목적: 법랑기질 유도체(EMD)가 사람 치주인대 줄기세포(hPDLSC)의 조직 형성능에 미치는 영향을 in vitro와 in vivo 분석 모델을 이용해 평가한다. 재료 및 방법: hPDLSC를 배양하여 운반체와 함께 면역 억제된 쥐 등에 이식하였다; (1)대조군: EMD 처치하지 않은 운반체에 심어진 hPDLSC군 ($EMD^-/hPDLSC^+$), (2)실험군: EMD 처치한 운반체에 심어진 hPDLSC군 ($EMD^+/hPDLSC^+$). 각 군당 5마리씩 시행하고 8주 후 희생하였다. 조직학적, 조직계측학적 분석을 통해 형성된 백악질의 면적과 백악세포의 수 그리고 샤피 섬유의 수를 계측하였으며 면역조직화학적 분석을 통해 백악질과 교원질 형성을 평가하였다. 또한 in vitro에서 hPDLSC의 수용성 교원질과 glycosaminoglycan 형성에 대한 EMD의 효과를 분석하였다. 결과: 조직학적 분석에서 교원질성 치주 인대 조직이 실험군에서 현저하게 많이 생성된 것을 관찰할 수 있었다. 형성된 백악질의 면적과 백악세포의 수는 군 간 차이가 없었으나, 새롭게 형성된 샤피 섬유의 수는 실험군에서 대조군보다 유의하게 많았다(p<0.05). 교원질 형성에 대한 면역조직 화학적 분석 결과, 실험군에서 I, III형 교원질과 hydroxyproline의 발현이 높았다. 또한 in vitro에서 hPDLSC에 의한 수용성 교원질과 glycosaminoglycan 형성이 EMD의 농도에 비례하여 증가하였다 (p<0.05). 결론: EMD는 hPDLSC에 의한 샤피 섬유 및 교원질 생성을 증가시키고, 이는 새로운 백악질의 기능적 부착과 치주조직 재생에 중요한 역할을 한다.
Substance P is one of the neuropeptide which presents highly in tension site of periodontal ligament during the orthodontic tooth movement. It has bnn also hon as one of the neuropeptides which cause neurogenic inflammation in various tissues and organs. However, there is no report about the effect of substance P on major extracellular matrix protein, collagen production. The purpose of this study was to evaluate the collagen production by substance P in human periodontal ligament cell. The collagenase-digestion method was used to evaluate collagen production and also used Northern blot hybridization for the evaluation of collagen mRNA level. This study also Included in terms of prostanglandins and gelatinase production with respect to collagen production. For the collagen degradation, zymography was used to estimate denatured collagen degradation. Dose-dependent effect of substance P on noncollagen protein, collagen, and percent collagen was that substance P increased noncollagen protein synthesis, but decreased collagen sytnsis. So the percent collagen, which determined by relative collagen production against total protein production, w3s decreased from $7\%\;to\;3.6\%$. This inhibitory effect of substance P on collagen production was disappeared when cells were treated concomitantly with indomethacin. It means that substance P-induced inhibitory effect on collagen production was due at least in part to the production of prostaglandins. To evaluate whether substance P-induced inhibitory effect on collagen production is correspond to the steady-state levels of procollagen mRNA, Northern blot hybridization was performed and it showed that substance P has no effect on the steady-slate level of ${\alpha}1(I)$ procollagen mRNA. It means that the inhibitory effect of substance P on collagen production was due to the change of a certain mechanism after posttranscription. In this context, gelatinase production by substance P in periodontal ligament cells was evaluated by zymography. Zymogram showed that substance P has no effect on gelatinase production in periodontal ligament cells. To explore wheter substance P-induced inhibitory effect on collagen production is selevtive in periodontal ligament cells or not, MC3T3-E1 cells which originated from mouse calvaria was used. It showed that substance P has no effect on collagen production in MC3T3-E1 cells. Taken together, substance P inhibits collagen production in human periodontal ligament cells. This effect was not due to the change of the steady-state level of procollagen mRNA and gelatinase production, but due at least in part to the change of prostaglandins production.
감초산이 인체 치은 섬유모세포에 미치는 영향을 세포의 성장과 증식, 총 교원질 합성 및 인체 치은 섬유모세포 핵내 acridine orange 결합으로 추적조사하였다. 조절이 되지 않는 성장을 해결하기 위하여 세포분화인자인 감초산이 배양 치은 섬유모세포의 활성에 미치는 효과를 검색하였다. 감초산 존재하의 배양 인체 섬유모세포의 세포성장 및 증식, 교원질 합성 및 세포 핵내 acridine orange 결합을 각각 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT)법, 4-hydroxyproline, 유식세포분석기를 이용한 acridine orange 결합으로 검색하였다. 형태학적으로 $100\;{\mu}g/ml$의 감초산으로 처리한 섬유모세포는 모양이 둥글게 되었다. 감초산은 $50\;{\mu}g/ml$ 이상의 농도에서 치은 섬유모세포의 성장과 증식을 억제하였다. 감초산 존재 시에 세포내 총 교원질 양이 감소하였고, 세포외배지내의 교원질 총 양이 증가하였다. 인체 치은 섬유모 세포를 $100\;{\mu}g/ml$의 감초산과 함께 24 시간동안 배양하였을 때, 80 채널 이상의 평균형광을 갖는 diploid 세포가 감소하였고, 80 채널 이하의 형광을 갖는 acridine orange결합이 증가하였다. 이러한 연구 결과 감초산은 인체 섬유모세포에서 세포성장 및 증식, 교원질합성 및 DNA 분절화를 유도함이 제시하였다.
Ji, Kuk-Soep;Yoon, Young-Jooh;Park, Joo-Cheol;Kim, Kwang-Won
The korean journal of orthodontics
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v.34
no.2
s.103
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pp.143-152
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2004
It has not been elucidated whether the initiation of condylar development of the mandible is related with the periosteum of the mandible, or if it derives from a separate programmed blastema not related with the mandible. Also, although the mandibular condylar cartilage is known to promote growth, few studies have dealt with molecular-biologic mechanisms such as the expression of specific genes according to the differentiation of the mandibular condyle. To elucidate the unique cellular characteristics, development, and differentiation process of the mandibular condyle, an examination of expressions of genes characteristic of cartilage and bone were carried out using RT-PCR and mRNA in situ hybridization. 1. Type? collagen mRNA was detected with type II collagen mRNA in the differentiation and growth process of the cartilage of the mandibular condyle. TypeII collagen mRNA was demonstrated in the whole resting md upper part of the poliferative zone, whereas type II collagen mRNA was observed in the resting, proliferative and upper hypertrophic cartilage zone of the mandibular condyle. 2. The condylar cartilage rapidly increased in size due to the accumulation of hypertrophic chondrocytes as characterized by the expression of type II collagen mRNA during postnatal development. 3. BMP-4 mRNA was present in the anlage of the future condylar process and also in the ossifying mandibular body. 4. IHH mRNA was limited exclusively to the lower part of the proliferative zone and the upper part of the hypertrophic cartilage zone during condylar development. These findings were different from those in the growth-plate cartilage of the long bone, indicating a characteristic feature of the differentiation of the chondrocytes in the condylar cartilage present in prenatal and postnatal development. Furthermore, it was also suggested that chondroblasts of condylar cartilage rapidly differentiate into hypertrophic chondrocytes with increased functional Load force such as muscle activity and mastication.
Underlying malocclusions and dentofacial deformities are often related to variations in the craniofacial development. Type I and type II collagens are considered the major collagens of bone and cartilage respectively. Monitoring the patterns of those protein expressions during development will Provide a basis for the understanding of normal and abnormal growths. This study was undertaken to investigate the morphogenetic changes and the expression patterns of type I and II collagen proteins involved in the developing mandible of human embryos and fetuses. 50 embryos and fetuses were studied with Hematoxylin and Eosin, Alcian, blue-PAS, Masson Trichrome, md Immunohistochemical stains. The results were as follows : 1. A 13.5 mm embryo showed the stomatodeum with dental lamina, maxillary and mandibular processes. Meckel's cartilage appeared in the mandibular arch of a 20.5 mm embryo. New bone formation was bilaterally initiated at the outer side of middle portion of Meckel's cartilage of 22-38 mm embryos. 2. Meckel'cartilage was resorbed at the 15th week fetus. The endochondral ossification was observed where there was direct replacement of cartilage by bone. Meckel'cartilage disappeared and membraneous ossification were observed at the 25th week. 3. Before the appearance of Meckel's cartilage, the expression of type I collagen was moderate at the odontogenic epithelium of maxillary & mandibular process, but mild for the expression of type II collagen. 4. During the appearance of Meckel's cartilage and new bone formation, the immunoactivity of type II collagen was more expressed than type I collagen at the Meckel's cartilage and new bone. 5. During intrarmembranous bone formation, the expression of type II collagen was rare in the bony trabeculae. There was a switch for the expression of collagens from type II to type I during the appearance of Meckel's cartilage.
The purpose of the study was to analyze American teacher quality management system and provide it's implications. For this, the study analyzed the main traits of American teacher policy, Pennsylvania State University's teacher cultivation system, Pennsylvania State's teacher certification, selection, and recruit system, the master teacher system of New Jersey and New York State. The main results are as the followings. First, American teacher policy is variously operated by state government and school district based on variety and autonomy. Second, for teacher cultivation in American teacher policy, the evaluation on the teacher cultivation program of teacher cultivation institute(mainly university) is strictly administrated. Third, for teacher certification, various tests for gaining teacher certificate are administered and standardized tests are used for the tests. Fourth, for teacher selection and recruit, there is no special test for selection and teacher recruit is done by contract. Fifth, for quality management using excellent teacher, America is administering master teacher that is similar with master teacher system in Korea. Finally, the innovation of teacher cultivation institute by introducing Every Student Succeeds Act(ESSA) is anticipated. Based on these results, the implications for Korean teacher policy were provided.
In order to observe the effects of Nicotine and NNK on cultured human gingival fibroblast, several factors were examined including mutagenicity, the number of cells attached culture plate surface through MTT test, the abundance of collagen & collagenase in mRNA level and collagenolytic activity in extracellular matrix. The results were as follows; 1. Regardless of the co-existence of S9, Nicotine did not show the mutagenicity by itself and NNK by itself showd the same result; However, dose related mutagenicity was shown in NNK with S9. 2. The number of fibroblasts attached cultured plate surface was measured by MTT procedure. The number of cells in Non-smokers increased at all time periods as compared to those of smoker. 3. Non-smoker's fibroblast treated by NNK or Nicotine was dosedependently dosedependently decreased in the number of cells when compared to untreated control. In higher dose, Nicotine showed the cellular toxicity, but NNK did not. 4. No change in the abundance of mRNA for pro${\alpha}1$ and pro${\alpha}2$ was shown in Nicotine treated group but in gingival fibroblasts following treatment with NNK, the abundance of mRNA for pro${\alpha}1$, but not pro${\alpha}2$ collagen was decreased. 5. The abundance of mRNA for collagenase was decreased when NNK was treated but no change occurred in Nicotine treated group. 6. The effect of NNK and Nicotine in collagenolytic activity showed that, collagenase activity exclusively react to type I collagen, was increased in both group, but gelatinase exclusively react to type IV collagen was not influenced at all. Collagenase activity of smoker's fibroblast was also increased as much as Nicotine and NNK group. The findings suggest that both of Nicotine and NNK lead gingival fibroblast to decrease in the abundance of collagen. And it seems to be that Nicotine and NNK have independent pathway toward the gingival fibroblast.
The purpose of this study was to investigate the effect of high voltage pulsed current stimulation (HVPCS) on the healing rate of a dermal wound in a rat. We also determined the mechanism of promoting healing by HVPCS. Twenty male Sprague-Dawley rats were randomly divided into two group; HVPCS group (n=10) and control group (n=10). The HVPCS rats received electrical stimulation with a current intensity of 50 V at 100 pps for a duration of 30 minutes, while the control group was given the same treatment without electricity for a week. The biopsy specimens were fixed in formalin, embedded in paraffin and stained with Masson's trichrome, hematoxylin and eosin (H&E). The fibroblasts and collagen density were counted using a light microscope and computerized image analysis system and calculated as the density and the percent. A Student t-test showed a significantly higher wound healing rate of the HVPCS group than control (t=-4.161, p<0.001). The fibroblasts in the HVPCS group were higher than in the control group (t=-4.921, p<0.001). The density of collagen in the HVPCS group was also higher than in the control group (t=-4.367, p<0.001). These results indicate that the HVPCS accelerated the rate of healing in dermal wound, and increased fibroblasts and collagen density in the regenerative dermis. These findings suggest that the HVPCS may activate fibroblasts by alteration of the electrical environment, and it may increase collagen synthesis in the regenerative dermal wound.
The purpose of this study is to analyze the characteristics and implications of the quality management policy through teachers' entire life in Japan case study. This article composed of four chapters; Implication and problem situation, Backgrounds and streams of the japanese teacher reform policy, Characteristics of the main policies about managing the teacher's quality through their life, and Conclusion(Japanese characteristics and the suggestion for Korea). The main quality management policy means the various teacher recruitment and selection system, Merit system of personnel management, Effective management of a system for teachers performing unsatisfactorily, Professional development for teachers with new and 10 years' experience, and Teacher Certificate Renewal System every ten years. The method of study composed of the literature search and interview. The System Analysis[input-process-output-feedback] is used as a model of the analyze the policy process[backgrounds & T.O-quality management system-japanese teacher's reaction & implications to korea] The Central Council for Education(CCE;2012.8.28) has released "An Outline of Measures for Comprehensively Improving the Quality and Ability of Teachers throughout their career". This report can be regarded as a blueprint for the teacher reform policy in japan. As a conclusion, Ten lessons is proposed for the Korea policy improving the quality and ability of teachers(training, employment, and development).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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