• 한국미생물·생명공학회지
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• 제18권1호
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• pp.61-65
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• 1990

Murine hybridoma 세포배양시 lectin 계통의 생산 증진제가 무혈청 배지의 단계적 유입에 의해 약 40mg/l의 단일항체를 생산함으로서 단일항체의 생산성을 증가시킬 수 있음이 확인됐으며, 또한 이 배양공법으로 무혈청 배지에서 연속배양이 불가능한 세포의 배양이 가능했다. 이같은 무혈청 배지의 단계적 유입공법으로 약 28 x $10^{-10}$mg/cells/h의 속도로 단일항체가 생산된 것에 비해, 10 혈청이 포함된 배지로는 연속 배양시 11.1 x $10^{-10}$mg/cells/h 의 속도로 생산됐으며 회분배양의 경우는 4.0 x $10^{-11}$mg/cells/h의 속도로 생산됐다.

• 한국수정란이식학회:학술대회논문집
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• 한국수정란이식학회 2003년도 제3회 발생공학 국제심포지움 및 학술대회
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• pp.138-138
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• 2003

• KSBB Journal
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• 제11권3호
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• pp.288-294
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• 1996

CHO 세포를 0.5%, 1 %. 2%, 3%, 4% 및 5% 놓도의 FBSd를 함유한 MEMa 배지에 $1{\times}10^4cells/\textrm{cm}^2 와 2{\times}10^4cells/\textrm{cm}^2$의 초기 농도로 정치배양하여 세포 성장과 EPO 생산 특성을 조사하였다. 혈청 농도와 접종 농도를 증가시킴에 따라 세포 증식 속도와 최대 세포 농도가 증가하는 경향을 보였으며, 적절한 혈청 농도의 선택이 세포 성장의 최적화에 필 요하다고 할 수 있다. 세포 성장 도중에 무혈청배지로 교환한 결과 세포 성장과 EPO 생산이 증가되었다. 배지를 교환하지 않았을 경우 세포 성장이 최대 ($2.1{\times}10^5cells/\textrm{cm}^2$)에 도달된 후 급격히 세포농도가 감소하는 높은 사멸율을 보이고, EPO의 최대 농도 도 2,380units/mL에 불과하였으나, 무혈청배지로 교환한 배양에서는 세포 성장이 크게 증가하여 $6.2{\times}105cells/$\textrm{cm}^2$의 최대 세포농도와 7,470units/mL 의 EPO 농도를 얻었다. 따라서 CHO 세포 성장과 E EPO 생산과는 상호 연관이 있으며, 세포배양으로 EPO 생산을 극대화하기 위해서는 CHO 세포의 고 농도 배양이 필요하다고 할 수 있다.

• KSBB Journal
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• 제5권1호
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• pp.87-94
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• 1990

본 논문에서는 10% fetal bovine serum(FBS)를 첨가한 RPMI 1640배지에 비하여 간염바이러스 표면항원에 대한 단일클론항체 생산에 있어서 효과적은 무혈청 배지에 낮은 온도의 혈청을 첨가하여 하이브리도마_2_c3.1 세포에서 그 효과를 조사하였다, 세포성장관 단일클론항체 생산을 증가시키기 위하여 기본 무혈청배지와 RPMI 1640 배지성분들의 농도를 균형있게 강화시킨 배지를 2:1(v / v)로 혼합하여 농축배지를 조성하고, 이 배지에 2mg / ml 인혈청 알부민 $5\;{\mu\textrm{g}}\;/\;ml$ insulin, $5\;{\mu\textrm{g}}\;/\;ml$ tran-sferrin, $10\;{\mu\textrm{g}}\;/\;ml$ monoethanolmine 등의 몇가지 무혈청 첨가물들을 첨가하였다. 이 농축 배지에 fetal bovine serum(FBS)과 supplemented bovine calf serum(sBCS)을 첨가하였을때의 세포성장과 단일클론항체 생산을 비교하여 FBS농도를 변화하여 세포성장과 단일클론항체생산의 증가를 시도하였다. 0.5%를 농축배지에 첨가함으로써 세포성장과 단일클론항체생산의 증가를 보았다. 최대 세포농도는 $3.06{\times}10^6$ cells / ml이었으며, 이때 생산된 단일클론항체는 10% FBS배지의 $43.0\;{\mu\textrm{g}}\;/\;ml$ 무혈청배지의 $50\;{\mu\textrm{g}}\;/\;ml$보다 3배이상 높은 $159.7\;{\mu\textrm{g}}\;/\;ml$이 생산되었다.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2003년도 생물공학의 동향(XIII)
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• pp.335-339
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• 2003

본 연구에서는 연골조직으로부터 세포를 분리한 후 10%의 혈청 첨가 배지와 무혈청 배지에서의 세포 성장속도, GAGs 합성 및 Col. II의 발현을 확인하였다. EGF를 첨가한 무혈청 배지를 연골세포의 증식에 매우 효과적이었으나 GAGs 합성 및 Col. II 의 합성을 저해하였다. 또한 무혈청 배지에서 배양한 세포를 차후 신체내로 이식한다면 연골세포의 특성인 Col. II를 재합성할 수 있음을 간접적으로 확인하였다. 이는 무혈청 배지를 이용하여 평판배양 시 짧은 기간 내 연골세포 치료제로서 가능한 세포수를 얻기 위한 모델로서 유용할 것으로 생각된다. 또한 계대배양에 따른 분화 및 형태의 변화 등의 문제점들은 생분해성 지지체와 연계하여 해결할 수 있을 것으로 생각되며, 차후 위의 SFM을 이용한 3D 배양에 대한 연구를 수행할 예정이다.

• KSBB Journal
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• 제8권5호
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• pp.483-487
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• 1993

기존의 무혈청 배지에 첨가하던 BSA/acid를 acid/Pluronic F-68 emulsion으로 대치하여도 세포성장에는 전혀 지장이 없었다. BSA를 제외함으로써 무혈청 배지에 첨가하는 단백질 함량을 최소하할 수 있었고, 이로 인한 세포농도 감소는 없었다. SFLSM은 0.2micron 필터로 여과 멸균하여도 SFLSM의 세포성장효과는 영향을 받지 않는다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제17권5호
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• pp.481-488
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• 1989

최근 단일클론항체의 상업적 이응가치가 증대하면서 그 수요량 또한 급격히 증가, 이를 뒷받침할 수 있는 대량생산 기술이 요구되고 있다. 본 연구에서는 쥐 하이브리도마 Alps 25-3의 대량배양을 위해 우선적으로 무혈청 배지 (serum-free media)의 개발을 시도하였다. 동물세포 배양액 IMDM과 Ham's F-12를 1:1로 혼합한 배지를 기본으로하여 ITES 용액 (insulin 10$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, transferrin 10$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, ethanolamine 10$\mu$M and selenium 30nM)을 첨 가하여 일차적으로 결정한 EBM(enriched basal medium)에 steroid hormones, vltamins, lipid, mineral 및 여러성분들을 각각 첨가하여 혈청과 대치될 수 있는 성분들의 최적농도를 조사하였다. 각 성분들의 개별효과와 함께 그들을 혼합하였을 때의 상호효과를 통해 혈청배지와 거의 동일한 성장을 보이는 무혈청배지 KM3(EBM with BSA 100$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, mineral solution and 0.05% PEG)를 결정할 수 있었으며 이 배지에서의 최고 항체 생성량은 혈청배지의 약 80% 로 나타났다. 또한 무혈청 배지에서 여러 cell line의 성장과 그들의 항체 생성을 조사함으로써 다른 쥐 하이브리도마 세포배양에도 적응시킬 수 있음을 확인할 수 있었다.

• KSBB Journal
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• 제8권1호
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• pp.23-27
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• 1993

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2003년도 생물공학의 동향(XIII)
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• pp.171-173
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• 2003

본 연구에서는 생분해성 고분자 나노입자를 이용하여 부착성 세포의 세포군집 (cell aggregates) 형성을 촉진시켜 무혈청 배지에서 3차원적 부유 배양하는 방법을 개발했다. 생분해성 고분자 나노입자의 사용은 무혈청 배지 부유배양에서 부착성 동물세포인 HEK 293 세포의 세포군집 형성과 세포증식(나노입자를 사용하지 않은 대조군과 비교하여 2배 이상)을 촉진하였다. 일반적으로 무혈청배지 부유배양에 세포를 적응(adaptation)시키는 데에는 시간이 오래 걸리고 많은 비용이 드는데, 이 연구에서 개발된 방법은 이러한 세포적응 공정이 필요없다. 이 배양법은 여러 부착성 동물세포의 산업적 대량배양에 유용하게 사용될 수 있을 것이다.

• KSBB Journal
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• 제8권1호
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• pp.28-35
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• 1993

The serum free medium was developed and used for the suspension culture of mammalian cells. Although there were the problems of the longer lag time and the smaller maximum cell concentration achievable, the higher specific productivity as well as other advantages of the serum free medium can make it a more realistic alternative. The existence of a staggering period in glucose concentration vs. time profile in the batch culture can be a practical indicating signal for performing fed batch culture. The concentration dependence of the effects of the additives in the serum free medium as well as its economic feasibility was also tested.