The alkaline protease produced by Sarcodon aspratus(Berk) S. Ito. was purified from its fruit bodies. The enzyme was purified by using ammonium sulfate fractionation, tris-acryl CM-cellulose column chromtography and chromatofocusing. The protease migrated as one major band with a molecular weight of about 29,000 dalton on sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. The amino acid sequence of the N-terminal residues(21) of the enzyme was determined by automated sequence analysis. The sequence was Val-Thr-Thr-Lys-Gln-Thr-Asn-Ala-Pro-Trp-Gly-Leu-Gly-Asn-Ile-Ser-Thr-Thr-Asn-Lys-Leu. Comparison of this sequence with the N-terminal sequence of the p-roteinase K from Tritirachium album showed high similarity, i. e. 57.8% identical residues. The protease displayed a relatively high stability in sodium dodecyl sulfate.
Thermostable asparaginase was purified to homogeneity from mesophilic Strepfomyces lincolnensis M-20 by 30${\sim}$70% ammonium sulfate precipitation and asparagine-Sepharose CL 6B affinity column chromatography, The apparent molecular mass of L-asparaginase by SDS-PAGE was found to be 47 kDa, whereas by its mobility on Sephacryl S-300 column was around 180 kDa, indicating that the enzyme at the native stage acts as tetramer, The purified enzyme showed a single band on acrylamide gel electrophoresis. The optimum pH and temperature were pH 9.5 and 55${\circ}$C, respectively. Chemical modification experiments of purified asparagines implied the existence cystein residue located at or near active site. Purified asparaginase retained the 85% of the initial activity after incubation at 90${\circ}$C for 30 min. A correlation between themostability and resistance to proteolysis of commercial asparaginase and purified asparaginase from Strepfomyces lincolnensis M-20 was investigated. Purified thermostable asparaginase was resistant to trypsin and chymotrypsin treatment, while the commercial asparaginase was not themostable and was susceptible to proteolytic treatment with trypsin and chymotrypsin.
한건(韓件) 및 유우(乳牛)의 우백혈병(牛白血病) 바이러스의 감염상태(感染狀態)와 목장(牧場)의 오염상황(汚染狀況) 등 역학적(疫學的)인 연구(硏究)를 위하여, 경북지방(慶北地方)의 14개목장(個牧場) 유우(乳牛) 106두(頭)와 대구(大邱) 도축장(屠畜場)에서 한우(韓牛) 699두(頭)의 혈청항체(血淸抗體)를 조사(調査)하였다. 우백혈병(牛白血病) 바이러스의 바이러스의 본(本) 바이러스의 단백항원(蛋白抗原)(P)과 당단백항원(糖蛋白抗原)(gp)를 가지고 한천(寒天) Gel 내침강반응(內沈降反應)(ID)을 실시하였고 그 결과(結果)는 다음과 같다. 1. 유우(乳牛) 106두(頭)에 있어서 gp-ID 양성(陽性)인 것은 30두(頭)(28.3%)이었고, 14개목장(個牧場)중 12개(個) 목장(牧場)이 본(本) 바이러스에 오염(汚染)되어 있었으며, 목장별(牧場別) 오염률(汚染率)은 12.5에서 60%로 높은 감염률(感染率)을 나타내었다. 2. 한건(韓件) 699두(頭)에서 gp-ID에 양성(陽性)인 것은 17두(頭)(2.4%)로 낮았다. 3. gp-ID 양성혈청(陽性血淸) 47례(例)중 P 항원(抗原)을 가지고 있는 것은 유우(乳牛) 5두(頭)에서만 인정(認定)되었다.
A 7-year-old Shih Tzu cross dog was presented for severe abdominal pain, persistent vomiting and anorexia. Laboratory tests revealed mild anemia and hypoproteinemia. Abdominal survey radiography revealed marked gastric distension and large circular foreign body in the gastric pylorus. The foreign body was removed using a videoendoscope, fishing line and retrieval forceps. The dog's clinical signs resolved following foreign body removal.
An inky cap, Coprinus comatus synthesizes and secretes a laccase in the liquid yeast extract peptone dextrose medium. We have successfully purified the enzyme through the ion-exchange chromatography and the preparative gel electrophoresis. The estimated molecular weight was 67 kDa by the SDS-PAGE analysis. Optimum pH was pH 4.3 and optimum temperature was $25^{\circ}C$. The Km value was 0.45 mM and the Vmax was 0.0132 OD/min/unit for o-tolidine. Purified laccase showed 49.3% decolorizing activity against remazol brilliant blue R (RBBR) and 41.6% decolorizing activity against Poly R-478 after 12 h incubation.
We obtained the total protein antibodies of Saccharomyces cerevisiae KCTC 1720 and Escherichia coli K-12 from the rabbit and the guinea pig to determine the host-derived proteins which may be remained in biotechnological products. The protein concentration of rabbit antibodies was 4.05 mg/mι in the case of yeast, 7.14 mg/mι in the case of E. coli and that of guinea pig antibodies was 1.90 mg/mι in the case of yeast, 7.17 mg/mι in the case of E. coli, respectively. To determine remained host-derived proteins in biotechnological products which produced by the hosts, S. cerevisiae or E. coli, we used a sandwich enzyme linked immunosorbent assay method in 96 well microplate. When the method applied to determine the remained host-derived proteins in commercial biotechnological products, it detected less than 3.5 ng/vial in human growth hormone, less than 1 ng/vial in hepatitis B vaccine and interferon-${\gamma}$ and 2~23 ng/vial in interferon-$\alpha$. The method can be used to determine the remained host-derived protein in biotechnological products.
The myofibril prepared from PSE (pale, soft, exudative) porcine meat was modified by reacting with succinic anhydride and the chemical and functional properties of modified myofibrils were investigated. $No\;Ca^{2+}-and\;Mg^{2+}-ATPase$ activity were observed irrespective of the degree of succinylation. Isoelectric point of the succinylated myofibril changed to around pH 3 from the pH 5 of unmodified myofibril. Salt soluble property was not affected by changing the salt concentration. The modified myofibril in aqueous solution did not coagulate during heating at $98^{\circ}C$ for 10 min. Water absorption ability was not improved but emulsion capacity was improved a little by succinylation.
Accumulating evidence suggests that Alzheimer's disease (AD) is not only caused by accumulation of abnormal proteins, including amyloid and tau, but is also closely associated with abnormalities in the microvascular environment including the blood-brain barrier (BBB), both of which lead to neuroinflammation and neurodegeneration. Application of in vivo magnetic resonance imaging (MRI) has recently increased to assess BBB permeability in AD and related diseases. Here, we provide a narrative review of BBB permeability-related pathology in Alzheimer dementia and recent MRI research on BBB permeability changes in AD and related diseases. Furthermore, we briefly introduce the measurement of BBB permeability using MRI and its methodological issues.
Baek, Jong Hyun;Lee, Jang Hoon;Lee, Jung Cheul;Lee, Dong Hyup;Moon, Yong Suk;Lee, Young Man
Journal of Chest Surgery
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v.42
no.1
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pp.1-8
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2009
Background: The pathophysiology of acute respiratory distress syndrome with sepsis is acute lung injury (ALI) that's' caused by endotoxin (LPS). We evaluate effects of moxifloxacin on LPS-induced ALI in a rat model. Material and Method: The rats were divided into 3 groups as the control group (C), the LPS insult group (L), and the LPS+moxifloxacin treated group (L-M). ALI was induced by endotracheal instillation of E.coli LPS, then moxifloxacin was given in 30 minutes. Five hours later, we checked the lung weight/body weight ratio(the L/BW ratio), the protein & neutrophils in the bronchoalveolar lavage fluid (BALF), the myeloperoxidase (MPO) activity & the malondialdehyde (MDA) content, the expressions of cytosolic and secretory phospholipase $A_2$ (c, $sPLA_2$), and the morphology of the lung with using a light microscope. Result: The L/BW ratio, the protein content and the neutrophil count in the BALF, and the MPO activity and the MDA content in lung were significantly increased in group L compared to group C, and these factors were markedly decreased in group L-M compare to group L. The $cPLA_2$ expression and the $sPLA_2$ expression were increased in group L and the $cPLA_2$ expression was decreased in group L-M. Yet the $sPLA_2$ expression was not changed in group L-M. Morphologically, many inflammatory findings were observed in group L, but not in group L-M. Conclusion: Many of the inflammatory changes of ALI that were caused by LPS insult were ameliorated by moxifloxacin treatment.
These days there is a constant possibility of exposure to UV radiation which can cause abnormal production of melanin and result in skin disease such as hyperpigmentation and melanoma. Many materials were investigated for skin whitening and protection against UV radiation. In this study, we assessed the melanogenesis inhibitory activities of Korean Red Ginseng (KRG, Ginseng Radix Rubra) and Ginkgo (EGb 761 Ginkgo Biloba) in an attempt to develop a new skin whitening agent derived from natural products. B16F10 melanoma cells were treated for 48 hr with KRG and EGb 761. The inhibitory effect on melanogenesis was measured and related cytokines and proteins expression were also investigated by RT-PCR and Western blotting. In addition, we also assessed the effects of these substances on the skin of C57BL/6 mice. Cell growth, melanin content and tyrosinase activity were inhibited effectively in B16F10 melanoma cells treated with KRG and EGb 761. Moreover, tyrosinase mRNA expression was inhibited clearly and melanogenesis related proteins (MRPs) containing tyrosinase, TRP1 and TRP2 were also reduced by KRG and EGb761, while cytokines such as IL-$1{\beta}$ and IL-6 were induced. In the case of UV irradiated mice, we observed induction of cytokine mRNA levels and reduction of MRPs mRNA expression. In addition, a decrease in pigmentation from treatment with KRG and EGb 761 on the skin of mice was observed. These results indicate that KRG and EGb 761 inhibit melanogenesis in B16F10 cells and have display protective activities against UVB. Therefore, we suggest that KRG and EGb 761 are good candidates to be used as whitening agents and UVB protectors for the skin.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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