Objectives This study investigated the effect of purified safflower (Carthamus tinctorius Linne) and safflower seed (Carthamus tinctorius L. seed; CS) extract, using hot water and ethanol extract methods , on the osteogenic differentiation of MC3T3E1 cells.Methods The safflower and safflower seed were extracted with hot water and ethanol. The samples were concentrated by a rotary evaporator and then freeze-dried using a freeze-dryer. The MC3T3E1 cells were propagated and maintained in DMEM (Gibco) containing 10% FBS and a 1% antibiotic antimycotic solution. To induce osteogenic differentiation, the cells were treated for 14 days with DMEM with 10 mM β-glycerophosphate and 50 μM ascorbic acid. Extract doses were confirmed by the results of an MTT assay, and treatment of the extracts was performed in a differentiation medium every two days. The ALP staining and activity were tested after osteogenic differentiation for five days, and after 14 days, osteogenic differentiation was determined by alizarin red S staining. The mRNA expressions of osteogenic-related genes were quantified using quantitative real-time PCR.Results In the results of the MTT assay, all concentrations of safflower extracts had no toxicity in the MC3T3El cells. But in the groups of 100 ng/ml and 200 ng/ml concentrations of safflower seed extracts, the cell viability was significantly reduced by up to 40-50%. So we fixed the treatment concentration of the extract at 50 ng/ml. In the ALP and alizarin red S staining, all extract groups increased osteogenic differentiation compared with the control group. The water-safflower extract group showed the highest mRNA level of Alp, Runx2, and Dlx5 genes. The mRNA level of Ocn, an osteogenic gene related to late-stage differentiation, in the ethanol-safflower extract group increased the mineralization more significantly than in other groups.Conclusions These data suggest that the extract of safflower increases the osteoblastic differentiation activates of MC3T3E1 cells like the extract of safflower seed. The water-extract and ethanol-extract of safflower have effects on different stages of osteogenesis in MC3T3El. Not only safflower seed but also safflower will be useful therapeutic reagents for age-associated chronic diseases such as osteoporosis.
The effects of vinegar, alcohol and ascorbic acid on the color, microorganism, sensory properties and flavor pattern of minced ginger (MG) were investigated during storage for 28 days at $30^{\circ}C$. The values of L (lightness), a (redness) and b (yellowness) of the control (T-0) and all the treatments changed slightly at the initial stage of storage, however the elapse of time accelerated the changes. The total bacterial counts of T-0 showed $5.37{\times}10^7\;CFU/g$ at the initial stage, but the MG-treatments decreased the bacteria above 4 log compared to T-0. It was showed that the additives were effective for inhibition of the growth of microorganism. Sensory properties of flavor intensity test showed no significant difference between T-0 and MG-treatments (p < 0.05). The result of volatile flavor contents of electronic nose analyzer (ENZ) showed that MG-treatments (T-I, T-II, T-III) was recognized stronger than non-treatment at the initial stage, but the change of flavor compound were stabilized soon regardless of type or quantity of additives during total storage period at $30^{\circ}C$.
This study was carried out in order to investigate the functional properties of 50% methanol extracts from four parts (root, stem, leaf and fruit) of Acanthopanax sessiliflorus by means of measuring the contents of eleutheroside B, E, and total polyphenols as well as determining electron donating ability (EDA), nitrite scavenging ability (NSA), and anticancer activity. The highest contents of eleutheroside B and E were found in the fruit (538.99 ${\mu}g/g$) and the stem (556.00 ${\mu}g/g$). The root extract demonstrated the highest polyphenol content (2.97 mg/g). EDA of the stem and root extracts were 90.21% and 85.71%. All of the extracts showed 81.5-93.0% of NSA at pH 1.2. In addition all extracts indicated no cytotoxicity to normal cell line (DC2.4). The root extract had a 23% inhibitory effect against the stomach cancer cell line (SNU-719). These results revealed that 50% methanol extracts from A. sessiliflorus can be used as a potential resource of nutraceuticals.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.37
no.6
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pp.805-809
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2008
The objective of this study was to compare the aroma characteristics and antioxidant activity of Chrysanthemum indicum Linne (CIL), C. morifolium Ramat (CMR) and C. zawadskii var Latilobum (CZL). The volatile compounds were extracted by simultaneous steam distillation extraction and identified with gas chromatography/mass spectrometer. The major volatile compounds of Chrysanthemum sp. were camphene, 1,8-cineole, benzene, pinocarvone, bicyclo-2,2,1-heptan-2-ol, ${\beta}$-caryophyllene, 3-cyclohexen-1-ol, ${\gamma}$-curcumene, zingiberene and ${\beta}$-bisabolene. The DPPH radical scavenging activity (EDA, %) of volatile compounds in CIL, CMR and CZL were 30.57, 46.36, and 51.72%/g sample, respectively. The ascorbic acid equivalent antioxidant capacity (AEAC) of volatile compounds were 34.99, 35.31, and 38.48 mg AEAC/g, respectively.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.35
no.4
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pp.205-212
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2009
Purpose : The purpose of this study was to examine the expression of various angiogenic factors during osteoblastic differentiation of periostealderived cells and the effects of osteogenic inductive medium of periosteal-derived cells on the proliferation of endothelial progenitor cells. Materials and methods : Periosteal-derived cells were obtained from mandibular periosteums and introduced into the cell culture. After passage 3, the cells were divided into two groups and cultured for 21 days. In one group, the cells were cultured in the DMEM supplemented with osteogenic inductive agent, including 50g/ml L-ascorbic acid 2-phosphate, 10 nM dexamethasone and 10 mM -glycerophosphate. In the other group, they were cultured in DMEM supplemented without osteogenic inductive agent. VEGF isoforms, VEGFR-1, VEGFR-2, and neuropilin-1 mRNA expression was observed. Human umbilical cord blood-derived endothelial progenitor cell proliferation was also observed. Results : The expression of VEGF isoforms was higher in osteogenic inductive medium than in non-osteogenic inductive medium. The expression of VEGFR-2 was also higher in osteogenic inductive medium than in non-osteogenic inductive medium. However, the expression of VEGFR-1 and neuropilin-1 was similar in both osteogenic inductive medium and non-osteogenic inductive medium. In addition, conditioned medium from differentiated periosteal-derived cells stimulated human umbilical cord blood-derived endothelial progenitor cell numbers compared to conditioned medium from non-differentiated periosteal-derived cells. Conclusion : These results suggest that in vitro osteoblastic differentiation of periosteal-derived cells has angiogenic capacity to support endothelial progenitor cell numbers.
Purpose : To investigate the effects of irradiation on transforming growth factor ${\beta}_1$ (TGF-${\beta}_1$) mRNA expression and calcific nodule formation in MC3T3-E1 osteoblastic cell line. Materials and Methods : Cells were cultured in alpha-minimum essential medium ($\alpha$-MEM) supplemented with 10% fetal bovine serum and antibiotics. When the cells reached the level of 70-80% confluence, culture media were changed with $\alpha$-MEM supplemented with 10% FBS, 5 mM $\beta$-glycerol phosphate, and $50\;{\mu}g/mL$ ascorbic acid. Thereafter the cells were irradiated with a single dose of 2, 4, 6, 8 Gy at a dose rate of 1.5 Gy/min. The expression pattern of TGF-${\beta}_1$ mRNA, calcium content and calcific nodule formation were examined on day 3, 7, 14, 21, 28, respectively, after the irradiation. Results : The amount of TGF-${\beta}_1$ mRNA expression decreased significantly on day 7 after irradiation of 4, 6, 8 Gy. It also decreased on day 14 after irradiation of 6, 8 Gy. and decreased on day 21 after irradiation of 8 Gy. The amount of calcium deposition decreased significantly on day 7 after irradiation of 4, 8 Gy (P < 0.01) and showed a decreased tendency on day 14, 21 after irradiation of 4, 6, 8 Gy. The number of calcific nodules was decreased on day 7 after irradiation of 4, 8 Gy. Conclusion: Irradiation with a single dose of 4, 6, 8 Gy influences negatively the bone formation at the molecular level by affecting the TGF-${\beta}_1$ mRNA expression that was associated with proliferation and the production of extracellular matrix in MC3T3-E1 osteoblastic cell line.
This study was conducted to investigate the quality and characteristics of semi-dried persimmons soaked in different concentrations of sugar solution and stored at $7^{\circ}C$ for 20 days. The L value and chroma value were significantly higher in S5 and S10 compared to the other concentrations of sugar solution. The ${\Delta}E$ and browning degree were increased according to the increase in concentration of sugar solution. Total sugar, reducing sugar, and sugar free contents were higher in the control (semi-dried persimmon) than those in S0, but they increased according to the increase in concentration of sugar solution. Polyphenol oxidase and peroxidase activities were decreased according to the increase in sugar solution concentration, which were highest in S0 among other semi-dried persimmons soaked in sugar solutions. Total ascorbic acid content was highest in S10 (12.29 mg/g), followed by S0 (2.54 mg/g), S5 (7.76 mg/g), S15 (6.05 mg/g), and S20 (5.05 mg/g). Total polyphenols, flavonoids and proanthocyanidins contents were the highest in S10 compared to other semi-dried persimmons soaked in sugar solutions. Furthermore, the same tendency was observed with DPPH radical scavenging ability. These results showed that 10% sugar solution could be applied to semi-dried persimmons in order to achieve high quality, nutritional value, and browning inhibition.
The fractions of Ulva lactuca were studied to verify the antioxidant activities. The fractions from the ethanol extract of U. lactuca were prepared by the systematic extraction procedure with the solvents such as hexane, ethyl ether, ethyl acetate, butanol and $H_2O$. Furthermore, ethyl ether, ethyl acetate and aqueous fractions of U. lactuca were purified using HPLC. The antioxidant activities of purified samples from ethyl ether, ethyl acetate, and aqueous fractions were investigated using 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazil (DPPH). L-ascorbic acid, a positive control showed the highest DPPH radical scavenging activity. In addition, purified sample from aqueous fraction also showed relatively high activity. Purified sample from ethyl acetate fraction showed moderate activity, but purified sample from ethyl ether fraction showed the lowest activity. Dose dependent patterns were observed on all three samples tested. The lipid peroxidation inhibition activities of these three purified samples were also investigated. Purified sample from ethyl ether fraction of U. lactuca showed the highest activity and as strong activity as that of $\alpha-tocopherol$, a positive control. These results suggest that U. lactuca may be a useful candidate for a natural antioxidant agent.
Sul Ok Ju;Chung Dae Kyun;Han In Seob;Jeong Choon Soo
Korean Journal of Microbiology
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v.41
no.1
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pp.81-86
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2005
One of the endoglucanases, F-I-III, was purified from the culture filtrate of T. sp. C-4 through procedures including chromatography on Sephacryl S-200, DEAE-Sepharose A-50, and Chromatofocusing on Mono-P (FPLC). The molecular weight of the enzyme was determined to be about 56,000 Da by SDS-PAGE, and pI of 4.9 by analytical isoelectric focusing. F-I-III showed the highest enzyme activity at $55^{\circ}C$, and the pH optimum of the enzyme was 5.0. There was no loss of activity when the enzyme was incubated at $50^{\circ}C$ for 24 hours. The specific activity of the enzyme F-I-III toward the CMC was 315.4 U/mg. The Km value for $PNPG_2$ of F-I-III was 2.69 mM. N-terminal sequence of F-I-III was analyzed to be QPGTSTPEVHPKKLTTYK. It showed $95\%$ of homology to that of EGI from T. reesei. The presence of some metal ions (1 mM) had only a little effect on CMCase activity. The treatment of the reducing agents resulted in the increase of endoglucanase activity.
Kim, Yejin;Kim, Hyemin;Bae, Seyeon;Choi, Jiwon;Lim, Sun Young;Lee, Naeun;Kong, Joo Myung;Hwang, Young-Il;Kang, Jae Seung;Lee, Wang Jae
IMMUNE NETWORK
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v.13
no.2
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pp.70-74
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2013
L-ascorbic acid (vitamin C) is one of the well-known antiviral agents, especially to influenza virus. Since the in vivo antiviral effect is still controversial, we investigated whether vitamin C could regulate influenza virus infection in vivo by using Gulo (-/-) mice, which cannot synthesize vitamin C like humans. First, we found that vitamin C-insufficient Gulo (-/-) mice expired within 1 week after intranasal inoculation of influenza virus (H3N2/Hongkong). Viral titers in the lung of vitamin C-insufficient Gulo (-/-) mice were definitely increased but production of anti-viral cytokine, interferon (IFN)-${\alpha}/{\beta}$, was decreased. On the contrary, the infiltration of inflammatory cells into the lung and production of pro-inflammatory cytokines, tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ and interleukin (IL)-${\alpha}/{\beta}$, were increased in the lung. Taken together, vitamin C shows in vivo antiviral immune responses at the early time of infection, especially against influenza virus, through increased production of IFN-${\alpha}/{\beta}$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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