This publication provides an overview of the state-of-the-art and perspective of biological $H_2$ production from water and/or organic substances. The biological $H_2$ production processes, being explored in fundamental and applied researches, are direct and indirect biophotolysis from water, photo-fermentation, dark anaerobic fermentation and in vitro $H_2$ production. The development of biological $H_2$ production technology, as an energy carrier, started at the late 1940's in the lab-scale. Now it has a high priority in the world, especially USA, Japan, EU and Korea.
An optimal condition for the continuous production of ${\delta}-aminolevulinate$(ALA) was investigated using high concentrated resting cells of Rhodocyclus gelatinosus KUP-74. The increase of the amount of extracellular ALA versus the concentration of resting cells showed rectangular hyperbolic pattern until 20 mg cells/ml, but no further increase in the ALA amount by increasing its concentration was occurred. The highest yield of the extracellular ALA was observed after 3 hr of incubation of 1 ml reaction system containing 20 mg cells, 4 mM levulinate and 5 mM L-glutamate. On the other hand, the immobilized cells prepared by Ca-alginate inclusive method needed to incubate for 6 hr with 6 mM levulinate and 10 mM L-glutamate to give maximal yield of the extracellular ALA. In addition, under these conditions the resulted continuous productivities of the ALA by immobilized cells and highly concentrated resting cells were appeared 50 percent decreases after incubations for 185 hr and 100 hr, respectively, and the method of the cells to be immobilized was more efficient to recover the extracellular ALA produced.
Microorganism, including some bacteria isolated from soil, were found to secrete an extracellular soymilk-clotting enzyme. Using this bacterial enzyme experiments were carried out to optimize the hydrolyzing conditions for the production of soy peptides. The soy peptides produced by hydrolyzing 11S globulin with enzyme treatment at $65^{\circ}C$, pH 6.1, for 1hr were found to have a accessible possibility. The obtained coagulum by enzymatic reaction was very flocculation with fine structural formation. Properties of peptide Y and W of the enzyme hydrolysates at pH 6.1 were superior to that of isoelectric precipitation because these peptides were miscible with water in all proportions.
A yeast strain producing phytase, isolated from a mash of Korean traditional Yakju, was identified as a strain of Saccharomyces cerevisiae and designated as Saccharomyces cerevisiae CY strain. Phytase was produced by CY strain both intracellularly and extracellularly. Total phytase activity by the shaking culture was about two times higher than that of the static culture. The portion of extracellular phytase to total phytase activity ranged between 23 and 49 percent, depending on the glucose concentration in the culture medium. Phytase production was reached at approximately 1 U/ml as total phytase activity and the maximum intracellular phytase activity was 0.17-0.19 U/mg-DCW at late logarithmic growth phase. The optimum reaction pH and temperature of intracellular phytase were 3.5 and $40^{\circ}C$, respectively. Over 95% of the phytate was degraded by growing cells after 36 hours yeast cell culture and about 90% of total phytate was effectively degraded by suspending the whole cell with the biomass of 0.4 mg-DCW/ml-reaction solution after 12 hours degradation reaction.
Background : The immune responses mediated by CD8+T cells are known to be significant in controlling M. tuberculosis infections. In order to determine the role of cytotoxic CD8+T cells in the protective immune mechanism in latently infected subjects, this study examined whether or not the cytotoxic immune responses of CD8+T cells specific to the M. tuberculosis somatic antigens are induced in BCG vaccinated healthy subjects. Methods : Cytotoxicity and $IFN-{\gamma}$ elispot assays were used to investigate the activities of CD8+T cells specific for the $thyA_{30-38}$ peptide epitope in circulating peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from BCG-vaccinated HLA-A*0201 and A*0206 subjects. Results : The results indicate the cytotoxic and $IFN-{\gamma}$ immune responses of CD8+T cells specific for $thyA_{30-38}$ were induced in BCG vaccinated healthy subjects. Conclusion : The cytotoxic and $IFN-{\gamma}$ responses by CD8+T cells specific for the M. tuberculosis somatic antigens are induced in BCG-vaccinated subjects, and appear to be involved in the protective immune mechanism in latently infected people against a M. tuberculosis infection.
A strain YB-4 producing the extracellular $\alpha$-galactosidase was isolated from soil, and has been identified as Streptomyces sp. on the basis of its cultural, morphological and physiological properties. The partially purified $\alpha$-galactosidase was most active on paranitrophenyl-$\alpha$-D-galactopyranoside at pH 6.0 and 6$0^{\circ}C$. The enzyme retained 90% of its maximum activity between pH 4.0 and pH 10.0 after pre-incubation for 1 h. The enzyme was able to hydrolyze oligomeric substrates such as melibiose, raffinose and stachyose to liberate galactose residue, indicating that the $\alpha$-galactosidase of Steptomyces sp. YB-4 hydrolyzed $\alpha$-1,6 linkage.
Skyrin was extracted from Penicillium islandicum cultivated on synthetic Czapek-Dox medium. A preliminary experiment in Penicillium islandium using $[^{14}C]$-acetate proved the incorporation of $[^{14}C]$ into skyrin. In the cell-free system using the fungus $[^3H]$-emodin and $[^3H]$-emodinanthrone were shown to give some reliable evidences far the biosynthesis of skyrin. The incorporation of $[^3H]$-emodin was less significant than that of $[^{3}H]$-emodinanthrone. As a result of the cell-free experiment, the biosynthetic pathway of skyrin by the fungus was suggested as follows: $emodinanthrone{\rightarrow}emodin{\rightarrow}skyrin$.
The cell-free cellulolytic enzyme was separated into 3 different enzyme proteins by gel-filtration and ion-exchange chromatography. These fractions were named enzyme A, enzyme B and enzyme C. The mode of action of each of the separated enzymes on crystalline cellulose was examined using infrared spectroscopy and X-ray crystallography. It was concluded that enzyme B is of the $C_1-type$ and reduces the crystallinity of the subatrate by generation an unstable glucopyranose ring structure, whilst enzymes A and C are of the $C_x-type$ and hydrolyse the reaction product of enzyme B to constituent sugars. A reaction scheme for this cellulase system is proposed and discussed.
Cyclodextrin glucanotransferase (EC 2.4.1.19 : 1,4-$alpha$-glucan 4-$alpha$-D-(1,4-glucano) transferase, cyclizing; CGTase) was recovered by starch adsorption. The adsorption and desorption of CGTase to starch was studied as a function of pH, temperature, and starch type. The optimal pH, temperature, and starch for adsorption were, 8.0, $4^{circ}C$, and 1% (w/v) corn starch, respectively, per 205 U/mL enzyme activity in the presence of 25% (w/v) ammonium sulfate. The maximum adsorption ratio was 95%. On the other hand, the optimal pH, temperature, and starch type for desorption were 8.0 (tris-buffer), $50^{circ}C$, and oxidized starch, respectively. The maximum desorption ratio was 98% by tris-buffer solution at pH 8.0. The efficiency of adsorption and desorption were affected slightly by the removal of cells from the fermentation broth.
A strain YB-9 was isolated from soil as a producer of the extracellular ${\beta}-D-galactosidase$, which catalyzes the hydrolysis of lactose. The strain YB-9 was identified as Streptomyces sp. on the basis of its cultural, morphological and physiological properties. After treating culture supematant of the isolate with ammonium sulfate $(15{\sim}70%)$, the precipitated protein was used as a crude ${\beta}-galactosidase$ for analyzing its reaction properties with $para-nitrophenyl-{\beta}-D-galactoside$$(pNP-{\beta}Gal)$ and lactose as substrates. The {\beta}-galactosidase showed its maximal activity at pH $6.0{\sim}6.5$ and $60^{\circ}C$. The hydrolyzing activity of ${\beta}-galactosidase$ for both $pNP-{\beta}Gal$ and lactose was decreased by galactose. Its hydrolyzing activity for lactose was slightly decreased by glucose, but the activity for $pNP-{\beta}Gal$ was increased to 1.3-folds by glucose. Especially, its hydrolyzing activity was not affected for lactose and was increased to 1.6-folds for $pNP-{\beta}Gal$ by xylose.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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