This study was aimed to observe the direct and Iymphokine-activated cell mediated cytotoxic effects against Trichomenas waginalis by mouse peritoneal macrophages. Cytotoxicity was measured as release of 3H-thymidine from prelabeled protozoa, and tested in U-bottom microtiter plates. A 0.1 ml suspension of labeled protozoa (2{\times}10^5/ml$) was placed in each well, followed by 0.1 ml of a suspension containing increasing numbers of peritoneal cells. After a 24 hr incubation at $37^{\circ}C$, 0.1ml of the supernatant was collected and counted in liquid scintillation counter. Mouse peritoneal macrophages had appreciable level of spontaneous cytotoxicity against T. maginalis at the effector to target cell ratios from 5 : 1 to 50 : 1, Treatment of macrophages with Iymphokine, produced by PHA-stimulated spleen cells, increased the cytotoxicity in comparison with resident macrophages against T. vaginalis. The degree of macrophage activation for the killing was not dependent upon the Iymphokine concentration. Peritoneal cells adherent to plastic displayed significant levels of cytotoxicity against T. vaginalis. This study indicates that mouse peritoneal macrophages are spontaneously cytotoxic for T. waginalis and Iymphokine increases the cytotoxicity by activating macrophages to kill T. vaginalis.
The purpose of this study is to determine whether nitric oxide is involved in the extracellular killing of Trichomoncs uasinalis by mouse (BALB/c) peritoneal macrophages and RAW264.7 cells activated with LPS or rIFN-γ and also to observe the effects of various chemicals which affect the production of reactive nitrogen intermediates (RNl) in the cytotoxicity against T. vnginnlis. The cytotoxicity was measured by counting the release of (3H)-thymidine from labelled protozoa and NOa was assayed by Griess reaction. Nemonomethyl-L-arginine (L-NMHA), Nenitro-L-arginine methyl ester (NAME) and arginase inhibited cytotoxicity to T. vaginnlis and nitrite production by activated mouse perioneal macrophagrs and RAW 264.7 cells. The addition of excess L-arginine competitively restored trichomonacidal activity of macrophages. Exogenous addition of FeSO4 inhibited cytotoxicity to T. vaginaLis and nitric products of macrophages. From above results, it is assumed that nitric oxide plays an important role in the host defense mechanism of macrophages against T ucfinalis.
치주질환 발생시의 대식세포의 형태적 변화 및 기능적인 상관관계를 연구하고저 성견 5마리를 사용 실험하였다. 실험동물을 전신마취한 후 상하악 우측 제 1 및 제 2 소구치의 치경부에 1.3mm굵기의 wire를 4주간 결찰하여 인위적으로 치주염을 유발시켜 실험적으로 하였고, 동일동물의 좌측 제 1 및 제 2 소구치를 대조군으로 하였다. 실험군 및 대조군의 치아협측치은을 0.5 0.5 1mm의 형태로 절제하여 전자현미경적 관찰을 위한 통법의 조직처리를 한 다음 관찰하였다. 그 관찰 결과를 보면 다음과 같았다.
1. 실첨군의 치은의 고유층에 탐식성 돌기를 가진 많은 대식세포들이 출현하였다.
2. 변성된 교원 섬유군 인접부위에 phagocytic vesicle을 가진 대식세포들의 세포질내에 지방과립 및 잔존물을 볼 수 있었다. 한편 RER 및 Golgi complex는 매우 적었다.
3. 세포막은 그 기능상으로 많은 ruffles or folds를 나타냈으며 이 물질을 포식하는 양식을 뛰기도 하였다. pinocytotic activity를 띄는 대식세포들도 보였다.
4. 신생섬유아세포 주위에 밀접한 관계를 띄고 대식세포가 나타났으며 상호 유사하다. 대식세포에는 많은 residual body가 나타났고 RER은 매우 적었다.
The phagocytosis and chemotaxis of murine macrophages after treated with saponin fractions are investigated. Phagocytic appearance against yeast was photographed by dying with Wright-Giemsa. Phagocytic activity of peritoneal macrophage was invreased in diol saponin treatment by 48% and was decreased in total saponin treatment by 35%. The ingestion of alveolar macrophage was increased by 50% maximally. Peritoneal chemotactic activity was shown in 17% increases and only diol saponin had effect in alveolar macrophage by 16%. According to SDS-PAGE method the contents of actin did not show any alterations.
Effects of wheat arabinoxylan on mouse spleen lymphocytes and peritoneal macrophages were examined in vitro. Among three wheat arabinoxylans (A1: low MW, A2: medium MW, A3: high MW), A3$(50{\sim}100\;{\mu}g/mL)$ increased the viability of spleen lymphocytes up to $114{\sim}125%$ of the control. A1 and A3 $(20\;{\mu}g/mL)$ increased the viability of lipopolysaccharide-treated lymphocytes synergistically. Viability of murine peritoneal macrophages treated with wheat arabinoxylans $(10{\sim}100{\mu}g/mL)$ was increased up to $135{\sim}175%$ of the control. The cytotoxic activity of macrophages against murine lymphocytic leukemic cell increased in the presence of wheat arabinoxylan. Phagocytic index of macrophages treated with wheat arabinozylans $(20\;{\mu}g/mL)$ significantly increased $197{\sim}232%$ compared with the control, and lysosomal phosphatase and myeloperoxidase activities also increased significantly (p<0.05). Treatment of wheat arabinoxylans tended to decrease nitrite production, but significantly stimulated $H_2O_2\;and\;O_2$ productions of macrophages (p<0.05). These results indicate that the immunostimulating effect of wheat arabinoxylan may be closely related with lysosomal enzyme activity and reactive oxygen intermediate production of macrophages.
We previously reported that NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1 (NQO1)-knockout (KO) mice exhibited spontaneous inflammation in the gut. We also found that NQO1-KO mice showed highly increased inflammatory responses compared with NQO1-WT control mice when subjected to DSS-induced experimental colitis. In a Clostridium difficile toxin-induced mouse enteritis model, NQO1-KO mice were also sensitive compared with NQO1-WT mice. Moreover, numerous studies have shown that NQO1 is functionally associated with immune regulation. Here, we assessed whether NQO1 defects can alter macrophage activation. We found that peritoneal macrophages isolated from NQO1-KO mice produced more IL-6 and $TNF-{\alpha}$ than those isolated from NQO1-WT mice. Moreover, the dicumarol-induced inhibition of NQO1 significantly increased IL-6 and $TNF-{\alpha}$ production in peritoneal macrophages isolated from NQO1-WT mice, as well as in the cultured mouse macrophage cell line, RAW264.7. These results indicate that NQO1 may negatively regulate the activation of macrophages. Knockout or chemical inhibition of NQO1 markedly reduced the expression of $I{\kappa}B$ (inhibitor of $NF{\kappa}B$) in both mouse peritoneal macrophages and RAW264.7 cells. Finally, RAW264.7 cells treated with dicumarol exhibited morphological changes reflecting macrophage activation. Our results suggest that NQO1 may suppress the $NF{\kappa}B$ pathways in macrophages, thereby suppressing the activation of these cells. Thus, immunosuppressive activity may be among the many possible functions of NQO1.
Purpose: Angiogenesis has a critical role in tumor proliferation, invasion, and metastasis. In gastric cancer, tumor-associated macrophages and mast cells produce angiogenic factors such as VEGF, that inhibit the functional maturation of dendritic cells. The aim of this study is to identify tumor-associated macrophages, mast cells, dendritic cell infiltrations, and microvessel densities (MVD) to investigate the relationship between them and the prognosis for gastric-cancer patients. Materials and Methods: The subjects were 79 patients selected from those who had undergone a curative gastric resection for stomach cancer. With them, Immune-histochemical staining was done using CD34 for the MVD, CD68 antigen for macrophages, and S-100 protein for dendritic cells, and toluidine blue staining was done for mast cells. Results: Macrophage infiltration showed a statistically significant positive correlation with histologic differentiation and a negative correlation with invasion depth, nodal metastasis, and stage. S-100 (+) dendritic cells and mast cells had no significant correlations with histologic differentiation, invasion depth, nodal metastasis, distant metastasis, stage, and MVD. As survival, no statistically significant differences were seen between the variables. Conclusion: Tumor-associated macrophages should be evaluated as possible prognostic markers in gastric-cancer patients.
In addition to the removal of dying or dead lutein cells by phagocytosis in many species, macrophages exert both luteotropic effect during maturation period and luteolytic effect during degenerative period via mediating autocrine/paracrine actions of self-producing cytokines in the corpus luteum. In this experiment, immunohistochemical and transmission electron microscopic (TEM) studies were performed to observe the morphologic changes of luteal macrophages during luteolysis. A small number of macrophages and low immunoreactivity were present at the mature stage. The number of macrophages and immunoreactivity gradually increased along the advance of luteolysis. Two subtypes of macrophages could be observed through TEM observation. One type of macrophage located between the large lutein cells contained no lipid droplets in their cytoplasm at mature stage. The other type of macrophage located near the blood vessels contained many lipid droplets in their cytoplasm during luteolysis. Particularly, no phagocytic macrophages were observed, which suggested the macrophages in the porcine corpus luteum did not involve in the phagocytotic elimination of dying lutein cells.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.42
no.9
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pp.1513-1517
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2013
This study examined the immunomodulatory activities of apple seed extracts (ASE). The immunomodulatory effects were estimated through nitric oxide production, cytokine induction, protein expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS), and the phosphylation of mitogen-activated protein kinases (MAPKs) and inhibitory kappa $B{\alpha}$ ($I{\kappa}B-{\alpha}$) in the RAW 264.7 macrophage cell line. In the cytotoxicity asay, ASE (31 to $250{\mu}g/mL$) did not induce cytotoxicity; thus, the optimal concentration of ASE was confirmed to be less than $250{\mu}g/mL$. Nitric oxide (NO) and cytokines (tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ and interleukin (IL)-6) production significantly increased in a dose-dependent manner. Similarly, the protein expression of iNOS and the phosphorylation of MAPKs and $I{\kappa}B-{\alpha}$ were also increased by ASE treatment. Overall, our results suggest that extracts from apple seeds potentially have immunomodulatory activities on macrophages.
Tetrahymena pyriformis is a free-living ciliate protozoan in the freshwater system. Experiments were carried out to determine whether intraperitoneal administration of T. pyriformis (GL strain) to mice activates macrophages to be able to kill Toxoplasma gondii tachyzoites in vitro. Mice were also injected intraperitoneally with several synthetic activators; dimethyldioctadecylammonium bromide (DDA), dextran sulfate, complete Freund's adjutant (CFA) as well as Toxoplasma and Tetrehymena Iysates in order to activate mouse peritoneal macrophages. One week after the administration of activators, peritoneal cells were harvested and the adherent macrophages were challenged with Toxoplasma tachyzoites. Macrophage monolayers were then fixed with absolute methanol after washing, and stained with Giemsa solution. The percentage of the adherent cells infected and total number of organisms per 100 macrophages were calculated to make toxoplasma-cidal activity of macrophages according to the cultivation time. Peritoneal macrophages from mice administered with Tetrahymena exhibited significant protection against target parasites as compared with those treated with synthetic activators. Among non-biological synthetic activators, DDA was evaluated as an ellcellent activator.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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