• 제목/요약/키워드: 독성시험 방법

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화재로 인한 HCN 가스에 노출된 마우스의 병리학적 관찰 및 단세포 전기영동법을 사용한 DNA 변성 추적에 관한 연구 (A Study on DNA Degeneration by Comet Assay & Pathological Observation for Mouse Which were Exposed HCN Gases from Fire)

  • 조남욱;오은하;황성규
    • 한국가스학회지
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    • 제16권6호
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    • pp.7-16
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    • 2012
  • 화재시 당면할 수 있는 위험성의 여러 인자 가운데 연소 독성 영향은 피난 및 최종 생존에 중요한 영향을 미치고 있다. 화재 독성에 지금까지 대한 대부분의 연구는 치사 측면에 국한되어 왔다. 이에 본 연구에서는 대표적인 질식성 가스인 HCN을 대상으로 가스유해성시험방법(KS F 2271)을 통하여 실험동물(흰쥐)에 직접 독성가스를 흡입시킨 후 평균행동정지시간을 측정하고, 이들 실험동물군의 내부 장기 변화, 혈액학 분석 및 단세포전기영동분석을 통해 연소 독성가스가 생체에 미치는 영향을 정량적으로 분석하고자 하였으며, 기존 가스유해성시험에서 확인할 수 없었던 접근(병리검사, 혈액검사, 혈액생화학검사, 단세포전기영동분석)을 통해 연소 독성학 분야의 생물학적 위험도를 측정하고자 하였다.

2년 장기 발암성 검색법의 이슈 (Issues in 2-year Long-term in vivo Carcinogenicity Assay)

  • 손우찬;김배환;장동덕;한범석;김종춘;이제봉;신진섭;김형진
    • 농약과학회지
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    • 제8권4호
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    • pp.239-254
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    • 2004
  • 2년 발암성 독성시험의 실시와 평가에 대해서는 많은 논란이 있었다. 2년 발암성 시험의 유용성에 대한 많은 비판에도 불구하고 설치류를 이용한 발암성 시험은 사람의 발암성을 예측 할 수 있는 유일한 평가 시스템으로 인식되어 있으며, 아직 이를 대체할 만한 평가 방법은 없다고 할 수도 있다. 그간 규제기관과 학계에서는 다양한 발암성 평가모델을 제시해 왔지만 이런 시험 모델들이 과학적 타당성과 검증된 데이터에 근거하는지에 대해서는 논란이 있다. 2년 설치류 발암성 시험에 제기되는 문제들 즉, 종 및 품종의 선택, 용량설정, 시험기간, 군당 동물의 수, 배경병변, 검사항목, 시험 종료시 측정항목, 병리의 피어리뷰, 통계, 대체시험 모델, 종양의 평가, 그리고 위해성 평가 등에 대하여 검토하였다.

소아장염을 유발하는 한국형 아데노바이러스들의 지놈형별 (Genome Type Analysis of Human Adenoviruses Associated with Pediatric Gastroenteritis in Korea)

  • 김희진;양재명;김경희
    • 대한바이러스학회지
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    • 제26권1호
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    • pp.23-30
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    • 1996
  • 대략 36,000 base pairs (bp)의 두 가닥짜리 DNA를 지놈으로 가진 사람 아데노바이러스 (Ad)는 DNA 상동성(相同性) 및 생물학적/생화학적 성격이 특이한 49개의 혈청형이 알려져 있는데, 이들 대부분의 Ad가 영유아군 및 면역능이 저하된 성인에서 치사적 결과를 초래할 수 있다. Ad의 세포향성(向性)(tropism)은 매우 다양하여 종류에 따라 상기도 감염, 각결막염, 영유아 장염등을 유발하는데 최근 Ad의 다양한 병원성에 대한 원인을 분자생물학적 수준에서 규명하려는 노력의 일환으로 지역에 따라 주되게 출현하는 Ad형 규명이 활발히 이루어지고 있다. Ad 동정/확인은 표면을 이루고 있는 group 공통항원인 hexon 단백질을 탐지하는 효소면역 측정법 (EIA)에 의하며, Ad형별은 Ad fiber의 세포독성 중화시험에의 한다. 그러나, 세포독성 중화시험이 엄청난 노동력 및 시간을 요구하면서도 민감도/특이도가 만족스럽지 못하여 이를 개선하기 위하여 검체 또는 세포배양에서 Ad DNA를 추출하여 제한효소 절단형태를 비교하는 방법이 개발되었는데 이는 세포배양에 잘 자라지 않는 바이러스주의 형별뿐만 아니라 지역 분리주들의 지놈 변형주를 관찰하는 분자생물학적/분자역학적 연구에도 도움이 되고 있다. 국내에는 Ad와 관련된 소아장염의 빈도가 rotavirus에 의한 것 다음으로 빈번한데도 Ad40/41외에 주되게 출현하는 장내 Ad형들이 전혀 규명된 바 없고, 한국형 Ad들의 지놈형태가 전혀 보고된 바가 없다. 또한 세계적으로 Ad형별 조사지역이 늘어감에 따라 유아장염과 연관된 Ad 역시 Ad40, 41이 외의 형들이 Ad40, 41을 능가하는 것으로 보고되고 있는 지역도 있으나 국내에서는 Ad40, 41이외의 형들은 그 역학적 중요도가 전혀 알려져 있지 않다. 이로서 본 연구의 목적은 Ad주들에 특이 중화항체를 이용한 세포독성 중화시험과 Ad DNA 절단법을 적용하여 한국형 장내 Ad주들의 형별을 처음으로 시도함과 동시에 1989-1991사이 출현한 Ad들의 유전적 변형을 관찰하려는 것이었다. 두 방법 모두 사용하였을 때 주되게 출현하는 장내 Ad형들은 Ad4l, Ad2, Ad7, Ad5, 및 Ad40이었다. Ad40/41-양성 검체를 제외한 Ad hexon-EIA양성들의 77.5%를 형별 할 수 있었던 Ad DNA의 제한효소 절단방법은 형들간의 교차중화로 특이성이 낮았던 중화방법 (47.5%)보다 매우 효율적이어서 두 가지 방법을 함께 적응하였을 때는 40주중의 81.5%인 35주를 형별 할 수 있었다. 또한Ad DNA 제한 효소 절단방법은 Ad7 변이주 (Ad7b)도 탐지 할 수 있었다.

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감마선조사 한약의 방사선방호 효능 안정성 (Stability in Effects of ${\gamma}$-Irradiated Chinese Medicinal Prescriptions on Protection of Mice from Radiation)

  • 양정아;김성호;김세라;유영법;조성기
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제29권3호
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    • pp.506-512
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    • 2000
  • 건조 농산물을 비롯한 식품에 대한 방사선 조사가 허가, 시행되고 있으며, 그 적용 범위도 확대되고 있다. 이에 따라 건조 생약재의 위생화의 대체방법으로 방사선 조사 기술의 적용이 산업계로부터 요구되고 있다. 본 연구는 감마선 조사 생약재의 효능 변화 유무를 확인하기 위한 일환으로 수행되었다. 저자 등은 사물탕, 보중익기탕 및 삼령백출산 등이 방사선 방호 효과를 보이는 것으로 이미 보고한 바 있다. 본 실험에서는 감마선 조사(10 kGy)한 이들 한약제 각각의 방사선 방호 효과를 비조사 시료와 비교 평가하였다. 효과평가를 위하여 방사선 조사 마우스에서 소장움 생존시험, 내재성 비장집락 형성시험 및 apoptosis 측정을 시행하였다. 각 한약제의 감마선 조사 시료는 3가지 시험 모두에서 비조사 시료와 유사한 효과를 나타내었으며(p<0.05), 생체내 독성도 나타내지 않았다. 이는 생약재의 여러 가지 고유 효능 중 일부의 안정성으르 확인한 것으로 생각되며, 이 결과로 미루어 보아 감마선 조사 생약재의 효능 안정성은 한의학적 고유의 효능 비교 평가를 통하여 확인될 수 있을 것으로 사료된다. 한편, 저자 등은 감마선 조사 생약재의 유효성분 안정성 및 유전 독성학적 안전성을 확인하여 보고한 바 있다. 이들 결과를 토대로 향후 감마선 조사 행약재의 고유 효능의 안정성에 관한 체계적인 연구결과를 얻는다면 생약재의 위생화 수단으로 감마선 조사기술의 이용이 실용화될 수 있을 것으로 사료된다.

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제 1상 임상시험에서 멈춤 규칙을 이용한 수정된 최대허용용량 추정법 (Adjusted maximum tolerated dose estimation by stopping rule in phaseⅠclinical trial)

  • 박주희;김동재
    • Journal of the Korean Data and Information Science Society
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    • 제23권6호
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    • pp.1085-1091
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    • 2012
  • 제 1상 임상시험의 주목적은 신약 후보 물질의 독성을 평가하여 부작용 및 안전하게 투여할 수 있는 약물의 적정한 용량인 최대허용용량의 추정이다. 기존에 최대허용용량을 추정하는 방법에는 표준방법 (Storer, 1989; Korn 등, 1994) 그리고 NM방법 (Lee와 Kim, 2012) 등이 있다. 본 연구에서는 많은 피험자들이 낮은 용량에 많이 할당되는 점을 보완하고 기존의 최대허용용량 추정법보다 적은 수의 피험자로 실험하기 위해서 기존 최대허용용량 추정법을 수정한 멈춤 규칙을 적용시킨 추정법을 제안하였다. 기존의 방법들과 새롭게 제시한 방법을 모의실험을 통하여 비교하였다.

파스콘 트로프의 연기유독성에 관한 연구 (A Study on the Toxic Gases and Smoke Hazard of PASCON Trough)

  • 이창우;현성호;최돈묵
    • 한국화재소방학회논문지
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    • 제20권2호
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    • pp.1-7
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    • 2006
  • 본 연구는 파스콘 트로프의 화재시 발생되는 연기의 유독성 평가를 위해 KS F 2271에 의한 연기유해성 시험 및 NES 713방법에 의해 연소가스를 분석하고, 독성지수를 확인해 봄으로서 연소시 인체에 미치는 영향을 간접적으로 확인해 보고자 한다. 실험결과 파스콘 트로프는 KS F 2271인 건축물의 내장재료 및 구조의 난연성 시험기준에 적합한 것을 확인하였다. NES 713 방법에 의한 파스콘 제품에서 발생하는 연소가스는 이산화탄소와 일산화탄소가 전부임을 알 수 있으며, 연소가스의 독성지수는 0.944로 나타났다. 이러한 수치는 제품의 연소시 발생되는 연소가스를 30분 이상 노출되어야 위험한 농도에 이룰 수 있다는 것을 의미한다. 난연성능 요구시 연기유독성 평가나 연기의 발생량을 규제하지 않고 있는 국내의 실정에 비추어 볼 때 파스콘 제품의 연소가스 독성지수는 비교적 낮은 수치이다.

Sialic Acid를 지표성분으로 하는 유청가수분해단백분말의 기능성식품 개발연구 - I. 효소분리로 7% Siailc Acid가 표준적으로 함유된 유청가수분해단백분말(7%)의 랫드를 이용한 90일 반복경구투여 독성시험 평가 연구 - (Development and Research into Functional Foods from Hydrolyzed Whey Protein Powder with Sialic Acid as Its Index Component - I. Repeated 90-day Oral Administration Toxicity Test using Rats Administered Hydrolyzed Whey Protein Powder containing Normal Concentration of Sialic Acid (7%) with Enzyme Separation Method -)

  • 노혜지;조향현;김희경
    • Journal of Dairy Science and Biotechnology
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    • 제34권2호
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    • pp.99-116
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    • 2016
  • 본 시험은 sialic acid가 7%를 함유하도록 제조한 유청가수분해단백분말제제(whey protein of hydrolysis)의 기능성 식품원료로 개발을 위한 동물안전성을 평가함에 연구목표를 두었다. GMP를 원료로 제조한 시험물질은 sialic acid 7%(v/v)와 원료인 GMP 가수분해 단백질이 93%로 구성되어 있었다(시험명: 7%-GNANA). 시험물질의 독성 유무는 한국식품의약안전청(KFDA, 2014)과 OECD(2008)의 의약품 등의 독성시험 기준에 따라 실시하였다. 평가방법으로서, 시험물질의 투여용량을 0, 1,250, 2,500 및 5,000 mg/kg/day로 하여 SPF Sprague-Dawley 계열 암수 랫드에 90일 동안 반복경구투여하였을 때 나타나는 독성 여부를 평가하였다. 평가항목으로서는 사망률, 일반증상관찰, 체중 변화, 사료 섭취량 측정, 안검사, 요검사, 혈액학적 및 혈액생화학적 검사, 부검 시 장기의 중량측정, 부검 시 육안적 검사 및 조직병리학적 검사 등을 평가하였다. 90일 반복경구투여 실험결과로서, 시험물질투여 및 관찰기간 동안 사망동물은 발생하지 않았다. 또한 일반증상, 체중 변화, 사료섭취량, 안과학적 검사, 요검사 그리고 혈액학적 및 혈액이화학적 이상 및 혈액응고검사에서 대조군 대비 특이한 변화는 관찰되지 않았다(p<0.05). 부검 및 병리조직학적 평가 결과, 암수 모두에서 시험물질-유래 중요한 변화 없이 시험물질-유래 경미한 변화(non-adverse effect)만인 5,000 mg/kg/day에서 확인되었다. Weight-based classification(독성 강도에 따른 분류)을 적용한 최종 독성평가 결과, 수컷의 경우 NOEL(No Observed Effect Level)은 5,000 mg/kg/day 그리고 암컷의 경우는 NOAEL(No Observed Adverse Effect Level)은 5,000 mg/kg/day로 최종 확인되었다. 따라서, 암수 모두에서 시험물질의 NOAEL은 투여최대용량인 5,000 mg/kg/day로 확인되었다. 결론적으로, GMP를 원료로 하여 제조한 7%-GNANA(유청가수분해단백분말)는 투여가능 최대용량에서도 독성이 없는 안전한 천연물이라는 것을 확인하였고, 의약품이나 기능성 식품으로서의 개발 가능성을 확인하였다.

광감작성 시험에서의 동물대체 시험법 (Invirto alternatives to photosensitization Test)

  • 이호;남기택;고재숙;박원재
    • 대한화장품학회지
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    • 제22권1호
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    • pp.84-101
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    • 1996
  • 동물시험을 최소화 하고, 동물시험에 사용되는 노력과 비용을 줄이기 위해 동일한 동물에서 광독성과 광알러지성을 함께 보는 새로운 방법을 제안하고, in vitro alternatives로서 photostability와 spectrophotometric carbonyl assay의 유용성을 검토하였다. Modified photosensitization model에서는 Ichikawa 방법과는 달리 동물수, 휴식 기간, 첩포 횟수를 단순히하고 폐쇄 첩포를 추가하였다. 방법의 유용성을 보기 위해 Benzocaine, 6-methyl coumarine을 Ichikawa 방법 및 본 시험 방법으로 결과를 비교한 결과 macroscopic, histologic examination에서 비슷한 결과를 얻었다. Photostability 시험에서는 pbotoreactive agent 들이 모두 20%이상의 흡광도 감소를 보여 pbotosensitization potential을 측정하기 위한 전 단계 실험으로서의 가능성을 보여주었고, spectrophotometric carbonyl assay에서는 salmonella를 이용한 광독성 실험에서는 나타나지 않았던 저농도의 Amthracene, Hematoporphyrin에서 조차도 phtotoxic prtential을 보여주어 in vitro alternatives로서의 가능성을 보여주었다.

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세포독성 자료를 이용한 분류 알고리즘 성능 비교 (Comparison of the performance of classification algorithms using cytotoxicity data)

  • 윤여창;정의배;조나래;주수인;이성덕
    • 응용통계연구
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    • 제31권3호
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    • pp.417-426
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    • 2018
  • 최근 동물실험의 대체방법 중 하나로 쥐의 줄기세포 유래 배상체를 이용하여 독성을 시험하는 방법이 개발되었다. 이는 동물에 직접 약물을 주입하는 것이 아닌 배상체 세포에 약물을 투입하여 세포의 변화에 따른 측정값들을 얻는 방법이다. 본 연구에서는 다범주 세포독성 자료를 이용해 통계적 기법인 판별분석(discriminant analysis)과 머신러닝 기법인 서포트 벡터 머신(support vector machine), 인공신경망(artificial neural network), k-인접이웃분류(k-nearest neighbor)의 성능을 비교하였다. 알고리즘의 성능은 분류 정확도(accuracy)와 가중카파계수(weighted Cohen's kappa coefficient)로 비교하였다.

STUDIES ON CYTOTOXICITY AND ANTITUMOR ACTIVITY OF KOREAN PHARMACEUTICAL HERBS

  • Ryeom, Kon;Lee, Young-Kee;Shin, Suck-Woo;Jung, Byung-Ki
    • 한국응용약물학회:학술대회논문집
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    • 한국응용약물학회 1995년도 춘계학술대회
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    • pp.62-62
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    • 1995
  • 한국산 천연자원중 한방이나 민간요법에서 항종양제로 빈번히 사용되어온 생약들 중에서 103종을 선정하여 이들 성분들을 추출하고 시험관내에서 항종양성이 우수하고 정상세포에 손상을 적게 주는 생약 6종을 선별하여 암세포주에 대한 독성능 (in vitro)과 항종양성 면역감시기구(in vivo)및 LD$_{50}$등을 측정하여 항종양제로의 신약개발을 목적으로 수행하였다. 방법: 선별된 6종의 생약유효성분을 METHANOL로 추출하여 조추출물을 얻었으며 이물질들을 순차적으로 각각의 유기용매로 추출, column chromatography법으로 분획하였으며 분획분에 대한 암세포독성능은 MTT colorimetric 검정법을 이용하여 IC$_{50}$값을 구하였다. 면역감시기구 측정방범으로는 Balb/c mouae암,수 각 10수씩에 P388암세포주를 접종한군과 접종하지 않은 실험군에 생약추출분획물 8.6mg/0.2ml씩 20일간 매일 경구 투여시키고 대조군에는 생리식염수 0.2ml씩을 매일 경구 투여시켜 NK cell의 활성 MIF Recombinant IL-2로 유도시킨 NK cell활성능, chemotaxis등을 측정하였다. 생체내 항종양능 시험은 tumor panel system에 따라 mouse leukemia cell을 사용하여 측정하였다. 각분획성분의 투여용량은 실험동물에서 독성실험결과로 LD$_{50}$량을 구해 항암효과 평가시에 Maximum dose로 하였고 최고용량을 기준으로 일정한 공비를 적응하여 3단계의 투여량을 설정하였다. (중략)

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