A new moderate thermophilic bacterial strain DG-22 which produces thermostable xylanase was isolated from a timber yard soil in Kyungju, Korea. On the basis of morphological, biochemical and phylogenetic studies the new isolate was identified as a Paenibacillus species. Production of xylanase in this strain was strongly induced by adding xylan to the growth medium and repressed by glucose or xylose. No cellulase activity was detected. The temperature and pH for optimum activity were 8$0^{\circ}C$ and 5.0-5.5, respectively. The crude xylanase was stable at $60^{\circ}C$ and retained 60% of initial activity after 2h at $70^{\circ}C$. Zymogram analysis of the culture supernatant showed two xylanase active bands with molecular masses of 22 and 30 kDa.
Five strains of the fast-growing endosymbionts were isolated from the nodules of Lotus eorniculatus var. japonicus inhabited in Taejeon. From morphological and physiOlogical characteristics and nodulation test, the isolated strains were identified as Rhizobium loti. Compared to the control plant, both Lotus cornieulatus var. japonieus and Lotus corniculatus seedlings inoculated with the isolated strains. grew normally due to effective root nodule. The reisolated endosymbiont from the induced root nodule was confirmed identical to those of the first isolates by investigating antibiotic resistance and morphological characteristics. Three strains among the isolates. R. loti TUS I. TUS5 and TUS6 produced a ca1cof1uorbinding exopolysaccharide.
Protease producing bacterium, PB16 was isolated from food processing wastewater sludge and paddy field soil samples and selected by the clear zone and enzyme activity test. The isolate was gram negative, rod type and its protease productivity was 6.49 U/ml. As a result of API20NE kit test and 16S rDNA sequencying, the isolated PB16 was identified as Aeromonas hydrophila (99%). The growth rate ($h^{-1}$) was 0.21 in synthetic waste water only and 0.26 in synthetic waste water containing vitamin and mineral using a bioscreen C. Synthetic wastewater removal rate was 59 and 87%, respectively after 1 and 3 day reaction (intial CODcr was 2,472 mg/l).
Possibility of using microcarriers for the growth of a transformed human embryonic kidney cell line 293 was investigated. The cell grew well in a static culture such as T-flasks with medium of DME/F12 (3:1) mixture supplemented with 5% FBS, but it was most difficult to make the cells grow on microcarriers mainly due to the low attachment efficiency and poor spreading at initial stage of the culture. Consequently, 30-50% of the cells were lost upon inoculation into microcarrier suspension and significant fraction of the mirrocarrier became bald. The medium supplemented with the concentrated conditioned medium by hepatoma cell line HpG2 supported the active growth of the cells on microcarrier and the cells showed a very healthy and well spreading morphology. It was probable that some spreading and attachment factors of HpG2 conditioned medium were effective for 293 cells.
The aims of the present studies were to understand the physiolosical and genetic characters of Streptomyces sp. isolated from soil. It revealed that Streptomyces sp. SMF301 had very fast growth rate and produced extracellular protease and heavily sporulated on rich media. It also showed $\beta$-lactamase activity and pigment production. Nonsporulating mutants were isolated after NTG or acriflavin treatment and their characters were compared with the parent strain. It was found that the mutants obtained by acriflavin treatment and ghier characters were compared with the parent strain. It was found that the mutants obtained by acriflavin treatment lost the pigment formation and $\beta$-lactamase production. Protease actibity of the mutant was lowered and the pH optimum was changed toward neutral. It was found that the changes were resulted from the reduction of alkaline protease biosynthesis in the bald mutant. Therefore it is considered that sporulation, pigment formation, $\beta$-lactamase production, and alkaline protease production in Streptomyces sp. might be controlled with a closely related relationship.
A novel proteolytic bacterium was isolated from soil at Yeungnam University, South Korea. The strain, named FBL-1, was rod-shaped with a smooth surface. Biolog and API 50CHB test results revealed that strain FBL-1 was a Bacillus species. Based on 16S rDNA sequencing and chemotaxonomic characterization, the strain was identified as Bacillus subtilis because it had the highest homology with Bacillus subtilis subsp. subtilis NCIB 3610 (99.5%). In liquid culture at 37℃ with shaking at 200 rpm, fructose and yeast extract were found to be the best carbon and nitrogen sources, respectively, for cell growth and protease production. The highest protease activity (451.640 U/ml) was obtained when the strain was cultured in medium containing 20 g/l of fructose and 5 g/l of yeast extract. Although further studies are needed to characterize the protease and enhance its activity, the newly isolated protein-degrading B. subtilis FBL-1 can be applicable for the production of peptides and for the degradation of proteins in various industries.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.22
no.7
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pp.1243-1252
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2000
The differential enhanced degradation of cis- and trans-1,3-D was observed in the previous two studies performed by several researchers. This study was initiated to investigate the involvement of microorganisms in the differential enhanced degradation of the chemicals. As expected, microorganisms were responsible for the enhanced degradation. A mixed bacterial culture capable of degrading 1,3-D was isolated from an enhanced soil sample collected from a site treated with 1,3-D. Similar to the enhanced soil, the mixed culture degraded trans-1,3-D faster than cis-1,3-D. This mixed culture could not utilize cis- and trans-1,3-D as a sole source of carbon for growth. Rather, a variety of second substrates were evaluated to stimulate the differential enhanced degradation of the two isomers. As a result, the mixed culture degraded cis- and trans-1,3-D only in the presence of a suitable second substrate. Therefore, it appeared that the degradation of cis- and trans-1,3-D was a cometabolic process. Second substrates that had the capacity to stimulate the degradation included soil leachate, tryptone, tryptophan, and alanine. Other substrates tested. including soil extract. glucose, yeast extract and indole, failed to stimulate the degradation of the two isomers. The mixed culture was composed of four morphologically distinctive colonies on L-agar plates.
A Gram-negative, alginate lyase-producing bacterium was isolated from the Haeundae Coast, Korea. The isolated strain N7151-6 produced alginate lyase. The optimal temperature and pH for growth were found to be $30^{\circ}C$ and pH 8.0, respectively. This strain can be grown at the NaCl concentration of 0-7% (w/v). Analysis of 16S rDNA sequence and physiological profiling indicated that the strain N7151-6 belonged to Pseudomonas sp. The enzyme alginate lyase produced by Pseudomonas sp. N7151-6 was partially purified by ultrafiltration (MWCO= 30 kDa). The optimum pH and temperature for the activity of the purified enzyme were found to be 7.0 and $30^{\circ}C$, respectively. The enzyme was stable at the pH range of 5.0-9.0 and temperature range of $23-30^{\circ}C$. The total activity of alginate lyase produced was reached about 110 unit/L.
A Gram-negative bacterium capable of degrading thiodiglycol (TDG), main hydrolysis product of sulfur mustard, was isolated from ginseng field in enrichment medium supplemented with TDG as carbon source. The isolate, WS-32, grew optimally at $30-37^{\circ}C$ and pH 6.0-8.0. It was found to be similar to the genus Cupriavi연 on the basis of 165 rRNA sequence, while its biochemical properties were highly homologous to Alcaligenes faecalis. The cell growth of WS-32 strain was slightly inhibited on LB broth by TDG, but the maximum level of its growth was maintained stably in the presence of TDG. After incubation of inoculated LB medium or uninoculated LB medium containing TDG for 2 days, TDG amount of the culture filtrate was analyzed to decrease noticeably by HPLC. TDG and alcohols were also oxidized by cell-free extract of the isolate with maximum activities at pH 8.0 and $45^{\circ}C$.
Spheroplast cell fusions were performed with Flavimonas oryzihabitans degrading aniline and Pseudomonas sp. degrading 4-chlorobiphenyl to develope the new fusant degrading aniline and 4-CBP and its characters were investigated. F. oryzihabitans was induced to antibiotic marker ($Cm^r$ by NTG treatment for the fusants selection. The results of spheroplast formation and regeneration frequencies of the strains treated with lysozyme-EDTA were 99% and 5.0~6.6%, respectively. Fusion products were treated with 40% (v/v) PEG 6000 and fusion frequency was $3.16{\times}10^{-4} $. The DNA content of fusant, F22 was approximately 2-fold compared with parents. The fusant was stable, and showed the mixed biochemical characteristics of the parent strains. F22 was similar to parent for cell growth pattern and degrading capacity on 5 mM aniline but cell growth rate of F22 was 1.5-fold higher than that of the parent on 10mM aniline. However 4-CBP degrading ability of F22 was slightly lower than that of parental strain.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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