표면강화 라만분광학을 이용하여 단일전자 산화반응으로 형성된 발암성 벤조피렌 유도체가 nucleobase와 반응하여 생성된 첨가 생성물을 분석하였다. 표면강화 라만분광학을 이용하여 아데닌 또는 구아닌과 같이 각기 다른 종류의 nucleobase와 결합하여 형성된 첨가생성물을 구분하여 분석할 수 있었고 또한 nucleobase 분자의 다른 부분에 결합하여 형성된 이성길체를 라만분광스펙트럼을 통하여 구분하여 분석이 가능하였다. N7Ade-BP에 대한 검정곡선의 선형도 범위는 20 picogram/${\mu}l$에서 800 nanogram/${\mu}l$였고, 본 실험 조건하에서의 검출한계는 $20{\mu}l$의 샘플을 이용하고 20 picogram/${\mu}l$였다.
PAH 위해성 평가의 생체지표 개발을 위하여, benzo[a]pyrene을 인체 간암 세포주인 HepG2세포에 처리하여 암 억제 단백질인 p53 및 관련 단백질의 발현 양상에 대하여 연구하였다. HepG2 세포의 생존력은 benzo[a]pyrene을 노출시킨 군에서 농도가 증가할수록 감소하였다. p53과 인산화 p53의 발현 양상은 benzo[a]pyrene 농도 의존적으로 증가하는 경향을 보였으며, 반면에 아세틸화 p53은 benzo[a]pyrene의 농도가 증가할수록 감소하는 경향을 나타내었다. 세포 주기 조절에 관련된 p21 단백질은 화학 물질 처리에 의해서 p53과 마찬가지로 증가하였으나, CdK4와 Rb 단백질의 발현에는 변화가 없었다. 상관분석 결과 Benzo[a]pyrene 노출, 세포 생존력, p53, 인산화 p53, p21이 서로 높은 상관성을 보였다. 본 연구의 결과는 p53 단백질의 축적이 benzo[a]pyrene 독성에 있어 매우 중요한 현상이며, 이는 선택적인 지표와 함께 p53 이 benzo[a]pyrene과 같은 PAH 계열의 물질의 위해성 평가를 위한 민감한 생체 지표로써 개발될 수 있음을 시사한다.
Objectives: This study was performed to observe the toxicological changes caused by a single exposure to benzo[a]pyrene. Methods: Based on the results of a preliminary study, 300 mg/kg was set as the middle dose. A highest dose of 2,000 mg/kg and a lowest dose of 50 mg/kg were selected based on GHS guidelines. Benzo[a]pyrene was orally administered once to female and male SD rats at dose levels of 50, 300, and 2,000 mg/kg(body weight). All animals were monitored daily for clinical signs and mortality over 14 days. Hematological and biochemical values were examined as well. Results: There were neither dead animals nor significant changes in body weights during the experimental period. In addition, no differences were found between the control and treated groups in clinical sign, hematology, serum biochemical, and histopathological analysis. Conclusion: Compared with the control group, we could not detect any toxic alteration in all treated groups. These studies indicate that the acute toxicity of benzo[a]pyrene is relatively low.
포접력을 지닌 2-hydroxypropyl-β-cyclodextrin(β-HPCD)을 비롯한 cyclodextrin계 화합물은 소수성 유기물질의 용해도를 증가시킴으로써 미생물에 의한 분해를 촉진시키나 그 외의 자세한 기작은 알려져 있지 않다. 본 실험에서는 β-HPCD 유무에 따라 고분자 PAHs 분해력을 지닌 Novosphingobium pentaromtivorans US6-1 균주의 pyrene라 benzo[a]pyrene(B[a]P)의 분해정도, 이때의 biomass 변화 및 dioxygenase활성을 측정함으로써 PAHs 생분해과정에서 β-HPCD의 역할을 규명하고자 하였다. 실험구는 균주와 PAHs, β-HPCD의 존재 유무에 따라 8개 조건으로 준비하였으며 각 실험구의 배양기간에 따른 PAHs 분해도와 생체량의 변화를 측정하였다. Pyrene의 경우 β-HPCD가 존재함에 따라 분해도가 증진되는 것이 확인되었으며, 특히 B[a]P의 분해에는 β-HPCD가 필수요소로 작용하였다. 생체량의 변화는 PAHs의 존재 유무에 영향을 받지 않았고 β-HPCD의 존재 유무에 따라 차이를 나타내었다. 또한 US6-1 균주는 β-HPCD가 포함된 MM2 무기영양배지에서 전배양 할 때에 ZoBell 배지에서 전배양하는 경우에 비해 catechol-1,2-dioxygenase 효소활성이 높은 것으로 나타났으나 그 값은 빈영양상태에서 배양한 세포의 효소환성과 큰 차이를 보이지는 않았다. 이상의 결과로 볼 때 β-HPCD는 PAHs의 이용성을 높여주는 동시에 탄소원으로 이용되어 균주의 생체량 증가에 기여함으로써 PAMs의 분해력을 증진시키지만 dioxygenase 효소활성에는 영향을 미치지 않는 것으로 사료된다.
연구목적: 본 연구는 일반인의 비직업적 노출에 대한 혈중 16종의 다환방향족탄화수소(PAHs) 의 농도르 분석하여 PAHs의 백그라운드 노출 농도를 평가하는 것이다. 내용 및 방법: 농촌지역에 거주(비직업적 노출로서 16종 다환방향족탄화수소가 특정한 환경오염을 받지 않은 지역에 거주)하는 156명의 연구 참여자의 혈중 16가지 다환방향족탄화수소 농도의 기하평균치를 간접흡연군, 구운 음식물섭취군과 각대조군을 비교 하였다. 혈중 16종의 다환방향족탄화수소의 농도는 질량분석기를 장착한 가스크로마토그라피법과 헤드스페이스 마이크로고체상 추출법에 의하여 분석하였다. 결과: 연구참여자 중, 간접흡연자들에서 4종의 다환방향족탄화수소 아세나프틸렌(p<0.01), 아세나프텐(p<0.1), 플로렌(p<0.01), 피렌(p=0.05)가 대조군 보다 유의하게 높았다. 또한 구운육류와 생선 섭취군에서는 벤조(a)피렌(p<0.1)이 대조군 보다 유의하게 높았다. 결론: 간접흡연과 구운음식물 섭취는 비직업적 노출에서 다환방향족탄화수소 노출원의 가능성이 높다고 추정된다. 혈중 다환방향족탄화수소는 한국일반인의 비직업적 노출 농도로 사용 가능하다고 생각된다.
최근 내분비계장애물질로 알려진 PAHs 화합물 중 하나인 벤조피렌은 대표적인 PAHs 화합물로 음식을 조리, 가공할 때 식품의 주성분인 탄수화물, 단백질, 지방 등이 분해되어 생성되는 열분해 산물이며 토양, 공기, 물, 식품 등 전 환경매체에서 검출되고 있다. 본 연구에서는 PAHs[benzo(a)anthracene, chrysene, benzo(b)fluoranthene, benzo(k)fluoranthene, benzo(a)pyrene, dibenzo(a,h)anthracene, benzo(g,h,i)perylene, indeno(1,2,3-c,d)pyrene]에 대하여 어류 중 지방의 알칼리 분해시간에 따른 분해효율, 추출 용매에 따른 추출효율, 정제컬럼의 용출량에 따른 정제효율 등을 비교 실험하여 알칼리분해를 이용한 어류 중 PAHs의 전처리방법을 확립하고자 하였다. 균질화된 시료를 알칼리 분해하여 n-hexane으로 추출하고 증류수로 세척한 후 Sep-Pak florisil cartridge로 정제하여 HPLC/FLD(고속액체크로마토그래피/형광검출기) 로 동시 정량 분석하였으며 각각의 PAHs에 대한 회수율은 약 90~106% 수준이었다.
본 연구는 서울에서 유통되는 식품용 융합 환제에 대하여 위해물질인 벤조피렌 등의 PAHs (polycyclic aromatic hydrocarbons) 오염실태를 조사하고 위해도를 평가하였다. 2010~2013년 서울약령시 한약재 판매업소 등에서 31종 93건의 환제를 수집한 후 시료를 추출, 여과, 농축하여 SPE (Sep-pak florisil)로 유출시킨 후 다시 농축하여 액체크로마토그래프로 분석하였다. 분석한 결과 총 8종 PAHs 평균 함량은 $10{\mu}g/kg$ 이하이었고, PAHs 위해성 평가 결과 초과발암위해도는 일상 생활에서의 노출에 의한 것보다 낮았고, 노출안전역(MOEs)은 대부분의 시료가 위해를 무시할 만한 수준으로 안전한 것으로 평가되었다. 향후 의약용 환제와 식품용 환제의 위해물질에 대한 비교 융합연구가 필요하다.
Objectives: This study was carried out to determine $LD_{50}$ of benzo[a]pyrene to decide the possibility to designate them as toxic substance on the Act on the Registration and Evaluation, etc. of Chemical Substances, and to suggest that they should be managed in what level on the Chemical Control Act. Methods: Based on the result of a preliminary study, 300 mg/kg was set as the middle dose. A highest dose of 2,000 mg/kg and a lowest dose of 50 mg/kg were selected based on the OECD TG 423. Benzo[a]pyrene was orally administered once to female and male SD rats at dose levels of 50, 300, 2,000 mg/kg (body weight). All animals were monitored daily for clinical signs and mortality over 14 days. Also testicular spermatid count, motility and etc. were examined as well. Results: Under the condition of this experiment, $LD_{50}$ of benzo[a]pyrene was assumed to be >2,000 mg/kg. In the lesion according to autopsy, there were no specific symptoms in the control and experimental groups. At 2,000 mg/kg, a decrease in the sperm motility was observed. Benzo[a]pyrene should be designated to be toxic substance as the material assumed to be reproduction-toxicity on the Act on the Registration and Evaluation, etc. of Chemicals. Therefore we should abide by legal procedures determined by Chemicals Control Act in treating it. Conclusion: Considering the significant result that sperm motility in the experimental group was inferior to that in the reference group, we suggest that benzo[a]pyrene be designated as a toxic substance.
인삼 분말이 $B({\alpha})P$의 투여로 간 독성이 유발된 마우스에서의 항산화 효소, 글루타치온 및 과산화지질 함량 변화에 미치는 영향으로 살펴보았다. 먼저 인삼 분말의 투여시 $B({\alpha})P$ 투여로 인한 간 조직중의 SOD, catalase 그리고 GSH-Px의 활성은 유의적으로 증가되었다가, 인삼분말의 처리로 이들 활성이 유의적으로 감소하였다. 반면, GST 활성과 간 조직중의 글루타치온 함량은 $B({\alpha})P$ 단독 투여군에서는 감소되었다가 인삼 분말 투여시 유의적인 증가를 보였다. 그러나 cytochrome P-450 활성과 지질과산화물 함량은 $B({\alpha})P$ 투여시 증가되었다가 인삼 분말의 투여시 유의적으로 감소되었다. 이상의 결과로 인삼 분말은 $B({\alpha})P$에 의한 간 손상에 대한 보호효과를 가지는 것으로 사료된다.
In this study, to investigate of safety for Benzo(a)pyrene in medicinal herb, 8 kinds of selected commercial herbal medicines (Rehmanniae Radix, Rehmanniae Radix Preparata, Amomi Tsao-Ko Fructus, Cimicifugae Rhizoma, Cyperi Rhizoma, Magnoliae Cortex, Scutellariae Radix, Scrophulariae Radix) were analysed using the high performance liquid chromatography with fluorescence detector and assessed the health risk. The levels of benzo(a)pyrene were from non-detection to $28.1{\mu}g/kg$, and the average was $3.6{\mu}g/kg$. Based on a nationwide survey of the consumption of medicinal herb by the Korean population, we estimated the potential risk from the ingestion of benzo(a)pyrene. The estimated daily intake of benzo(a)pyrene was 1.6 ng/kg b.w./day for group only know the daily average intake of medicinal herb. The MOE (margin of exposure) of benzo(a)pyrene for estimate of health risk was $1.93{\times}10^5$. Therefore, health risk from benzo(a)pyrene through intake of herbal medicine was considered negligible.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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