1991년 1월부터 1993년 2월까지 영남대학교 의과대학 부속병원에서 출생하여 신생아 중환자실에서 치료 받았던 12명의 미숙아를 대상으로 무작위로 대조군과 rHuEPO투여군으로 나누어 체중 kg당 100unit의 rHuEPO을 1주간 3회씩 4주동안 피하주사하고 rHuEPO투여 시작과 같이 체중 kg당 3mg의 elemental iron을 매일 경구투여 하였고 출생 후 수유가 가능할 때 부터 25unit씩의 비타민 E를 매일 경구투여 하였다. 망상적혈구, 혈색소치, 백혈구수, 혈소판수, 혈청 철, ferritin, 총 철결합능, erythropoietin농도, 활력징후, 체중, 간기능, 신장기능 및 피하주사부 위의 국소 부작용을 비교해 본 결과 치료 시작전 erythropoietin의 농도는 대조군과 rHuEPO투여군 사이에 차이는 없었으며 모두 정상 범위에 속했고 rHuEPO투여군에서는 치료 1주에서 3주사이에 급격한 망상적혈구의 경향이 관찰되었고 전반적으로 혈색소치, 백혈구수, 혈소판수, 혈청 철, ferritin, TIBC등에서는 차이가 없었다. 그리고 체중증가 및 활력증상, 간기능, 신장기능에서도 대조군과 rHuEPO투여군 사이에서 차이가 없었고 rHuEPO 투여 기간 동안 계속 정상적으로 유지되었다. 결론적으로 우리의 연구에서는 rHuEPO치료로 뚜렷한 혈색소치 및 헤마토크리의 증가를 볼 수 없었지만 망상적혈구가 치료 초기에 증가되는 경향이 관찰되었고 치료로 인한 특이할 만한 부작용이 없었으므로 첫째, 치료 기간 중의 예견할 수 없이 발생하는 패혈증, 무시할 수 없는 채혈량과 spontaneous endogenous erythropoietin생산이 rHuEPO의 반응에 미치는 영향, 둘째. rHuEPO의 가장 높은 효과를 얻기 위한 보다 적절한 투여용량, 기간 및 rHuEPO의 투여를 출생 후부터 바로 예방 목적으로 할 것인지 또는 출생 몇 주 후부터 rescue therapy로 할 것인지 투여 시작 시기, 셋째, 용량의 증가 및 감소에 동반되는 부작용의 정도등을 고려해서 앞으로 더 많은 미숙아를 대상으로 지속적인 연구를 한다면 rHuEPO을 이용해 더욱 더 활발하고 효과적으로 미숙아 빈혈을 치료할 수 있으리라 기대한다.
Bacillus subtilis BB-1 (KFCC l1344P)으로부터 분리된 혈전용해효소 유전자 (BCF-1)를 대량발현 벡터인 pEB 벡터에 크로닝하여 순수분리 된 혈전용해효소를 rat 경구 투여하여 출혈시간, 혈액의 응고, serum의 혈전용해능 등에 대한 in vivo 실험을 실시하였으며, 혈전용해효소의 단회경구투여에 따른 독성을 검사하였다. 효소의 경구투여에 따른 rat의 출혈시간에서는 대조군에 비하여 모든 경구 투여군에서 출혈시간이 유의적으로 약 1.75배 이상 길게 나타남을 확인하였고(P<0.05), 혈액의 출혈시간 또한 활발히 진행됨을 관찰하였다. 혈액으로부터 분리된 serum의 혈전용해작용 있어서는 경구투여 후 1시간부터 채혈한 혈액 내에서 혈전용해효소의 활성이 검출되기 시작하여 3시간째까지 높은 활성을 보였으며 4시간째부터 서서히 활성이 감소하는 것을 확인하였고 혈액의 응고 역시 대조군에 비하여 경구 투여군에서 상당히 지연되는 것을 알 수 있었다. Western blot에 의한 효소 검출에서는 경구 투여군에서 30,000 Da 크기의 단일밴드를 확인하였으며, 혈전용해효소의 rat에 대한 단회경구투여 독성실험에서 중량의 변화, 장기의 이상여부, 사망률 등에서 어떠한 이상이나 병변이 발견되지 않았다. 이상의 결과로 동물실험을 통한 혈전용해 효소의 경구투여에 의한 작용을 혈액 내에서 확인 할 수 있었으며, 본 효소의 단회 경구투여 시의 독성은 전혀 없음을 확인할 수 있었다.
The purpous of the study was to find an effect of oral administered medium chain triglyceride(MCT) diet on the serum and enzyme activities of Spraque-Dawly rats when they were oral fed with MCT, soybean oil and palm oil. The result was as follow. 1) The body weight gains in MCT diet group was lower than that of the all experimental group. 2) Total cholesterol levels in serum and liver of MCT diet group were very lower than that of the all experimental groups. 3) HDL-cholesterol level of MCT diet group was higher than that of the all experimental group except normal group and VLDL, LDL-cholesterol levels was very higher. 4) TG and PL levels of MCT diet group higher than that of the control group. 5) The activities of GOT with soybean oil diet group and of GPT with MCT diet group were lower than that of the all experimental group. 6) HDL-levels in the serum lipoprotein of MCT diet group was increased and LDL levels was decreased.
A polyvalent live Escherochia coli oral vaccine were prepared by the use of 5 field isolates of enteropathogenic E. coli, serotypes 08 : K87, K88a, b ; 0138 : K81, K88a, c ; 0141 : K85a, b, K88a, b ; 0149 : K91, K88a, c and 0157 : K'V17', K88a, c. Some field experiments were conducted to investigate the effectiveness of the polyvalent live E. coli oral vaccine in the prevention of neonatal colibacillosis in piglets suckling orally vaccinated sows. Seventy-nine pregnant sows in an intensive pig farm were vaccinated with oral vaccine 4 weeks prior to farrowing and 19 sows were chosen for control. The piglets suckling vaccinated sows showed a significant protection against neonatal enteric colibacillosis during the 2 weeks observation period from the farrowing but no significant differences in protection between vaccinated and control group were observed with piglets older than 15 days.
본 연구는 스트렙토조토신에 의해 유도한 당뇨병, 알코올성 간 손상 실험용 랫드에서 혈액 지질 감소, 당뇨병 및 알코올성 간 손상 예방에 미치는 지장김치 추출물의 경구투여 효과를 조사하였다. 당뇨병 모델동물에서, 혈액 지질 프로파일, ALT, AST 수준은 DC (당뇨병 대조군)와 비교할 때 김치추출물 투여군에서 낮아졌으며 혈당은 DCJK (DC+지장김치 추출물 경구투여군)가 DCCK (DC+일반김치 추출물 경구투여군)에 비해 낮았다. 인슐린 수준은 NC (정상대조군), DCJK > DCCK > DC 순서로 높게 나타났다. 알코올성 간 손상 모델동물에서, 혈액 ALT, AST, 빌리루빈 농도는 AC (알코올 대조군, 일일 소주 1병 섭취군) > ACCK (AC+일반김치 추출물 경구투여군) > ACJK (AC+지장김치 추출물 경구투여군) > NC 순서로 낮았다. 간 조직의 임상병리학적 소견은 AC에서 가장 심각한 손상을 보였으나 소주1병과 김치 추출물 특히, 지장김치 추출물 경구투여군은 일반김치 추출물 경구투여군에 비해서 회복되는 속도가 개선되었다. 결과는 당뇨병 및 알코올성 간 손상 모델동물에서 지장김치의 섭취가 혈액 지질 프로파일, 혈당, ALT, AST 수준을 낮추고 인슐린 분비능력을 개선하여 줌으로써 항당뇨 및 알코올성 간 손상 보호효과를 갖는다는 사실을 보여준다.
인체에 널리 사용되고 있는 Aspirin (ASA)을 양식 뱀장어 (Anguilla japonica) 약욕 또는 경구 투여한 다음 혈장 중의 ASA와 salicylic acid (SA)의 양을 HPLC로 측정하였다. 뱀장어 혈장은 0.2 M HCl과 0.2 M orthophosphoric acid로 산성화시킨 다음 acetonitrile과 혼합하여 ASA와 SA를 추출하였다. 2약제의 정량은 Novapak C18과 UV detector (237 nm)가 장착된 HPLC로 측정하였다. 이 때 이동상은 740 ㎖의 증류수, 900 ㎕의 orthophosphoric acid와 180㎖의 acetonitrile을 사용하였다. ASA, SA 및 내부 표준물질로 사용한 2-methylbenzoic acid (MBA)의 retention time은 각각 4.8분, 8.4분 및 11.4분이였으며, 측정한계 농도는 ASA가 0.05 ㎍/㎖, SA는 0.01 ㎍/㎖였다. 혈장으로 부터의 평균회수율은 ASA가 70.8-99.6%, SA는 95.2-100.3%였다. 뱀장어에 ASA를 약욕 (20 ppm) 또는 경구투여 (50 ㎎/kg BW) 한 다음 채취한 혈장을 시료로 이 방법으로 ASA와 SA의 양을 측정한 결과 단지 SA만 검출되어졌고, ASA는 검출되지 않았다. 이는 ASA가 혈장내에서 신속히 SA로 분해되기 때문으로 판명되었다. 또 ASA에 약욕시킨 경우에는 약욕 후 3시간후에 혈장내의 SA양이 최고치에 도달하였으며, 경구투여 한 경우에는 7일후에 최고치에 도달하였다. 한편 ASA를 투여한 다음 ASA 무첨가 수조에 수용한 결과 2투여 경로 모두 48시간 이후에는 SA가 0.02-0.03 ㎍/㎖이 검출되어 잔류의 문제도 거의 없었다. HPLC를 이용한 혈장내의 ASA와 SA의 검출법은 신속하며 정확한 방법으로 뱀장어 이외의 어류에도 활용 가능할 것으로 생각된다.
본 연구는 김치 유래 유산균인 Leuc. citreum GR1의 안정성을 평가하고자 Leuc. citreum GR1을 SD 계통의 흰쥐에게 4주간 반복 경구투여를 통하여 장기투여에 의한 안전성을 확인하고자 식품의약품안전청의 의약품 등의 독성시험기준에 따라 실시하였다. SD 계열의 암수 흰쥐에 시험물질을 0, 500, 1,000 및 2,000 mg/kg/day의 용량으로 4주간 반복 경구투여 한 후 사망률, 일반증상, 체중변화, 사료섭취량, 수분섭취량, 부검소견, 장기무게의 변화, 혈액학적, 혈액생화학적 및 병리조직학적 검사를 실시하였다. 모든 시험군에서 시험기간 시험물질로 인한 일반증상 및 사망동물이 관찰되지 않았다. 전 시험기간 동안 Leuc. citreum GR1의 4주간의 경구투여 결과 체중이 지속적으로 증가되었지만 대조군과 유의성 있는 변화가 관찰되지 않았다. 또한 장기의 육안적 관찰, 장기 중량변화, 혈액학적, 혈액생화학적 및 병리조직학적 검사에서도 모든 시험물질 투여군이 대조군과 유의성이 있는 차이를 보이지 않았으며, 모두 정상 범위를 벗어나지 않아 시험물질에 기인하는 이상 소견을 발견할 수 없었다. 이상의 결과로 보아 4주 반복투여 독성시험 결과 김치 유산균인 Leuc. citreum GR1은 저독성의 안전한 물질로 판정되며, 본 시험물질의 무독성량은 암수 모두 2,000 mg/kg/day 이상을 상회하는 것으로 판단되었다.
살충제 Monocrotophos의 독성평가(毒性評價)를 위하여 흰쥐에 $1{\sim}4$주동안 투여후 급성(急性) 및 아급성(亞急性) 독성검정(毒性檢定) 그리고 혈액성상(血液性狀) 및 혈장중(血漿中) Cholinesterase(ChE)를 측정(測定)하여 그 변화(變化)를 구명(究明) 하므로서 농약중독(農藥中毒)에 대(對)한 기초자료(基礎資料)를 얻고자 본(本) 시험(試驗)을 실시(實施)한 결과(結果)는 다음과 같다. 1. Monocrotophos의 급성경구(急性經口) 반수치사(半數致死) 약량(藥量)$LD_{50}$은 흰쥐에서 암, 수 각각(各各) 5.1, 8.7mg/kg이었고 복강내(腹腔內) 투여시(投與時)에는 암컷이 4.9mg/kg 수컷이 6.0mg/kg 이었다. 2. Monocrotophos는 경구(經口)에 6.4mg/kg, 복강내(腹腔內) 4.0mg/kg 투여시(投與時)에 4시간(時間)이 지난후 암, 수 모두의 혈장(血漿) ChE 활성도(活性度)를 최대(最大)로 억제(抑制) 시켰고 투여(投與) 24시간(時間) 이후(以後)부터는 점차 회부(回復) 되었다. 3. Monocrotophos를 흰쥐에 4주간(週間) 경구투여(經口投與) 할 때 3.5mg/kg/day 투여군(投與群)에서는 대조군(對照群)에 비(比)해 암, 수 모두 체중증체량(體重增體量)과 수컷에서 사료섭취량이 현저하게 감소(減少) 되었다. 4. 약제 투여시(投與時)에는 혈장(血漿) ChE 활성도(活性度)를 크게 억제(抑制)시켰으나 투여(投與) 중단(中斷)후에는 2주(週)가 지나면서 거의 회부(回復)되었다. 5. 약제투여(藥劑投與)된 쥐의 적혈구(赤血球), 백혈구(白血球), Ht치(値), Hb량(量)에 대(對)한 혈액상(血液狀) 변화(變化)는 거의 없었다.
본 연구는 김치로 분리한 우량 종균인 Leu. citreum GJ7의 급성독성을 시험하기 위하여 ICR 마우스에게 1회 Leu. citreum GJ7을 복강 또는 경구투여한 후 사망률, 체중의 변화, 일반 및 임상증상, 육안적 소견 등을 관찰하였다. 복강투여 후 24시간 관찰한 결과, 일부 Leu. citreum GJ7 투여군에서 부분적으로 사망례가 관찰은 되었으나 나머지 시험동물은 계속 생존하여 2,500 mg/kg까지는 평균치사량을 산출할 수 없었다. 또한 5,000 mg/kg을 14일 동안 경구투여하였을 경우에는 사망례가 없었으며, 특이한 임상증상도 관찰되지 않았다. 복강 혹은 경구투여한 후 마우스의 체중변화에 있어서도 대조군과 Leu. citreum GJ7 투여군 사이에 유의성 있는 차이는 보이지 않았으며, 생존동물의 부검결과에서도 내부 장기의 육안적 이상이 관찰되지 않았다. 따라서 Leu. citreum GJ7은 본 실험의 모든 조건에서 $LD_{50}$이 복강투여 시 2,500 mg/kg, 경구투여 시 5,000 mg/kg 이상인 저독성의 안전한 물질로 사료된다.
일반적으로 약물은 경구투여를 우선으로 한다. 그것은 환자에게 투여하기가 가장 쉬운 방법이기 때문이다. 하지만 경구투여를 하는 경우 인체에서 약물이 분해 및 흡수되면서 거치는 과정 중에 상당수가 없어지고 약효를 발휘하는 부분은 그다지 많지 않다. 그러다 보니 적절한 혈중 농도를 유지하기 위하여 실제 필요한 약물의 양보다 많은 양을 투여하게 되므로, 부수적으로 따라다니는 약의 부작용 또한 증가하게 된다. 피부질환의 경우에는 약물의 흡수를 돕도록 하는 많은 첨가물과 함께 개발된 외용제가 있다. 대부분 크림형태로 시판되고 있으며 약효를 내는 용량을 피부에 도포하였을 때 전신으로 흡수되는 양은 많지 않아 부작용이 적은 것이 장점이다. 구강점막은 자연적인 barrier가 많은 피부와 달리 혈관까지 도달하는 길이가 짧고, 도포가 어려운 장점막과 달리 접근성이 용이하다. 따라서 도포용 약물의 개발이 많이 시도되고 있으나 타액에 의해 많은 부분이 세척되어 없어지거나 타액속의 물질들로 인하여 변질이 일어나고 있어 피부와 같은 크림형 제제의 개발이 어려운 실정이다. 따라서 현재 판매되고 있는 구강내 외용제는 그 수가 매우 제한되어 있다. 도포용 약물을 개발하여 오래 구강점막에 부착하게 하는 것이 용이하지 않으므로 임상가들이 약물을 용액 형태로 사용하여 환자에게 도포하고 있다. 이러한 용액을 머금고 있다가 뱉어내게 하는 가글형태의 약물도포 또한 그 약효가 인정되고 있다. 따라서 현재 임상에서 도포형태로 사용하고 있는 약물의 종류와 효과, 그리고 일반적인 경구투여 약물을 적절한 용해제를 선택하여 용액으로 사용하였을 때 임상적으로 기대할 만한 약효를 발휘할 수 있을지에 대하여 연구해 본다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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