In order to find out the best media, explants and environmental conditions for induction of calluses and organogeneses of Pinellia ternata (Thunb.) Breit in vitro, various parts of adult have been cultured on Murashige & Skoog's medium containing various levels of 2,4-dichlorophenoxy acetic acid(2,4-D) and kinetin. The results obtained were as follows: Calluses were induced from the surface of apical meristem and leaf tissue. Formation and growth of calluses in petiole ex plants were best on the MS medium complemented with 2,4-D 2.0 mg/l and kinetin 0.2mg/l. But callus formation in stem ex plants of the nearest tuber was not induced at all kinds of media. Plantlets occured at all treatment except absence of growth regulator. Their numbers, size, leaf and fresh weight were promoted by 2,4-D 2.0mg/l and kinetin 0.2mg/l. Root growth was increased on the medium containing higher 2,4-D concentrations. Size and fresh weight of callus were increased at 25$^{\circ}C$ compared with 10, 20 and 30$^{\circ}C$, respectively. Optimal pH value was at 6.0 for growth of callus. Morphological aberrations were observed in plantlets, especially in regenerated leaves. The separation of the broad leaved plantlets and albino were observed in some cultures. Growth of plantlets after transplantation was best in pots with the sterilized vermiculte. But abnormal variants withered up.
Park, Sea-Hee;Joo, Bo-Sun;Moon, Hwa-Sook;Kim, Yoon-Yeon;Cho, Jae-Dong;Kang, Ho-Sung;Kim, Han-Do
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.26
no.2
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pp.203-211
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1999
목적: 일산화질소 (nitric oxide; NO)는 생식계를 비롯한 여러 생체내 기관에서 다양하고도 중요한 작용을 하는 것으로 알려져 있으며, 복강액은 난관내강과 연결되어 복강액 내의 세포 성분의 변화는 난관의 미세환경을 변화시켜 수정과 초기 배아 발생에 영향을 줄 수 있다. 본 연구는 배아 발생에 있어서 일산화질소의 역할을 이해하고 복강액 내의 NO농도 변화가 배아 발생에 미치는 역할을 조사하기 위해 수행되었다. 방법: 과배란시킨 1세대 잡종 암컷 생쥐 (C57BL${\times}$CBA/Ca)로부터 1세포기 배아를 얻어 10% synthetic serum substitute가 첨가된 modified human tubal fluid 배양액에서 4일 동안 체외배양하였다(대조군). 실험을 위해 이러한 배양조건에 sodium nitroprusside (SNP)를 $0{\sim}1mM$의 다양한 농도로 배양초기부터 첨가하거나, $200{\mu}M$ SNP를 2-, 4-, 8-세포기의 각기 다른 배아시기에 첨가하였으며, 복강경수술을 받는 42명의 여성으로부터 채취한 복강액을 SSS대신 단백질원으로 사용하여 포배아까지의 배아 발달율을 관찰하였으며, 복강액 내의 NO농도를 Griess방법에 의해 측정하였다. 배아의 apoptotic body는 H33342 염색법으로 조사하였으며 배아 발달율은 3회 이상 반복 실험한 결과의 mean${\pm}$SEM으로 나타내었다. 결과: SNP는 농도에 의존적으로 배발생을 억제하였으나 배아 단계에 대한 특이성은 관찰할 수 없었으며, 특히 $100{\mu}M$ 이상의 고농도의 SNP는 2-세포기 단계에서 배아 발생을 정지시켰다. 또한 단백질원으로 복강액 이용시 배 발생율은 복강액 내의 NO 농도에 따라 현저한 차이가 발견되었으며, $2.5{\mu}M$이상의 NO를 함유한 복강액에서 배양한 배아의 발생율은 현저하게 감소하였다. cGMP analogue인 8-bromo-cGMP를 배양액에 첨가시 배아 발생에는 변화가 없었으며, SNP에 의해 배발생이 정지된 2-세포기 배아에서 apoptotic body를 발견할 수 없었다. 결론: 이상의 결과로 보아 NO는 고농도에서 배아 발생을 저해하며, 복강액 내의 NO와 같은 성분의 변화는 배아 발생에 유해한 효과를 유발할 것으로 사료된다. 이러한 NO의 배아 발생 억제효과는 cGMP로 중재되는 경로나 apoptosis유발과는 관계가 없는 것 같다.
Background : To assess the diagnostic role of bronchoscopic lavage for the evaluation of pneumonia in intensive care unit(ICU), the results were compared to blind endobronchial specimen. Method : From September 1993 to August 1996, twenty-eight ICU patients suspected pneumonia on the basis of clinical evidence and performed bronchoscopy under the diagnostic or therapeutic purpose were studied retrospectively for the clinical findings including culture of bronchoscopic and blind endobronchial specimen. Bronchoscopic specimen was got through small amount of bronchoalveolar lavage with 20-40ml saline, one or two times on the suspected site. Results : l. Main reasons of ICU admission were respiratory and impending respiratory failure Nosocomial pneumonia was most common with 16 cases; each for community acquired and immunocompromised type with 6 cases. Diagnostic purpose of bronchoscopy was performed in 20 cases as 71 percent in total, whereas therapeutic removal of secretion in 8 cases. The complication during bronchoscopic evaluation was trivial. 2. The agreement between blind endobronchial and bronchoscopic specimen on microbial culture was only 39.3 percent. However, 2 cases each for aspergillosis and tuberculosis were diagnosed under bronchoscopic evaluation. 3 The application of mechanical ventilation occured significantly frequently in multidrug resistant pneumonia compared with other pneumonia in terms of bronchoscopic specimen. 4. The application of mechanical ventilation was significantly common in nosocomial pneurmonia compared with other types of pneumonia. Conclusion : The selective bronchoalveolar lavage and therapeutic removal of bronchial secretion with bronchoscopy in ICU patient accompanying pneumonia is a very useful tool with safety. The multidrug resistant pneumonia or nosocomial pneumonia could be closely associated with the use of mechanical ventilation.
Callus and shoot formation from medicinal crop, Lycium chinense Mill. cv. 'Cheongyang', as influenced by various media, explant sources and plant growth regulators were investigated. The rate of shoots formation, number of shoots, and fresh weight of shoots were the best on MS medium followed by B$_{5}$, WPH, and SH. Callus induction was more effective in leaf than internode segments, and was the best on MS medium containing 0.5 mg/L NAA with 0.2 mg/L BA. Effects of plant growth regulators in shoot formation were more effective in BA than TDA combined with NAA. Shoot formation from callus induced in leaf and internode segments was the best on MS medium containing 0.01 mg/L NAA with 0.2 mg/L BA.
A protocol has been developed for differentiation of adventitious shoots directly from leaf segments of Tetragonia tetragonoides O. Kuntze. Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 2 mg/L $N^6-benzyladenine$ (BA) and 0.5 mg/L ${\alpha}-naphthaleneacetic$ acid (NAA) supported the induction of adventitious shoots from leaf explants. Adventitious shoots were multiplied by subculturing on the double strength MS (2MS) medium supplemented with 0.5 mg/L NAA and 2 mg/L BA. Shoots were rooted on MS basal medium without any growth regulators.
Production of Panax ginseng in Korea has been increased tremendously in the last two decades, the acreage and number of growers hating been spread across the country. Improvement of variety, on the other hand, has been seldom carried out during this period, rendering the ginseng growing risky and hazardous. Breeding work with such perennial crop as ginseng if rather time-consuming, and there are few genesources to start with. Authorities concerned with ginseng Production pay hwy little attention to breeding researches for nimbus of reasons. As this crop is cultivated over the entire area of Korea. Breeding work cannot be allowed to delay forth. In the precut article, improvement of ginseng was discussed from the view point of two different categories of brooding concept: (1) conventional breeding and (2) breeding based on the somatic tell genetics.
This experiment was conducted to investigate the effects of length of storage period under low temperature, $CO_2$ enrichment and addition of plant growth regulators in Murashige and Skoog medium on the plant regeneration of Korean ginseng (Panax ginseng C. A. Meyer). Seeds were treated for 60 and 80 days respectively under $5^{\circ}C$ environment. 2500ppm of $CO_2$ was enriched by ventilation. Three plant growth regulators added to the medium were Indolbutyric acid, Benzyladenin and Gibberellic acid (GA3). The result indicated that : The capacity of differentiation was higher in the aged cotyledons from the seeds treated for 80 days under low temperature condition than in those treated for 60 days. $CO_2$ enrichment had stimulating effects on the growth and development of shoot primordium significantly but less effects on the formation of adventitious buds. From one zygotic embryo hundreds of plantlets were differentiated. $CO_2$ enrichment had effects on the formation of both indirect somatic embryo and direct somatic embryo. Indirect somatic embryo showed little growth and differentiation, being undifferentiated vascular stele and epicotyl. Direct somatic embryos were formed on the epidermis of backside basal part of cotyledon. Those embryos developed to whole plant having latent bud.
This study was conducted to define the effect of 2.4-D, NAA, Benzyladenine, and basic mediums on the callus induction and the organ differentiation from the meristem tips and the stem and leaf segments of the potato. Benzyladenine promoted the induction and growth of shoot from the meristem tip of potato but inhibited initiation of roots and induction of callus. At higher concentration of NAA than 0.5 ppm and of 2.4-D than 1.0 ppm the shoots were not initiated but the callus was induced from the meristem. The callus growth was significantly promoted on the medium containing NAA than 2.4-0. The initiation and growth of the shoots from the potato meristem was significantly increased in the medium containing 2.4-D and BA, or NAA and BA, compared with those containing BA, NAA or 2.4-D alone. The callus was more easily induced from the stem segments than the leaf segments of potato. And the 2.4-D was more effective for the induction and growth of the callus than the NAA. MS medium diluted its concentration to 1/2 was more suitable for the initiation and growth of the shoots from the potato meristem than the MS standard medium. For the initiation and growth of the shoots from the potato meristem, the most desirable medium was the diluted MS medium containing 1.0 ppm BA and 0.1 ppm NAA or 0.1 ppm 2.4-D.
In order to find an useful condition under which the mutants defective in sexual development could be isolated, the effects of several cultural conditions on the developments of Aspergillus nidulans were examined. Among several conditions found to restrict the asexual sporulation but enhance the sexual process, the interference of aeration by sealing the plates with sealing film was the most useful one for the purpose of mutant isolation. Sealing at any time before 20 hours from inoculation prevented both sexual and asexual process. When the seal was removed after 24 hours, however, the mycelia developed only to sexual organs. Using this properity, the early morphogenic process of sexual development could be easily observed and a number of mutants that showed some defects in the process could be isolated. The mutants were divided into 3 groups, NSD (never in sexual development), BSD (block in sexual development) and ASD (abnormal in sexual development). NSD mutants never produced either the $H{\ddot{u}}lle$ cells or cleistothecia and some produced the asexual organs even when the aeration was restricted. BSD mutants were blocked in the process of $H{\ddot{u}}lle$ cell, cleistothecia, crozier, asci or ascospore formation. ASD mutants had defects in the amount of cleistothecia, time of cleistothecial maturation or color of ascospores.
Sa, Young-Jo;Park, Jae-Kil;Sim, Sung-Bo;Jin, Ung;Moon, Young-Kyu;Lee, Sun-Hee;Jo, Kuhn-Hyun
Journal of Chest Surgery
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v.42
no.3
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pp.283-291
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2009
Background: Tracheal reconstruction after extended tracheal resection still remains as a major surgical challenge because good clinical outcomes are usually correlated with limited tracheal resection. Recent investigations with a using cryopreserved trachea for the reconstruction of a trachea have been carried out to overcome this problem. In this study, we analyzed viability of tracheas, which is an important determining factor for the success of transplanting a cryopreserved trachea and the development of post-transplantation tracheal stenosis, according to three different experimental factors: 1) the warm-ischemic time, 2) the cryopreservation solution and 3) the preserving temperature, to determine a better cryopreservation protocol and a better composition of the cryopreservation solution. Material and Method: Rats tracheas were harvested for different warm-ischemic times (0 hr, 12 hrs, 24 hrs). The tracheas were treated with recombinant insulin growth factor-1 (IGF) and they were stored at three different temperatures $(4^{\circ}C,\;-80^{\circ}C,\;-196^{\circ}C)$ for two weeks. After two weeks, we thawed the stored trachea and isolated the cells of the tracheas with using type II collagenase. We cultured the cells for seven days and then we compared the cellular viability by the MTT reduction assay. Result: Though cryopreservation is required to preserve a trachea for a longer time period, the viability of the tracheas stored at $-80^{\circ}C$ and $-196^{\circ}C$ was significantly reduced compared to that of the tracheas stored at $4^{\circ}C$. The viability of the tracheas with warm-ischemic times of 12 hrs and 24 hrs was also reduced in comparison to the tracheas with a warm-ischemic time of 0 hrs. Our data showed that the warm ischemic time and the parameters of crypreservation negatively affect on trachea viability. However, a cryopresrvation solution containing IGF-1 improved the cellular viability better than the existing cryopreservation solution. For the warm ischemic time group of a 0 hr, the addition of IGF-1 improved the viability of trachea at all the preserving temperatures. Conclusion: These experiments demonstrate that the viability of cryopreserved trachea can improved by modifying the components of the crypreservation solution with the addition of IGF-1 and reducing the warm-ischemic time.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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