• Title/Summary/Keyword: 배배양

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Effects of Storage Temperatures and Periods on the Direct Somatic Embryogenesis in Rehmannia glutinosa Liboschitz and Scrophularia buergeriana Miquel (지황과 현삼에서 배양전 저장 온도와 기간이 직접 체세포배 형성에 미치는 영향)

  • Park, Ju-Hyun;Song, Ji-Sook;Ohk, Hyun-Choong;Lim, Wan-Sang;Chae, Young-Am
    • Korean Journal of Medicinal Crop Science
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    • v.7 no.1
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    • pp.7-10
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    • 1999
  • The effects of storage temperature and periods as pretreatments on direct somatic embryogenesis or shoot development in liquid culture of leaves, stems and petioles of Rehmannia glutinosa and Scrophularia buergeriana were investigated. Proper storage Temperature for Rehmannia glutinosa was $8^{\circ}C$ and the leaf stock could be stored up to 12 weeks. In Scrophularia buergerjana. shoots were developed from the 20 week-stored petiole and stem at $8^{\circ}C$. In general, $8^{\circ}C$ was considered the most effective storage temperature in terms of storage cost.

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Effect of In-Vitro Fertilization of Porcine Matured Oocytes in Different IVM-IVC Culture Media on the Development of the Embryos (미성숙 돼지 난자가 다른 체외성숙.배양에 의한 배 발달률에 미치는 영향)

  • 안미현;홍대욱;석호봉
    • Journal of Embryo Transfer
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    • v.18 no.3
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    • pp.269-274
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    • 2003
  • This experiment was carried out to investigate the effects of different IVM-IVC culture media factors, such as development rates according to the maturation media, collecting times from slaughter to initiation of incubation and with cumulus cells, on in vitro maturation of oocytes collected from 3∼5mm diameter follicles of the swine abattoir The development rates significantly(p<0.05) higher when the oocytes were matured TCM-199 media than NCSU-23 media. In comparing with TCM199 medium in presence of Earle's salts and Hank's salt, there were no significantly differences between each salt balance in cleaved rate and in number of morulae plus blastocyst. Among 1,455 immature oocytes, 999(68.6%) of oocytes were cleaved. The number of development to the morulae and blastocysts were 617(61.8%) include 62 balstocysts(6.2%).

Somatic Embryogenesis and Plant Regeneration in Shoot Apical Meristem Cultures of an African Local Variety Cassava (Manihot esculenta Crantz) (아프리카 재래종 카사바의 경단분열조직 배양에 의한 체세포배발생과 식물체 재분화)

  • MIN, Sung R.;YANG, Seung G.;LIU, Jang R.
    • Korean Journal of Plant Tissue Culture
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    • v.21 no.5
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    • pp.303-308
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    • 1994
  • Shoot apical meristem dome explants from cassava plants (Ghanaian local variety) produced somatic embryos at a frequency of 32% when cultured on MS medium supplemented with 2 mg/L 2,4-D. Somatic embryo segments formed secondary embryos at frequencies of up to 93% when cultured on medium containing 1 mg/L 2,4-D for 2 to 3 weeks. Since the somatic embryos were not capable of converting into plantlets, adventitious shoot were induced from the sliced embryo segments by culturing them on medium containing 0.1 to 5 mg/L BA. After 8 weeks of culture, numerous shoots formed on the segments at frequencies up to 100%. The shoots were rooted and successfully transplanted to potting soil.

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GFP expression in the microspore-derived early embryo through co-culturing with Agrobacterium (Agrobacterium 공동배양을 이용한 고추 소포자 유래 초기 배의 GFP 발현)

  • Jung, Min;In, Dong-Su;Kim, Bong-Kyu;Jang, In-Chang;Park, Eun-Joon;Kim, Moon-Za;Harn, Chee-Hark
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • v.35 no.2
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    • pp.109-114
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    • 2008
  • The aim of this research is to establish the conditions for Agrobacterium-mediated genetic transformation using microspore. The embryo induction from the microspore was examined under several Kanamycin concentration in media, and the induction rate decreased about 4, 8, 10 times when the Kanamycin concentration increased 10, 50, 100 mg/L, respectively. This indicates that the transformation rate would be much lower if the Kanamycin was used for selection marker. In order to apply the GFP gene as a reporter gene for Agrobacterium-mediated genetic transformation, GFP expression from the microspore-mediated embryos was observed using GFP filter under microscope. The GFP expression occurred when the microspore cultured toward the embryo development for 12, 24 and 48 days. The microspore formed a cluster by microspore division from 12 days culture and continuously became a bigger mass. We obtained a total of 8 GFP-expressing embryos suggesting that the transformation of microspore occurred. However, those young embryos were not fully developed. Further study pertinent to culture conditions is required to fulfill the Agrobacterium-mediated genetic transformation using microspore.

Adenylate Cyclase (ACi) 첨가가 돼지 난포란 체외 발달율에 미치는 영향

  • 박진기;이연근;성환후;임기순;이창현;이향흔;장원경;이훈택;정길생
    • Proceedings of the KSAR Conference
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    • 2001.03a
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    • pp.32-32
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    • 2001
  • 본 연구는 돼지 난포란의 체외성숙시 Adenylate cyclase(ACi) 첨가가 돼지 수정란의 배발달에 미치는 효과를 검토하기 위하여 수행하였다. 돼지 난포란은 0.1% PVA, 3.05 mM D-Glucose, 0.91 mM sodium pyruvate, 0.57 mM cysteine, 0.5 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ LH, 0.5 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ FSH 그리고 10 ng/$m\ell$ EGF가 첨가된 TCM-199 배양액에서 ACi를 농도별로 첨가하여 42~44 시간 배양함으로써 체외성숙을 유도하였다. 그리고 ACi가 배발달율에 미치는 효과를 알아보기 위하여 체외수정 medium에 0, 0.1, 1% 첨가한 다음, 체외수정을 유도하고 체외배양을 실시하였다 체외성숙시 22시간 동안 ACi를 0, 0.1, 1, 및 10 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$로 처리한 결과 33.3, 31.5, 34.1, 및 36.0%로 대조구와 처리구간의 통계학적인 유의한 차이는 나타나지 않았다. 그러나 체외성숙시 ACi을 0, 0.01, 0.1, 1.0 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$로 처리한 결과, 25.5%, 33.3, 26.7, 및 25.6%의 배발달율이 확인되어 유의한 ACi의 처리효과가 확인되었다. 이러한 처리효과는 ACi를 0.01%로 첨한 처리구(배발달율, 33.3%)에서 가장 높게 나타났다. 그리고 체외수정시 caffeine과 ACi를 첨가한 실험에서, 1 mM caffeine과 ACi를 0, 1, 10, 20 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$로 첨가한 결과, 대조구(30.4%)에 비해 처리구(40.9, 37.9, 및 43.5%)에서 높은 배발달율을 나타냈다. 0.5 mM caffeine과 ACi를 0, 1, 10, 20 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ 로 첨가시는 대조구(37.8%)와 처리구(36.5, 36.0, 및 36.0%)간의 유의한 차이는 나타나지 않았다. 또한 ACi가 배발달율에 미치는 효과를 알아보기 위하여 체외수정 배양액에 0, 0.1, 1% 첨가한 결과는 Table 1에서 보는 바와 같이, 처리구(30.3와 37.0%)가 대조구(22.6%)보다 통계학적으로 유의하게 높은 배발달율을 나타냈다. 따라서 본 연구의 결과는 체외성숙 또는 체외수정용 배양액 내에 ACi을 첨가함으로써 초기배의 발달을 효과적으로 유도할 수 있을 것이며, 앞으로 이러한 기술을 활용한다면 좀더 효율적으로 형질전환 동물이나 복제동물을 생산하게 될 것으로 사료된다.

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돼지 액상정액의 보존일령에 따른 체외수정율에 미치는 영향

  • 임영순;황지현;최은주;김창회;한경수;정경섭;김상환;이호준;민관식
    • Proceedings of the KSAR Conference
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    • 2004.06a
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    • pp.244-244
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    • 2004
  • 본 실험에서는 돼지 액상정액의 보존일령에 따른 생존율과 활력도를 CASA를 이용하여 조사하고, 이어 IVF 후 전핵 형성율과 배 발생율을 비교하여 액상정액의 보존일령이 돼지 체외수정율에 미치는 영향을 조사하였다. 돼지 난포란을 10% pFF, 0.1 ㎎/㎖ cysteine, 10 IU/㎖ PMSG, 10 IU/㎖ hCG, 10 ng/㎖ EGF가 첨가된 TCM-199 배양액에서 22시간 동안 배양한 후, 성선자극 호르몬이 배제된 배양액에서 추가로 22시간 동안 배양하여 성숙을 유도하였다. 희석제(BTS)로 희석된 액상정액은 17℃에서 보관하였다. (중략)

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Origin of Direct Somatic Embryos from Cultureed Cotyledon Segments of korean Ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) (한국 인삼 (Panax ginseng C.A. Meyer)의 자엽절편 배양으로부터 형성되는 체세포배의 기원)

  • 최용의;소웅영
    • Korean Journal of Plant Tissue Culture
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    • v.21 no.3
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    • pp.177-182
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    • 1994
  • Cotyledon segments of korean ginseng produced somatic embryos when cultured on MS basal medium, whereas plumule or excised axis explants did not. histological examination revealed that the cells in proximal region of cotyledon turned meristematic and densely cytoplasmic was composed of smaller and more densely cytiplasmic cells than the subepidermal cells. however, in the case both epidermis and subepidermal cells were almost the same in size and cytoplasmic density, the embryo originated from multiple cells.

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3-Amino Propane Phosphoric Acid (3-APPA) : A Novel Anti-Aging Substance (3-Amino Propane Phosphoric Acid (3-APPA) : 새로운 피부 노화 억제 물질)

  • 조윤기;변영훈;선보경;황재성;이보섭;김종일
    • Proceedings of the SCSK Conference
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    • 1996.07a
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    • pp.52-67
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    • 1996
  • 새로운 노화방지 물질로 개발한 3-APPA가 노화에 의해 야기되는 여러 변화들, 특히 세포 증식, 유전자 수준 및 단백질 수준에서의 collagen의 생합성 변화, 면역조직화학염색을 이용한 collagen 생합성의 변화등을 세포배양 및 동물실험을 통하여 측정하였다. MTT assay를 이용한 인체 피부 섬유아세포의 증식 실험에서 3-APPA는 무처치군에 비교해서 최고 2배의 섬유아세포 증식 효능을 나타내었으며, $^3$[H]-proline incorporation 방법을 이용한 단층세포 배양 및 3차원 dermal equivalent 섬유아세포 배양에서 무처치군 및 vitamin C 처리군에 비해 최고 1.5배의 collagen 생합성 증가를 나타내었다. 그러나 type I alpha-procollagen mRNA expression에는 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. H&E 염색을 이용한 hairless mice의 피부에 대한 형태학적 변화 및 type I pM procollagen antibody를 이용한 면역조직화학염색에서, 3-APPA는 collagen 생합성을 증가시키는 것으로 나타났다. 이상의 결과에서 3-APPA는 섬유아세포 배양 및 hairless mouse를 이용한 실험에서 피부 섬유아세포 증식을 촉진시키며 collagen 생합성을 증가시켜 피부노화를 억제 할 수 있는 물질임을 밝혔다.

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Comparison of Frequency Embryogenesis through Microspore Culture of Domestic Cultivars in Brassica napus L. (소포자 배양에 의한 반수체 식물유도 효율이 높은 국내 유채 품종 선발)

  • Park, Yoon-Jung;Kim, Kwang-Soo;Jang, Young-Seok;Kim, Chul-Woo;Bang, Jin-Ki
    • KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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    • v.51 no.spc1
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    • pp.237-241
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    • 2006
  • This experiment was carried out comparison with haploid plants productivity by microspore culture among domestic cultivars of Brassica napus L. Isolated microspore from flower buds were cultured on NLN medium supplemented with 13% sucrose, $0.05mg/{\ell}$ BA and $0.5mg/{\ell}$ NAA. Genotype was important factor in haploid embryo productivity 'Tamlayuchae' showed the highest haploid embryo production frequency (176 embryos formed from 1 flower bud). But, 'Hallayuchae' and 'Youngsanyuchae' were not generated embryo even cell division. When suspension culture on NLN liquid medium at 100 rpm, embryos were developed multilobe abnormal embryo cluster. Multilobe abnormal embryos on MS medium basal solid medium were regenerated multiple shoots. Regenerated haploid plant with well developed shoots and roots on MS basal medium were successfully transferred to pots.

Hyaluronic acid 및 Tocopherol 첨가가 돼지 난포란 체외 발달율에 미치는 영향

  • 이향혼;임기순;최선호;이창현;김광식;이연근;박진기;장원경;송해범
    • Proceedings of the KSAR Conference
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    • 2001.03a
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    • pp.27-27
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    • 2001
  • 본 연구는 돼지 난포란의 체외 성숙시 hyaluronic acid (HA) 및 Tocopherol첨가가 돼지 수정란의 배발달에 미치는 효과를 검토하기 위하여 실시하였다. 돼지 난포란은 0.1% PVA, 3.05mM D-Glucose, 0.91mM sodium pyruvate, 0.57mM cysteine, 0.5$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ LH, 0.5$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ FSH and 10ng/$m\ell$ EGF가 첨가된 TCM-199에서 HA와 Tocopherol을 농도별로 첨가하여 42~44시간 배양함으로써 체외성숙을 유도하였다. HA의 효과를 보기 위해 체외성숙시 0.1% HA가 첨가된 처리구에서 배발달율은 25.6%로 대조구 16.7% 보다 높았다.(Table Omitted). 또한 수정시 HA를 0, 0.02, 0.2, 2.0 로 처리한 결과 8.7%, 19.4%, 11.1%, 0%로 대조구(8.7%)에 비해 0.02% 처리구(19.4%)에서 배발달율이 가장 높았다. 수정후 control, TCM-199, TCM-199+0.1% HA가 첨가된 배양액에 washing해주었을 때 발달율은 TCM-199+0.1% HA 첨가구에서 배발달율(35.6%)이 유의적으로 높게 나타났다. Tocopherol을 0, 50, 100, 200mM로 처리한 결과 수정된 난자중 배발달율은 32.1%, 40.0%, 35.7%, 39.6%로 처리구에서 높았으며, 성숙배양 후반기 22h. 동안 Tocopherol 첨가한 후 수정전 HA로 washing한 결과 Tocopherol 무첨가구에서는 차이를 보이지 않았으나, Tocopherol 첨가구에서는 HA처리구에서(19.0%)에서 무처리구보다(14.3%) 높은 결과를 나타내었다. 따라서 배양액내에 HA, Tocopherol를 첨가함으로써 미성숙 난포란의 수정율 및 발달율을 높일수 있을 것으로 생각된다.

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