간 배양시켰을 때 목적효소의 생산이 최대에 도달하였다. Levanase에 의해 생성되는 생성물은 단일종의 oligo당임이 확인되었으며 측쇄가 많은 levan으로부터는 소량의 측쇄구조를 가진 oligosaccharide로 추정되는 미지의 물질이 부산물로 생성되었다. 생성 oligo당을 순수하게 정제하여 HPLC 및 ESI-MASS로 중합도를 조사한 결과 DP가 7인 levanheptaose임이 판명되었다.
응집제를 생산하는 미생물은 토양시료로 부터 분리하여 그 중 응집활성이 높은 1 균주를 선택하여 분류학적 위치를 조사한 결과, Arcuadendrop sp.으도 동정되었으며 본 균주를 Arcuadendron sp. TS-49로 명명하였다. 응집제 생산 최적배지는 3% glucose, 0.2% yeast extract, 0.1% $NH_4Cl$, 0.05% $MnSO_4$, 0.01% $MgSO_4$ (pH 7.0)의 경우가 가장 우수하였으며, 배양 온도 및 배양 pH는 $30^{\circ}C$, pH 7.0일 때가 최적이었다. 최적 배양조건하에서 4~5일간 배양시 응집제 생산량이 최대에 도달하였으며 배양 시간의 경과와 더불어 응집활성은 급격히 감소하는 현상을 보여 생분해성이 우수함을 나타내었따. 이때의 응집제 생산량은 screening 배지에 비해 거의 10배 정도로 향상되었으며, 각종 microorganism과 suspended solid에 대한 응집작용을 검토한 결과, 정도의 차이는 있으나 모든 공시물질에 응집활성을 나타내었다.응집제의 조성을 검토하기 위해 각종 정성 test를 행한 결과, 당과 단백질이 검출되어 일종의 glycoprotein 임이 확인되었다.
공시균주인 Thiobacillus ferrooxidans(ATCC 19859)와 광양의 폐광산수에서 분리한 Thiobacillus KY를 이용하여 황칠광(pyrite, FeS2)에 대하여 30일간 침출반응하여 반응시간에 따른 황철광의 표변특성 변화를 관찰하였다. Thiobacillus ferrooxidans (ATCC 19859)의 경우 반응시간 20일 경과 후Thiobacillus KY는 반응 시간 10일 후 각각 황철광 표변에 결정구조의 변화가 관찰되었 다. FezS의 결합에서 S-Fe-S의 결합이 끊어점에 기언하는 [311] 평면의 상대적으로 감소와 침출시간 증가에 따른 [111]평면과 [220]의 상대적으로 노출의 증가의 특정을 나타냈다. SEM-EDS 결과 침출시키기 전의 시료는 Fe 36.97%, S 45.71%, Si 16.94% 이며 반응이 진행됨에 따라 황성분의 비율이 증가하였다. 또한 노출된 황칠광 위에 칩착물은 S 59.56%, Fe 38.9%, Si 1.53%의 원지구성비를 가진 물질이었다. 이러한 결과로 부터 침출이 진 행되면서 결정구조의 변화와 황과 철의 침착물에 의하여 황철광 의 표면이 비활성화된다는 결론을 도출할 수 있다.
최근 국내 큰느타리버섯 재배농가가 증가하면서 병해의 발생이 문제점으로 나타나고 있다. 본 연구에서는 큰느타리 버섯의 자실체에 발생하는 푸른곰팡이 병반으로부터 Penicillium sp.균을 분리하여 동정하였고 생리적 특성을 조사하였다. 분리된 Penicillium sp.균의 형태적 특성을 조사한 결과, 분생포자는 타원형이고 크기는 $2.3{\sim}3.4{\times}2.6{\sim}3.2\;{\mu}m$였다. 분생자병은 균사로부터 one-stage branch 모양을 형성하고, metulae는 $2{\sim}4$개로 크기가 $10{\sim}l8{\times}2.5{\sim}3.0\;{\mu}m$이며, phialides는 플라스크상이고 크기가 $9{\sim}13{\times}2.2{\sim}2.8\;{\mu}m$였다. Czapek 배지에서 배양할 경우 $25^{\circ}C$에서 7일에 균총이 21 mm 성장했으며, 균총의 색은 회녹색이었다. 이상과 같은 형태 및 배양적 특징으로 공시균을 Penicillium corylophilum로 동정하였고 이균을 상처접종하였던바 $6{\sim}7$일만에 재배농가에서와 동일한 증상을 나타내었다.
길항미생물을 이용한 항곰팡이성 퇴비의 개발을 목적으로 공시 식물로써 Spinacia oleracea L과 식물 병원균 Rhizoctonia solani Kuhn O-28을 모델로 사용하여 수행 되었다. 다양한 음식쓰레기를 일년동안 숙성시킨 퇴비로부터 80 균주를 분리하였고, 그 중 No.15-2 균주가 R. solani Kuhn O-28에 대해 가장 높은 항곰팡이 활성을 보였다. 16S rDNA sequencing과 primer pair PCR에 의해 표현형과 분류학적으로 거의 독성이 없는 것으로 밝혀진 Burkholderia cepacia genomoval V로 분류되었다. 이 B. cepacia No. 15-2가 퇴비화 중에 우점하였으며 그 균수는 15일 동안 거의 $10^{13}$ cfu/g을 유지하였다. S. oleracea L을 배양 했을 경우 R. solani Kuhn O-28에 의한 발병율은 B. cepacia No.15-2를 첨가함으로써 40% 감소하였다. 결론적으로 B. cepacia No.15-2는 다양한 식물의 곰팡이 유래의 병을 방제하는 데 이용 가능할 것으로 사료된다.
벼의 유묘기 저온처리하에 나타나는 chlorosis현상의 유전양식을 규명하기 위하여 실험한 결과를 요약하면 다음과 같다. 벼 21 공시품종 유묘기 저온 ($18^{\circ}C$)처리에서 chlorosis가 나타나는 품종은 통일형인 "밀양23호"와 인디카형인 "IR 36", "Dular"로 3품종이었고, 모든 자포니카형 품종에서는 chlorosis가 나타나지 않았다. 저온처리하의 엽록소 함량 감소는 품종군과 재배종간에 다양한 차이를 나타내었다. Dular와 Toyohatamochi가 교배된 $F_2$ 집단에서 저온처리에 의해 나타나는 제 3엽의 chlorosis 현상에 대한 분리비는 정상 개체와 chlorosis 개체가 3 : 1의 이론적 분리비 적합하였다. 이결과로 벼의 유묘기 chlorosis의 유전은 단순열성 유전자에 의해 지배 되는 것으로 분석되었다.
고구마 검은 썩음병균(L. theobromae)의 PSA배양물의 acetone추출물을 고구마 괴근에 처리하면 갈변이 유도된다. 공시균의 배양물로부터 갈변유도 활성물질을 분리 정제하여 화학구조를 결정하고 각각 4-hydroxymellein과 mellein으로 동정하였다. 화학합성에 의하여 천연 mellein의 상대구조는 (R)-(-)-mellein임을 입증하였다. 각 화합물은 $50{\sim}100{\mu}g$ 고구마에 접종하였을때 농도 의존적으로 갈변을 유도하였다. 또한 이들 화합물들이 고구마의 phytoalexin으로 알려져 있는 ipomeamarone의 생합성을 유도하는 elicitor로써 작용하고 있음을 증명하였다.
본 연구는 돈분 완숙퇴비에서 돼지분뇨 악취제어 효과가 뛰어난 효모를 분리하고, 그들의 특성을 조사하여 악취미생물에 관한 기초자료를 얻고자 수행하였다. 10% 돈분배지에서 성장이 우수한 균주를 선발하고 10% 돈분액체배지에 접종하여 28$^{\circ}C$ 72시간 배양한 후 가스경지간을 이용하여 암모니아와 아민류를 측정하여 이들에 대한 기질 선호성을 가진 호모를 악취유용 미생물로 CY-10을 선발하였다. 이의 형태적, 생화학적 특성에 따라 희비에서 분리한 CY-10은 Candida rugosa로 동정되어 본 시험에 공시로 Candida rugosa CY-10으로 하였다. 이의 악취저감능을 조사하기 위해서 돈분 액체배지에 성장시키면서 이들 배양액의 휘발성 지방산을 분석한 결과 대조구에 비해 CY-10의 경우 iso- butric acid와 busic acid를 100% 감소시켜 뷰틸산류에 기질특이성이 있는 것으로 나타났으며 또한 이의 처리구는 대조구에 비해 $NH_4$-N, Soluble-N, BOD즐 각각 20%, 12.6%, 9.82%를 감소시키는 효과가 있었다
본 실험은 콩나물 재배과정 중에 일어나는 부패문제를 해결하기 위하여 사용이 허가된 산성 식품 첨가제들을 대상으로 그 이용 가능성을 찾아보고자 수행되었다. 다소 노화된 은하콩을 재료로 콩나물 배축의 부패에 관여하는 균(부패균)을 순수 분리하여 그 특성을 조사하였고, propionic acid 등 8가지 약제처리가 부패균의 증식 억제효과를 인왕배지상에서 검토하였다. 또한 1% 이하의 약액처리가 콩나물 발아와 유묘생장에 미치는 영향을 조사하여 약해유발의 가능성도 검토하였으며 그 결과들을 요약하면 다음과 같다. 1. 부패균으로 확인된 3종류의 균계를 대상으로 Gram stain등 8가지 미생물학적 검정을 통하여 분석한 결과 상호 약간의 특성 차이는 있었으나 Pseudomonas속의 균계로 판단되었으며, 분리된 곰팡이류 중에는 부패균이 없었다. 2. 5% 이상의 농도에서는 공시약제 중 sodium hypochlorite의 부패균 증식억제 효과가 가장 컸으나 발아를 극심하게 저해하여 실용성이 없다고 판단되었다. 3. Propionic acid, acetic acid, calcium propionate, sodium propionate등의 약제 효과가 큰 것으로 나타났는데 propionic acid와 acetic acid의 효과가 상대적으로 더 뚜렷하였다. 4. Propionic acid, acetic acd, calcium propionate, sodium propionate 등의 선발된 4가지 약제는 1.0% 및 그 이하의 농도에서도 다소의 부패균 증식억제 효과가 나타나 부패경감제로서의 충분한 이용 가능성을 보였다. 5. 1%이하의 용액에 콩종자를 침지처리 하였을 때 무처리에 비해 선발된 4가지 약제처리에서 모두 발아율, 초기생육 및 비정상발아 개체율에서 차이를 나타내지 않아 약해는 문제시 되지 않을 것으로 판단되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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