본 연구는 돈태반 효소 가수분해물의 면역증진 효과를 확인하고자 Cy를 이용한 면역 저하 모델에서 농도별 돈태반 효소 가수분해물을 투여한 실험군의 주간 체중과 조직 중량, 혈중 면역세포(백혈구, 과립구, 림프구, 중간구) 함량, 혈중 cytokine 및 immunoglobulin 함량, 자연살해세포 활성, 비장 조직 분석을 수행하였다. 체중은 대조군과 비교하여 돈태반 효소 가수분해물을 투여한 실험군 중 중농도 투여군(1.03 mg/kg BW, total nitrogen)과 고농도 투여군(2.07 mg/kg BW, total nitrogen)에서 다소 증가하는 경향을 보였고, 조직 중량은 돈태반 효소 가수분해물을 투여한 실험군이 Cy만을 단독 투여한 대조군에 비해 다소 높았으며, 이 중 고농도 투여군은 비장과 흉선 조직 중량 모두에서 대조군보다 유의적으로 높게 조사되었다. 각 실험군별 비장 조직을 이용한 자연살해세포 활성 분석 결과 정상군에 비해 대조군은 유의하게 감소하였으나 돈태반 효소 가수분해물을 고농도로 투여한 실험군과 양성대조군은 대조군에 비해 증가하는 경향을 보여 정상군과 유사한 수준을 보였다. 일반 혈액학적 분석(CBC analysis)에서 돈태반 효소 가수분해물을 투여한 실험군은 대조군에 비해 백혈구와 과립구, 림프구 및 중간구에서 모두 높은 함량을 보이는 것으로 나타났는데, 특히 고농도 투여군은 백혈구의 경우 양성 대조군인 HemoHIM 투여군과 유사한 수준으로, 과립구와 중간구의 경우 양성대조군보다 더 높은 함량을 보이는 것으로 조사되었다. 혈중 cytokine과 immunoglobulin의 함량을 분석한 결과 돈태반효소 가수분해물을 투여한 실험군에서 혈중 TNF-α와 IL-1β, IL-2, IL-12 및 IgG의 함량을 대조군과 비교하여 유의하게 증가시키거나 증가시키는 경향을 보였다. 또한 조직학적 분석에서 비장조직은 대조군에서 관찰되던 백색수질의 붕괴와 적색수질에서의 세포 응축현상은 돈태반 효소 가수분해물을 투여한 실험군에서 점차 호전되는 경향을 보였다. 이러한 결과를 바탕으로 돈태반효소 가수분해물은 Cy로 인한 세포와 조직 손상을 감소시키고 혈중 면역 관련 인자들의 함량을 증가시켜 면역력을 증진시키는데 긍정적인 영향을 미치는 것으로 판단되며, 추후 이를 활용한 건강 기능성 개발 및 의약품 개발에 따른 활용가치가 매우 높을 것으로 생각된다.
본 연구의 목적은 간 손상을 유발시킨 백서에서 돈태반 가수분해물의 경구 투여가 간 기능 개선에 효과가 있는지를 조사하는 것이다. 사염화탄소를 피하주사하여 간 손상을 유발한 백서를 4군으로 나누어 DMSO(음성대조군), 저용량과 고용량(500과 1000 mg/kg 체중) 돈태반 가수분해물, silymarin (80 mg/kg 체중; 양성대조군)을 3주간 경구 투여하였다. 정상대조군은 사염화탄소 대신 용매인 옥수수 기름만을 피하주사하였다. 3주 후에 간과 지라의 질량은 음성대조군에 비해 농도 의존적으로 돈태반 가수분해물과 silymarin 투여군이 더 높았다(p<0.05). 제거율을 계산하여 간의 기능을 나타내는 bromosulfalein (BSP)를 주입하였을 때 간에서의 제거율은 음성대조군에 비해 돈태반 가수분해물의 복용량에 비례해서 증가하였고, 특히 고용량 돈태반투여군은 silymarin군과 유사한 값을 나타내었다. 이 결과 혈청내 BSP 농도는 돈태반투여군과 silymarin군에 비해 음성대조군에서 더 낮았다. 모든 군에서 간 기능의 지표인 혈청 AST와 ALT의 농도는 시간이 지남에 따라 감소하였는데, 돈태반 가수분해물과 silymarin 투여는 음성대조군에 비해 큰 폭으로 감소하였다. 간과 혈청내 중성지방과 콜레스테롤 농도 그리고 간세포내의 지질 과산화물과 간 조직형태의 변형도 돈태반 가수분해물의 농도에 비례해서 감소하였고, 고용량 돈태반군은 silymarin군 만큼 감소하였다. 결과적으로 사염화탄소에 의해서 간 손상을 유발시킨 백서에서 고용량의 돈태반 가수분해물 투여가 간의 손상을 억제하는 효과가 있다고 결론지을 수 있다.
돈 태반의 화장품소재로서의 응용가능성을 조사하기 위해 알칼리 가수분해, 효소처리 및 산처리 가수분해 방법을 이용하여 추출물을 얻었다. 돈 태반 추출물의 중금속함량을 측정한 결과 납, 비소, 수은 등이 매우 낮아서 화장품소재로서 적절하였다. 화장품소재의 안전성시험(MTT assay) 결과 돈 태반 추출물은 모두 $50{\mu}g/ml$의 농도에서 80% 이상의 세포생존율을 보여주어서 독성이 비교적 낮은 것으로 나타났다. DPPH free radical scavenging assay를 사용한 항산화시험 결과, $50{\mu}g/ml$의 농도에서 pH9로 알칼리 처리한 경우가 항산화율이 63%로 가장 높았다. Tyrosinase 활성저해시험을 사용한 미백효과 측정 결과 $50{\mu}g/ml$의 농도에서 알칼리처리한 추출물의 효과가 30% 정도의 tyrosinase 억제효과를 보여주어서 가장 우수하였지만, 대조군인 arbutin이나 비타민 C에 비해 그 효과가 다소 낮았다. Elastase 활성억제시험을 이용한 주름개선 효과 측정결과 $50{\mu}g/ml$의 농도에서 5가지의 처리법에서 모두 20~30%의 elastase 저해활성을 보여주어서, 대조군보다 우수하였으며, 특히 효소처리한 추출물의 효과가 가장 우수하였다. 돈 태반 추출물 1%를 함유한 스킨제형을 제조하여 온도, 시간에 따른 안정성 시험결과, 안정성 역시 매우 우수하였다. 따라서 돈 태반 추출물은 주름개선 기능성 화장품소재로서의 가능성이 높음을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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