소 난자 체외성숙에 있어 소 태아혈청 (fetal bovine serum: FBS)첨가시 높은 성숙율을 보이며 핵 이식 후 배 발달율에 있어서도 높다. 하지만 소 태아혈청은 hormone, growth factor, vitamine 그리고 다수의 어떤 잘 알려지지 않은 인자를 포함한 복잡한 배지로 알려져 있으며, 수정란 이식 후 태아의 발육중 및 태어난 직후에 발생되는 송아지에서 나타나는 몇몇 비정상적인 현상들의 원인인 것으로 보고되고 있다. 본 실험은 체외 배양시 소 태아혈청과 이의 대체물질로서 BSA 또는 PVA가 첨가된 배양조건에서의 복제 수정란의 배 발달율을 비교함과 동시에 배반포의 세포수 그리고 세포자연사 (Apoptosis)를 각각의 조건에서 비교함으로써 배발달에 미치는 효과를 알아보기 위하여 실시하였다. 핵이식은 소 체세포를 이용하였으며, 핵 이식 후 CR1aa 기본 배양액으로 FBS, BSA, 그리고 PVA를 첨가하여 5% $CO_2$, 5% $O_2$, 39$^{\circ}C$ 조건하에서 7~8일간 배양하였다.
식물병원균 Botrytis cinerea와 Fusarium oxysporum에 대한 생물학적 방제의 기초자료를 얻기 위하여 살충성 진균 Beauveria bassiana의 식물병원균에 대한 균사성장저해, 포자발아 억제, 균사와 포자의 형태변화 등의 효과를 살펴보았다. 평판배지 상에서 두 식물병원균의 균사생장이 저해되었으며, 저해효과는 배지종류에 따라 달랐는데 B. cinerea의 경우 PDA배지에서 가장 크게 저해되었으며 F. oxysporum의 경우에는 TSA배지에서 가장 크게 저해되었다. B. bassiana는 $25^{\circ}C$에서 6일간 배양했을 때 F. oxysporum에 대한 항균력이 가장 높았으며 동시에 최대의 균체량을 생산하였다. 또한 B. bassiana의 배양여액을 식물병원균에 30% 농도로 첨가하여 배양했을 때 식물병원균의 포자 발아율은 B. cinerea, F. oxysporum에서 각각 30%(control: 88.2%), 10.0%(control: 78.6%)로 낮아졌으며 발아 개시 시간도 4~8시간 지연되었다. 현미경을 통한 미세구조관찰에서는 10%의 B. bassiana배양여액을 첨가했을 때 F. oxysporum의 포자 크기가 1/2~1/3으로 줄어들었으며 균사와 격막의 형태도 비정상적으로 변하여 균사외막과 격막-격막 사이의 구분이 불명확해졌다.
골격근 세포는 미분화 단핵 근원세포로부터 신장과 융합을 거쳐 다핵 횡문근섬유로 분화되어 가며 동시에 근특이 유전자의 발현이 선택적으로 일어난다. 본 연구에서는 계배 배양 근원세포의 분화동안 유전자 발현 조절 양상에 대한 연구를 위해, 계배 근원세포를 72시간 배양한 근섬유로부터 CDNA 라이브러리를 제작하였다. 이 cDNA 라이브러리를 미분화 단핵 근원세포(배양 36시간)와 분화된 다핵 근섬유(배양 72시간)의 poly(A)+ RNA 주형에서 합성된 [32P〕cDNA를 Probe로 사용한 differential plaque hybridization 방법으로 스크리닝하였다 분화된 다핵 근섬유 CDNA probe에 강한게 흔성화되는 CDNA clone을 선별하여 클로닝하였다. 선별한 CDNA clone 들 중 하나는 약 1.3 Kb 크기의 삽입절편을 갖고 있는 것으로 나타났고, 이 CDNA를 probe로 사용하여 northern blotting 한 결과, 이 CDNA엑 대한 유전자는 미분화 단핵 근원세포에서 분화된 다핵 근섬유로 분화가 진행됨에 따라 유전자 산물인 RNA 양이 증가되는 것으로 나타났다 또한 이 1.3 Kb CDNA에 대한 RNA의 크기는 약 2 7 Kb로 확인되었다.
Proceedings of the Korean Society for Applied Microbiology Conference
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1979.10a
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pp.245.1-245
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1979
PDP 전자 계산기를 발효소에 연결하여 자동 제어하의 효모 유가 배양을 수행하였다. 필요한 부대 장치들을 만들어 성공적으로 사용하고 feed-back자동 제어를 수행할 수 있게 발효도중 임의의 시간에 발효 조건을 모니터하도록 하였다. 연속 세포 농도 측정을 위한 플로우ㆍ셀을 자체 제작하여 사용함과 동시에 기포 제거를 따로 할 필요가 없도록 하였다. 측정 시그날을 위한 증푹기도 자체 제작하였던 바 우수한 성능을 보여 주었다. 이 경험으로 다른 모든 측정 장치의 개발과 전자 계산기에의 연결에 값진 경험을 주었다.
BACK, Kyoungwhan;SHIN, Dong Hyun;KIM, Kil Ung;De HAAS, Cynthia R.;CHAPPELL, Joseph;CURTIS Wayne R.
Korean Journal of Plant Tissue Culture
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v.24
no.5
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pp.273-277
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1997
The sesquiterpene cyclase (SC) was induced and its products were accumulated in the culture media of Hyoscyamus muticus hairy roots by addition of Rhizoctonia solani extracts. The cumulative production of solavetivone was nearly doubled by integrated extraction of the products from the media during the 24 h accumulation period. Western blots with monoclonal antibodies against SC show that the enzyme levels are the same for both extracted and non-extracted cultures. SC activities measured in vitro with radioactive substrate are not significantly different. These results suggest that productivity is controlled by substrate availability within the terpenoid pathway, and feedback regulation precedes the branch-point enzyme sesquiterpene cyclase.
The effects of bisphenol-A(BPA), a monomer of plastics used in many consumer products, on vitellogenin(VTG) synthesis were examined in primary hepatocyte culture of olive flounder, Paralichthys olivaceus. The hepatocytes were precultured for 2 days, and then estradiol-$17\beta(10^{-6}M)$ and BPA were simultaneously added to the incubation medium. The hepatocytes were cultured for 6 more days and then spent medium was analyzed by SDS-PAGE. BPA increased the rate of VTG to total protein concentrations in a concentration-dependent way, and a significant difference was obtained at concentrations of $10^{-6}M$ and $10^{-5}M$ (P<0.05). In particular, the rate of VTG to total protein concentrations was 26.36% at $10^{-5}M$ of BPA, and its level did not differ from the control level with $E_2$ alone. $E_2$ and/or BPA-primed VTG synthesis was markedly inhibited to about 80% of the control(with $E_2$) by the addition of tamoxifen($10^{-6}M$) to the incubation medium. Furthermore, In vivo $E_2$-primed VTG synthesis was significantly inhibited by in vitro $E_2$-free incubation of hepatocyte to about 22% of the control (with $E_2$) on Day 6. The effect of reducing was delayed in a BPA concentration-dependent way. These results suggest that BPA induce VTG synthesis by estrogenic activity through estrogen receptor mediated response and prolong VTG synthesis on vitellogenesis in olive flounder.
Chun Jae-Woo;Ma Chae-Woo;Lee Sang-Hyun;Oh Kye-Heon
KSBB Journal
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v.20
no.2
s.91
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pp.116-122
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2005
The feasibility of using bacterial cultures with the ultimate aim for the marine environmental clean-up was explored. The present study reports on the bacterial elimination of nitrogens and phosphorus by strains CK-10 and CK-13 isolated from shrimp farming pond. The strains were identified as genus Bacillus on the basis of BIOLOG test, and designated as Bacillus sp. CK-10 and Bacillus sp. CK-13, respectively. Removal of nitrogens $(NH_4^+,\;NO_2^-,\;or\;NO_3^-)$ or phosphorus $(PO_4^{-3})$ as single N or P source was studied with single cultures under aerobic conditions. Complete elimination of all nitrogens in the concentration range of $100-400{\mu}M$ was achieved in single cultures as well as co-cultures within the given incubation period. Similar results were obtained from the test cultures containing $125-599{\mu}M\;PO_4^{3-}$. Simultaneous removal of all N/P was monitored in the co-cultures. As the results, $400{\mu}M\;NH_4^+\;and\;NO_2^-$ were eliminated within 12hrs and $400{\mu}M\;NO_3^-\;and\;500{\mu}M\;PO_4^{-3}$ were completely disappeared within 36 hrs from the media. The work demonstrated that co-cultures improved the concurrent removal of N/P from the media.
Regulatory T cells (Treg), known as immune-suppressors, may help modulate the immune response. In this study, we investigated the effect of Treg-derived $TGF-{\beta}1$ on pancreatic islet cell function in vitro and in vivo. One hundred eighty IEQ (islet equivalents) of pancreatic islets, the marginal amount to regulate blood glucose level after syngeneic islet transplantation in mouse type 1 diabetes (T1D) model, were co-cultured with $4{\times}10^6$ Treg cells for 48 hours. The changes in $TGF-{\beta}1$, interleukin-6 (IL-6), and insulin secretion levels were measured and analyzed among the Treg-only group, the islet-only group, and the Treg/islet co-cultured group. In the Treg/islet co-cultured group, IL-6 and insulin secretion levels were increased (P<0.0005, P<0.005) and islet viability was improved (P<0.005) compared with the islet-only group. Furthermore, after transplantation, the co-cultured islets regulated blood glucose levels efficiently in the T1D mouse model. These data suggest that Treg could improve islet functions and viability via the $TGF-{\beta}1$ secretion pathway (P<0.05~0.005), thus the use of Treg in islet transplantation should be explored further.
Kim, Yeon-Hee;Heo, Sun-Yeon;Kim, Gun-Do;Nam, Soo-Wan
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.46
no.4
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pp.390-394
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2018
For the coexpression of endoxylanase and endoglucanase genes in yeast Saccharomyces cerevisiae, the genes were separately inserted downstream of the yeast ADH1 promoters, resulting the plasmid pAGX3 (9.83 kb). In the batch culture on YPD medium of the yeast transformant, S. cerevisiae SEY2102/pAGX3, the total activities of the enzymes reached about 7.91 units/ml for endoxylanase and 0.43 units/ml for endoglucanase. In the fed-batch culture with intermittent feeding of yeast extract and glucose, the total activities of 24.9 units/ml for endoxylanase and 0.84 units/ml for endoglucanase were produced which were about 3.1-fold and 2.0-fold increased levels, respectively, compared to those of the batch culture. Most of endoxylanase and endoglucanase activities were found in the extracellular media. This recombinant yeast could be useful for the development of simultaneous saccharification bioprocess of the cellulose and xylan mixture.
The Bimonthly Magazine for Agrochemicals and Plant Protection
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v.10
no.3
s.90
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pp.34-41
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1989
최근에 이르러 농약의 살포량 증가에 따른 여러가지 부작용이 대두되므로 무엇보다 살충제를 적게 살포하면서 해충방제의 효력을 경제적 수준 이상으로 높여보자는데 천적의 역할을 평가하지 않을 수 없게 되는듯 싶다. 따라서 작물 해충에 대한 천적들의 종류와 분포상황, 기존 천적들을 보호 증식하는 문제 또는 병원 미생물 천적을 배양하며 농약과 함께 살포하는 문제 등 다양한 연구가 활발히 진행중에 있다고 본다. 그러나 살충제를 살포하지 않고 순수 생물적 방제 수단으로 작물을 재배할 수 있다면 더없이 이상적인 작물재배가 되겠으나 인구 증가에 따른 식량 증산은 필수적이므로 해충방제에 있어서 천적과 화학적 살충제를 동시에 적용하여 방제할 수 있는 종합방제가 바람직할 것으로 생각되어 간략히 소개해본다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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