목적 : 쥐의 콜라겐 유도 관절염에 대한 유근피 추출액의 면역 반응 효과 및 그 기전을 살펴보고자 하였다. 방법 : 유근피 추출액의 면역 반응을 관찰하기 위하여 콜라겐 유도 관절염 쥐가 사용되었다. 실험에 쓰인 쥐 뒷다리의 부종 용적은 volume meter로 측정하였고, lymphocyte 증식, 표1, 표2 및 TNF-${\alpha}$ 레벨은 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolirun bromide(MTT) assay에의해 측정하였다. 활막세포의 cAMP 레벨은 경쟁적 단백 결합검사 (CPBA)를 통하여 측정하였다. 2형 콜라겐에 대한 항체는 효소면역 협착검사법(ELISA)을 반복 사용하여 측정하였다. 결과 : 실험에서 유근피 추출액( 20, 80, 150mg/kg, ig ${\times}$ 7days)의 시술은 면역 반응을 억제하고 콜라겐 유도관절염 쥐의 체중과 면역 기관의 무게를 유지하였다. 콜라겐 유도 관절염 쥐에서 림프구의 증식과 IL-2의 생산은 복막의 대식세포 및 활막세포의 IL-1 , TNF-${\alpha}$와 함께 증가하였고, 유근피 추출액 (20, 80, 150mg/kg, ig ${\times}$ 7days)의 시술은 이러한 변화를 유의성 있게 감소시켰다. 0.5, 2.5, 12.5, 62.5, 125mg/l 농도에서의 유근피 추출액은 활막세포의 cAMP 레벨을 증가시킨데 반해 콜라겐 유도관절염 쥐에서의 시험관 실험결과에서는 감소시켰다. 유근피 추출액은 2형 콜라겐 항체의 농도에 대하여는 효과가 없었다. 결론 : 유근피 추출액은 항염증 작용과 면역조절 작용을 갖고 있고, 활막세포의 G protein-AC-cAMP transmembrane signal transduction 형질 도입 신호에의한 콜라겐 유도관절염 쥐의 치료 효과를 가지고 있는 것으로 여겨진다.
난소의 재형성 과정은 난소 내 여러 조절인자들에 의해 조절되는 성장 및 퇴행 과정을 반복하는 특징을 가지고 있다. 황체는 주기적 성장과 퇴행을 보이며 과립세포의 세포자멸사 (apoptosis)를 통해 황체의 퇴행이 일어나게 된다지. 이러한 세포자멸사 과정은 난소의 정상 생리에 매우 중요하다. ATP 는 자율신경으로부터 세포외 유출을 통해 분비되어 근육 수축, 신경전달체계, 외분비 및 내분비 호르몬의 분비, 면역반응, 염증, 혈소판 응집, 동통 및 심장기능의 조절 등 매우 다양한 생물학적 기능에 영향을 미친다. 이러한 작용은 세포 표변에 존재하는 purinoceptor를 통해 이루어지는 것으로 알려져 있다. ATP는 일반적으로 세포 내에서는 에너지원으로서 작용하나 세포외부에 존재하는 ATP의 경우에는 조절물질로 작용하여 어떤 세포에 있어서는 세포용해를 일으키기도 하며, 어떤 세포에서는 세포자멸사를 유발하기도 한다. 세포 내에 존재하는 ATP는 세포의 주요한 에너지원으로 사용되며 살아있는 세포에서는 세포막을 통과하지 못하는 반면 세포 외에 존재하는 ATP는 말초신경계 혹은 중추신경계에 있어서 매우 중요한 신경전달물질로 작용하고 있다. (중략)
상황버섯은 오랜 역사와 전통이 있는 소재로서 폴리페놀류가 함유되어 있어 항암, 혈중콜레스테롤 저하, 혈압강하 등의 약리효과가 있는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 in vivo 실험을 통해 CPA (Cyclophosphamide)로 유도된 면역저하 마우스 모델에서 상황버섯 투여 농도에 따른 cytokine 활성 효과를 확인하여 상황버섯의 면역 증진 효과를 평가하고, 유효한 농도를 선정하여 시제품을 제작하고자 하였다. 연구결과, 림프기관 장기 무게(흉선, 비장, 악하림프절)와 혈청과 비장의 cytokine이 CPA군(CPA control)에 비해 상황버섯 추출물 투여군에서 유의적으로 증가하였다. 또한 실험을 퉁해 선정한 유효한 농도인 50 mg/kg의 농도로 시제품을 제작하였으며, 상황버섯 특유의 떫은 맛을 감쇄하기 위해 아스코르빈산과 NaHCO3을 첨가하여 최적 배합 비율을 선정하여 음료 200 mL당 상황버섯 추출물 55.6 mg (0.0278%), 아스코르빈산 200 mg (0.1%), NaHCO3 60 mg (0.03%)이 함유 되도록 제작하였다. 본 연구 결과 상황버섯추출물은 CPA로 인해 감소된 사이토카인 분비를 상향 조절함으로써 면역저하 상태를 개선시켜 면역 증진 효과가 있는 것으로 판단된다.
인삼은 외적 유해인자에 대한 비특이적 생체 저항력을 증진시켜주며 물리적, 화학적, 생물학적인 외적 변화에 대해 adaptogen으로서 작용한다. 인삼은 말초혈액 림파구에 의한 면역 인터페론 합성을 촉진시키며, 바이러스에 감염된 흰쥐에 대해 치료효과가 뚜렷하다. 인삼을 Semliki forest virus(SFV) 감염전후 계속 경구투여하면 $34{\~}40\%$의 보호 효과가 있었다. 인삼투여로 세포의 항체생성능이 증가되었으며, sheep의 적혈구 세포에 대한 혈행항체의 역가가 증진되었다. 또한 SFV 항원에 대한 면역성도 높아졌으며, N.K. 세포의 활성도도 크게 증가되었다. Aspergillus Ochraceus ATCC 28706 균주에서 추출한 6-MFA는 인터페론 유도물질 (inducer)로서 잘 알려져 있으며 두 종류의 인터페론, 즉 산성 용액에서 안정한 인터페론과 불안정한 인터페론을 유도시킨다. 인삼은 이들 두 종류의 인터페론 생성을 모두 증진시킨다. 동물실험 결과 6-MFA를 단독 처리하면 SFV 감염에 의해 낮은 보호작용을 보이나, 인삼투여를 병용하면 SFV 감염을 $100{\%}$ 완전히 방지할 수 있었다.
본 연구는 저열량 기능성 탄수화물 소재(저항전분, 식이섬유)를 이용하여 당뇨병 환자의 혈당과 지방대사를 조절하는데 도움을 줄 수 있는 치료식을 개발하기 위해 동물실험과 임상실험을 수행하여 제품의 혈당 및 지방대사 조절, 혈당조절호르몬, 장내기능조절 효과를 검증하였다. 또한 동물실험을 통해 대장에서 염증을 일으키는 것으로 알려진 deoxycholate (DOC)를 식이무게의 2%로 첨가하고, HAS는 일반전분의 50%로 대체시켰을 때 HAS가 DOC의 염증작용에 어떠한 영향을 미치는지 살펴보아 HAS의 장기능 개선에 대한 기능성을 환인해보았고 저항전분이 혈당 및 혈액내 지질조성에 미치는 영향을 살펴보았다. 인체실험 연구결과는 저항 전분을 섭취한 군에서 체중이 유의적으로 감소하였고 비만도를 나타내는 BMI도 감소하여 개발된 선식제품의 체중감소 효과가 입증되었다. 당대사 결과는 동물실험의 경우는 저항전분을 섭취한 군에서 혈당감소를 나타내고 있으나 인체실험의 경우 선식제품 섭취 후 혈당과 인슐린의 농도가 영향을 받지 않았으며 혈액 내 지방성분은 동물실험에서는 혈액내 총지방과 중성지방이 저항전분 섭취시 감소하였고, 인체실험의 경우 저항전분 시제품 섭취 후에 혈액내 중성지방량은 약간 증가하였으나 총지방량과 총콜레스테롤량, LDL-콜레스테롤량은 감소하는 효과를 보여주었다. 또한 면역능력에 대한 지표는 저항전분 시제품 섭취 후 혈액 내 면역글로부린 G가 유의적으로 증가 하였다. 동물실험을 통한 저항전분의 장기능에 관한 연구결과는 저항전분의 한 형태인 HAS의 섭취가 대장길이와 맹장무게를 증가시키며, 맹장에서의 비피더스균의 증식을 가져와 장내 SCFA의 생산을 증가시키고, 맹장내 pH 감소를 가져오며 대장 점막에서의 PGE2의 생산을 감소시켜 장 기능개선의 효과를 나타내고 있다. 그리고 이러한 효과는 DOC섭취에 의한 부작용을 완화시키는 작용을 하였다. 또한 저항전분의 동물실험 겨로가는 혈당을 감소시키며, 혈액지방 수준을 감소시키는 효과를 나타내므로 저항전분의 섭취는 장긴\ulcorner 개선, 혈당유지, 혈액지방수준 개선의 효과가 있는 것으로 보인다.
치아우식증을 예방하기 위한 백신연구를 위하여 주원인균인 Sterptococcus mutans 균체항원과 이 균에서 분리한 glucosyltransferase (GTF)를 항원으로 하고 이에 면역조절기능이 있는 retinoic acid (RA)를 첨가하여 투여경로와 백신조성이 이들 항원에 대한 면역반응에 미치는 영향을 실험하였다. 균체항원(Ingbritt strain)을 마우스의 피하에 Complete Freund's Adjuvant와 함께 투여하여 생산되는 혈청내 응집항체가는 serotype e (LM-7)와는 강한 교차반응을 보였으나 serotype f (OMZ-175)와는 거의 교차반응을 일으키지 않았다. 면역혈청내 항-GTF 및 항-Ag I/II 항체중 항-GTF IgA는 피하로 투여시 전혀 검출되지 않았으나 이에 RA를 첨가하면 다량의 항체 생산을 관찰하였고 그 정도는 경구투여시의 생산량을 능가하였다. GTF를 alum과 함께 투여하여 생산되는 혈청내 항-GTF 항체중 IgM은 피하로 투여시 상당량이 검출되었고 RA를 첨가하면 그 생산이 증가되었으며 경구로 투여시 대조군에 비하여 약간증가를 보였으나 피하투여시의 그것에는 미치지 못하였다. GTF-특이 IgG는 경구투여시는 전혀 검출되지 아니하였고, 피하투여시에만 현저한 증가를 보였으며, RA첨가는 이에 영향을 미치지 못하였다. 항-GTF IgA는 피하로 투여시 전혀 검출되지 아니하였으나 이에 RA를 첨가하면 증가된 항체생산을 관찰하였고 그 정도는 경구투여시의 생산량을 능가하였다. 이상의 실험성적은 GTF에 대한 항체생산은 투여경로와 항원의 종류에 따라 다양한 반응을 나타내며 RA는 이를 백신에 첨가하면 피하경로를 이용하여 면역하더라도 경구투여와 유사한 IgA-매개 면역반응으로 조절시킬 수 있는 가능성을 나타내었다.
동양에서 한약 재료로 사용되는 칡(Pueraria thunbergiana)은 항산화, 항균효과 및 골다공증 치료 등의 다양한 효과가 있는 것으로 밝혀지고 있지만, 생태학적으로는 산림생태계를 파괴하는 종으로 알려져 있다. 본 연구는 칡의 면역학적 효과를 검증하여 유용한 자원으로 활용하는데 목적이 있다. 칡 추출물을 이용하여 생쥐 비장에 있는 면역세포 활성화 작용을 실험한 결과, 칡 추출물은 첫째, 농도 의존적으로 생쥐 비장세포의 증식 유도하였으며 IL-6, TNF-${\alpha}$, IL-2, IFN-${\gamma}$의 cytokine 생산을 증가시켰다. 둘째, 특히 비장세포 중 칡 추출물은 B세포를 자극하여 세포증식 및 IgM의 생산을 증가시켰다. 셋째, 대식세포주의 일산화질소 생산을 유도하였으며, 또 TNF-${\alpha}$, IL-6 및 IL-$1{\beta}$의 cytokine 분비를 유도하였다. 이상의 실험 결과, 본 실험에서 사용한 칡 추출물은 B세포와 대식세포 같은 면역세포의 증식과 각종 사이토카인을 생산을 유도하기 때문에, 면역반응을 조절하는 성분이 포함되어 있는 것으로 생각되며 특히, 아세톤 추출물이 물 추출물에 비하여 효과적이었다. 따라서 추가적인 실험을 통해, 면역반응을 조절하는 성분을 분리 정제하여 그 특성을 명확히 규명한다면, 각종 의약품이나 건강식품을 개발할 수 있는 원재료로서 칡을 이용할 수 있으며, 부수적으로 산림생태계에 복원에도 기여할 수 있을 것으로 사료된다.
Allergy 질환은 지난 십여년 동안 개발도상국을 포함해서 전 세계적으로 증가하고 있다. Allergy 염증 반응은 수지상 세포와 같은 항원제시 세포에 의한 allergy 항원섭취를 시작으로 하여 Th2 면역 반응에 의해서 일어난다. 장내 미생물은 신체의 대사나 생리적 기능을 조절하고, 생애 초기의 면역 체계 성숙과 일생 동안 면역 체계 항상성 및 상피세포 총체성에 기여한다. Bifidobacteria는 Th1/Th2 balance에 strain-specific 한 면역 자극 특성을 가지며, TSLP와 IgE 발현을 억제 시키고 Flg과 FoxP3 발현을 촉진 시켜 allergy를 완화시킨다. 또한 Unmethylated CpG motif ODN은 B 세포와 수지상 세포의 TLR9에 의해 인식 되어 선천성과 적응성 면역 반응을 유도하고, Clostridium butyricum에 의해서 생산된 butyrate는 수지상 세포의 anti-inflammatory 유전자의 발현을 유도하기 위해 GPR109a signaling pathway를 활성화시키고, GPR43 활성화를 통하여 tTreg 세포 proliferation을 직접 자극하거나 HADC 활성을 억제시켜 Foxp3 gene intronic enhancer의 histone H3 acetylation을 통해 naive $CD4^+$ T 세포를 pTreg 세포로 분화시킨다.
본 연구는 전통약재로 주로 사용되는 구절초에서 분리한 다당류(CZPS)가 선천 및 적응면역에서 중추적인 역할을 수행하는 대식세포의 활성화에 미치는 영향에 관하여 관찰하였다. 구절초에서 분리한 다당류를 마우스 유래 대식세포주인 RAW 264.7 cell에 처리하였을 때, iNOS의 발현을 조절하여 NO의 생성이 증가되었으며, 또한 면역활성 물질인 TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$ 및 IL-6 등의 cytokine의 분비능이 증가되었으며, 이러한 면역활성 매개자인 NO 및 cytokine의 증가의 원인에 관한 정확한 면역세포내 신호전달에 관하여 알아본 결과, CZPS 처리는 MAPKs(ERK, p38)의 인산화를 촉진시키며, 이로 인한 전사인자인 NF-${\kappa}B$의 인산화를 증가시켜, 대식세포의 활성화를 유도시키는 것으로 관찰되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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