The possibility of inadvertent introduction of therapeutic gene expressing viral vectors has raised safety concerns about germ-line infection. Particularly, for indications such as prostate cancer and ovarian cancer, the proximity of the point of viral administration to organs of the reproductive system raises concerns regarding inadvertent germ-line transmission of genes carried by the virus vector. To evaluate the safety of in vivo adenovirus mediated gene transfer, we explored the biodistribution, persistance and potential germ-line transmission of p53-expressing adenovirus (Ad-CMV-p53). Both male and female Balb/c mice were injected with $1{\times}10^9$ PFU of Ad-CMV-p53. The PCR analysis showed that there were detectable vector sequences in liver, kidney, spleen, seminal vesicle, epididymis, prostate, ovary, and uterus. The RT-PCR analysis for detecting inserted gene, p53 showed that Ad-CMV-p53 viral RNA were present in spleen, prostate and ovary. Direct injected male and female mice of adenovirus vector into testis and ovary were mated and their of offspring were evaluated for germ-line transmission of the adenoviral vector. The PCR and RT-PCR analysis showed no evidence of germline transmission, although vector sequences were detected in DNA extracted from gonadal tissues. Real-time PCR result confirmed a significant decrease of adenovirus in gonad tissues 1 week after injection. We have also analysed the cell specific localization of viral DNA in gonad tissues by using in-situ PCR. Positive signals were detected in interstitial tissue but not in seminiferous tubule in sperm. In the case of ovary, adenovirus signal were localized to the stromal tissue, but no follicular signals were observed. Together, these data provide strong evidence that the risk of the Inadvertent germ-line transmission of vector sequences following intraperitoneal or direct injection into genito-urinary system of adenovirus is extremely low.
Injured spleens have been successfully managed without operation in a number of children; however, splenectomy or splenic-conserving surgery may not be avoided because of exsanguinating hemorrhage. This study was performed to evaluate the efficacy of splenic arterial embolization (SAE) to control hemorrhage from injured spleens in children. We compared the outcomes of two groups of children with splenic injury. The first group (G1) consisted of eighteen children who were managed with conventional selective nonoperative treatment between 1993 and 1994. The second group (G2) consisted of 23 children prospectively studied from 1996 to 1997 after SAE was added in the management protocol of splenic injury. The criteria for SAE were grade III or IV injury, extravasation of contrast material revealed by CT, or unstable vital signs without evidence of associated injuries. Laparotomy was performed in 6 patients of G1 (33.3 %), 2 of whom had associated injuries. Five underwent splenectomy and the overall salvage rate in G1 was 72.2 % (13/18). In G2, eight patients (34.8 %) had SAE, which stopped bleeding successfully in all patients. Two of G2 (8.7 %) had laparotomy because of associated injuries. Only one patient underwent splenectomy and the salvage rate was 95.6 % (22/23). No patients required transfusion after SAE. In conclusion, the SAE effectively controlled hemorrhage from injured spleens. More spleens were salvaged with a reduced laparotomy rate after application of SAE in splenic injury.
Cyclic adenosine 3'5'-monophosphate (cyclic AMP) has been frequently accepted as an intracellular messenger for receptor-mediated action of opioids. In this experiment, it was designed to determine the interaction of dopaminergic and opioidergic system in the mouse striatum in normal and chronic haloperidol treated groups. Haloperidol 750ug/kg I.P. for 10 days was performed for dopamine denervation. The morphine, DAGO, DPDPE, and U5O,488H inhibited the increase of haloperidol-induced cyclic AMP content in chronic haloperidol treated mouse striatum. The inhibition of DAGO and DPDPE showed significant increase compared to normal mouse striatum. Naloxone showed antagonistic effect on the morphine and U5O,488H in chronic haloperidol treated group, and showed antagonistic effect on morphine, DAGO, DPDPE, and U5O, 488H in normal mouse striatum. These findings support that there is a functional interrelationship of dopaminergic and opioidergic pathway in the striatum. This result provides an evidence that following destruction of striatal dopaminergic neuron, there are some changes of cAMP content on the ${\mu},\;{\gamma},\;and\;{\kappa}$ opioid receptor, but the ${\kappa}$ opioid receptor still has its function.
This study was carried out to observe the formation of superoxide radicals and the changes in the activities of superoxide dismutase (EC.1.15.1.1.) from the various organs of a rat which was blocked tricarboxylic acid cycle. In order to block the tricarboxylic acid cycle, the beta-fluoroethylacetate was injected into peritoneal cavity of rat and removed the various tissues from the rat at internals of an hour. By tissue extracts being prepared by the method of Weigiger and Fridovich the activities of superoxide dismutase, aconitase, and contents of bliid glucose, citrates, and wuperoxide radicals were determined. The experimental results are summarized as follows: Accumulation of citrates if increased within three hours after treatment in the all tested tissues, especially, in the geart and spleen they are higher than one of other tissues as 12 and 20 times of control. The activities of aconitase are ingibited to 30-35% on an hour after beta-fluoroethylacetate treatment comparing with that of control rat. The content of blood glucose is increased to 1.6 fold of normal value after 5 hours of treatment. In all tested tissues, superoxide radicals are formed in the heart as 0.26 micromoles per gram tissue between one and three hours after treatment. The activities of total superoxide dismutase are increased between one and three hours after treatment in the all tested tissues and one of these enzymes in heart is highest. The activities of superoxide dismutase containing Mn are also increased with an increase of total superoxide dismutase activities.
Background: Recently, endoscopic submucosal dissection (ESD) with laparoscopic sentinel lymph node dissection, named ESN or endoscopic full-thickness gastric resection with laparoscopic sentinel lymph node dissection, named Hybrid-natural orifice transluminal endoscopic surgery (NOTES) was suggested the possibility of minimally invasive treatment for patients with early gastric cancer (EGC) who were beyond the indication of ESD. This study aimed to evaluate the outcomes of ESN or Hybrid-NOTES. Methods: We retrospectively analyzed patients treated with these therapies from January 2009 to May 2013 in terms of short- and long-term outcomes. Each patient was diagnosed with EGC but was not included in ESD indications and had the high risk of lymph node metastasis (LNM). Results: A total of 42 patients with EGC treated by ESN or Hybrid-NOTES. Of the 21 patients who underwent ESN, a total of 4 patients underwent additional gastrectomy, 1 with LNM, 1 with surgical complication, and 2 with noncurative resection. Of the 21 patients who underwent Hybrid-NOTES, a total of 5 patients underwent additional surgery, 1 with LNM, 2 with surgical complication, and 2 with noncurative resection. Overall survival was 100% over a mean follow-up of 75 months, but 3 patients underwent ESD or gastrectomy with metachronous lesion. And 1 patient who had received ESN was found to have a metastatic lymph node and undergo palliative chemotherapy. Conclusion: ESN or Hybrid-NOTES showed favorable short-and long-term outcomes. These methods may be utilized as a bridge between ESD and gastrectomy in the case of EGC which is more likely to have LNM beyond the ESD indications.
Jin Sil Pyo;Yong Woo Choi;Hoon Sup Koo;Kyung Ho Song;Yong Seok Kim;Sun Moon Kim;Tae Hee Lee;Kyu Chan Huh;Young Woo Kang
Journal of Digestive Cancer Research
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v.2
no.2
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pp.72-74
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2014
Pancreatic cancer is well known to have a poor prognosis and poor responses to both of chemotherapy and radiation therapy. We report a metastatic pancreatic cancer treated successfully with chemotherapy and radiation therapy. A 71-year-old female with epigastric pain and weight loss was diagnosed as advanced pancreatic cancer with main vessels invasion and multiple mesenteric lymph node's metastasis. She was taken chemotherapy of gemcitabine single regimen and radiation therapy. Although she experienced one recurrence and concomitant primary lung cancer, she has survived for over 7 years with no symptoms. The authors report this case of long term survival in metastatic pancreatic cancer after chemoradiation therapy.
Neutral salt-soluble, hot water-soluble and methanol-soluble materials (hereinafter referred to Fr. NaCl, Fr. HW and Fr. MeOH, respectively) were extracted from sclerotium of Grifola umbellata. The Fr. NaCl and Fr. HW did not show any direct cytotoxicity against NIH3T3, Sarcoma 180 and MCF-7, but Fr. MeOH showed cytotoxicity against these cell lines at the concentration of $1,000\;{\mu}g/ml$. Intraperitoneal injection with Fr. NaCl showed antitumor effect with life prolongation of 66.7% and decrease the number of Sarcoma 180 cells of 54.2% in mice inoculated with Sarcoma 180. Fr. NaCl improved the immunopotentiation activity through alternative complement pathway and the alkaline phosphatase activity by $85.05{\sim}88.73%$ and 6 folds, respectively. The number of peritoneal exudate cells and the circulating leucocytes were increased by 1.7 and 3.6 folds in the Fr. NaCl treating group compared with the control group, respectively. The weight of immunoorgans such as liver, spleen and thymus were also gradually increased. The hematological analysis of the Fr. NaCl group was similar with that of the control group. The total polysaccharide and protein contents of Fr. NaCl were 98.25% and 1.44%, respectively. These results indicate that the antitumor activity of Fr. NaCl was exerted through immunopotentiation, but not through cytotoxicity against the tumor cells.
For the application of nano-sized material in various fields, the evaluation of nano-sized material toxicity is important. In the present study, various concentrations of 200 nm-sized silicon dioxide nanoparticle suspension were intraperitonially injected into mice to identify the toxicity of silicon dioxide nanoparticle in vivo. In the hematological analysis of group II treated with silicon dioxide nanoparticle 100 mg/kg body weight, lymphocytes and monocytes were significantly different compared to the control group. In group III treated with silicon dioxide nanoparticle 200 mg/kg body weight, lymphocytes, monocytes and hemoglobin were significantly different compared to the control group. In blood biochemical analysis of group III, the concentration of AST, ALT, BUN, and creatinine were significantly different compared to the control group. Histopathologic examination of the kidney indicated a mild injury only in mice received 200 mg/kg silicon dioxide nanoparticle. According to the results of the present study, the significant differences in the hematological and blood biochemical analyses and abnormal histopathological findings in the mouse kidney may have been related to exposure to silicon dioxide nanoparticle.
One of the most important prerequisites of the industrial microorganism is that it should not be virulent to humans or economically important animals or plants. In this investigation, the microbiological characterization of T. madida N-5-3 strain was performed. And then, the virulence of the test strain in mouse model was examined systematically. The microbiological characteristics of the test strain were found to be fully consistent with those of typical T. madida. The i.p. lethal dose(LD)$_{50}$ of the test strain was greater than 1$\times$10$^8$, because there was no dead animal with the challenge doses upto the level of 1$\times$10$^8$. When 1$\times$10$^8$ yeast cells were challenged to the laboratory mice, T. madida N-5-3 strain was completely cleared from the liver and spleen in 4 days after challenge. And no pathological changes in the histological examination of the internal organs from challenged mice was observed. Above results can provide the predictability of the safety of T. madida N-5-3 strain for the industrial use in the view point of the public health aspect.
The SCID-repopulation cells(SRCs) assay has been widely used to determine the self-renewal capacity of hematopoietic stem cells (HSCs). In this study, we tested the repopulating efficiency of porcine bone marrow derived hematopoietic stem cells using nonobese diabetic/severe combined immunodieficient (NOD/SCID) mice which was inherited immunodeficiency mire with defect of T cells, B cells, and low activity of NK cells. We transplanted porcine bone marrow hematopoietic stem/progenitor cells with intraperitoneal injection into neonate NOD/SCID mice. We confirmed efficient reconstitution activity of inoculated porcine hematopoietis cells in variety of organs of NOD/SCID mice. Interestingly, pig $CD3^+$ T lymphocytes detected with high level in liver($15.6{\pm}3.7%$), spleen($5.6{\pm}3.0%$), thymus($1.5{\pm}1.3%$), and BM($2.3{\pm}0.9%$), respectively. These data imply that microenvironment of neonate NOD/SCID mice is very efficient for proliferation and differentiation of porcine T cells, and can be useful for the study of T cells development and renogeneic organ transplantation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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