• 대한본초학회지
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• 제23권4호
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• pp.121-134
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• 2008

Objectives: Melia toosendan(MT) has been used as a traditional Korean herbal medicine, and today it is used as a medication for colic, side aches, heartache and other disorders of liver. The aim of this study was to determine whether fractionated extracts of MT inhibit free radical generation such as DPPH radical, superoxide radical and nitric oxide, production of nitrite, an index of NO, PGE2, iNOS, COX-2 and proinflammatory cytokines in lipopolysaccharide(LPS)-treated RAW 264.7 macrophages. Methods: MT extract prepared with methanol, and then fractionated with hexane, dichloromethane, ethylacetate, n-butanol and water. Inhibitory effect of MT onto free radical generation was determined by measuring DPPH, superoxide anions and nitric oxide scavenging activities in vitro. Cytotoxic activity of extracts on RAW 264.7 cells was measured using 5-(3-caroboxymeth-oxyphenyl)-2H-tetra-zolium inner salt(MTS) assay. Intracelluar oxidation was analysed by DCF-DA assay. The nitric oxide(NO) production was measured by Griess reagent system. The levels of iNOS and COX-2 expression were confirmed by western blot. And pro inflammatory cytokines were measured by ELISA kit. Results: Our results indicated that fractionated extracts, especially dichloromethane and ethyl acetate extracts, significantly inhibited free radical generation, the LPS-induced $H_2O_2$, NO, $PGE_2$ production and iNOS, COX-2 expression accompanied by an attenuation of TNF-${\alpha}$, IL-1${\beta}$ and IL-6 formation in macrophages. Conclusions: These results indicate that dichloromethane and ethyl acetate extracts of MT have potential as an agent of chronic inflammatory diseases.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제45권6호
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• pp.1265-1276
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• 1998

연구배경 : NO는 생체내에서 생성되는 유리 반응기로서 혈관 긴장도외 완화, 혈소판 응집 저지, 혈관 내피세포에 대한 백혈구 유착 방해, 감염에 대한 숙주 방어 등에서 중요한 역할을 한다. NO는 전이 금속(transition metal), 산소, 기타 반응기 등과 쉽게 반응하므로 여러 생체내 반응에 관여하여 산화제 손상을 촉진시키거나 감소시킬 가능성이 제기되었다. 급성 폐손상 및 급성 호흡곤란 증후군에서는 폐혈관 내피세포 및 호중구의 상호작용 및 산화제 손상이 매우 중요한 병인으로 알려져 있으며, NO를 급성 호흡곤란 증후군에서 흡입하여 치료하는 것은 산화제에 의한 혈관 내피세포 손상에서 외부로부터 NO를 공급하는 상황이다. 본 연구에서는 외인성 NO의 공여나 내인성 NO 억제가 산화제에 의한 폐미세혈관 내피세포의 손상을 악화시키거나 완화시킬 수 있는지를 관찰하였다. 방 법 : 산화제에 의한 세포손상은 백서 폐미세혈관 내피세포에 과산화수소를 생성하는 glucose oxidase(GO)를 투여하여 야기시키고 이를 $^{51}Cr$ 방출 측정으로 평가하였다. 산화제에 의한 폐혈관 내피세포의 손상에 외인성 NO가 미치는 영향은 NO 공여물인 SNAP 혹은 SNP를 산화제와 동시에 투여하여 평가하였다. 산화제에 의한 폐혈관 내피세포의 손상에 내인성 NO 억제가 미치는 영향은 NOS 길항제인 L-NMMA을 추가로 투여하여 평가하였다. INF-$\gamma$, TNF-$\alpha$ LPS 등으로 내인성 NO 생성을 자극한 후 L-NMMA의 효과도 관찰하였으며, NO 공여물이나 내피세포로 부터의 NO생성은 nitrite 측정으로 평가하였다. 결 과 : 백서 폐 미세혈관 내피세포에서 $^{51}Cr$ 방출이 GO 5mU/ml에서 $8.7{\pm}0.5%$, 10 mU/ml에서 $14.4{\pm}2.9%$, 15 mU/ml에서 $32.3{\pm}2.9%$, 20 mU/ml에서 $55.5{\pm}0.3%$. 30 mU/ml에서 $67.8{\pm}0.9%$로 GO 15 mU/ml 이상에서 대조군의 $9.6{\pm}0.7%$에 비하여 유의하게 증가하였으며 (P<0.05; n=6). 이에 0.5mM L-NMMA를 추가하여도 영향이 없었다. INF-$\gamma$ 500 U/ml, TNF-$\alpha$ 150 U/ml, LPS 1 ${\mu}g/ml$을 배양액에 첨가하여 24시간 경과시 배양액 중 nitrite 농도가 $3.9{\pm}0.3\;{\mu}M$로 증가하였으며, 이에 L-NMMA 0.5 mM을 첨가하면 $0.2{\pm}0.l\;{\mu}M$로 유의하게 억제되었다(p<0.05 ; n=6). INF-$\gamma$, TNF-$\alpha$ LPS 자극후 GO에 의한 $^{51}Cr$ 방출에 L-NMMA는 영향을 주지 않았다. GO 20 mU/ml에 의한 $^{51}Cr$ 방출이 SNAP 100 ${\mu}M$의 추가로 대조군 수준으로 현저히 억제되었으나, SNP, potassium ferrocyanide, potassium ferricyanide 등의 추가는 영향이 없었다. Hanks' balanced salt solution(HBSS) 중의 SNAP 100 ${\mu}M$로 부터 4 시간 동안 nitrite가 $23.0{\pm}1.0\;{\mu}M$ 농도로 축적되었으나, SNP는 1 mM에서도 nitrite가 검출되지 않았다. SNAP은 HBSS 중의 GO가 과산화수소를 시간 경과에 따라 생성하는데 영향이 없었다. 결 론 : 결론적으로 폐미세혈관 내피세포에서 GO에 의하여 생성되는 과산화수소로 산화제 손상을 야기하였으며, NO 공여물인 SNAP으로부터 제공된 외연성 NO가 산화제 손상을 방지하고 이 보호효과는 NO 방출 능력에 의할 가능성이 시사되었다. 따라서 생체내 환경에 따라 외인성 NO가 내피세포에 대한 산화제 손상에 보호 효과가 있을 수 있다고 추정된다.

• 대한약침학회지
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• 제22권4호
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• pp.210-224
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• 2019

Rheumatoid arthritis is a severe autoimmune disorder, related to joints. It is associated with serious cartilage destruction. This causes disability and reduces the excellence of life. Numerous treatments are existed to combat this disease, however, they are not very efficient and possess severe side effects, higher doses, and frequent administration. Therefore, newer therapies are developed to overcome all these limitations. These include different monoclonal antibodies, immunoglobulins, small molecules used for immunotherapy and transgenes for gene therapy. One of the main goals of these new generation therapeutics is to address the underlying distressing biological processes by specifically targeting the causative agents with fewer systemic side effects and greater patient console. It is very fortuitous that loads of progressive investigations are going on in this field and many of them have entered into the successful clinical trial. But till date, a limited molecule has got FDA clearance and entered the market for treating this devastating disease. This review highlights the overview of conventional therapy and advancements in newer therapeutics including immunotherapy and gene therapy for rheumatoid arthritis. Further, different novel techniques for the delivery of these therapeutics of active and passive targeting are also described.

• 생물정신의학
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• 제15권3호
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• pp.175-185
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• 2008

Accumulating evidence has suggested the existence of reciprocal communication between immune, endocrine, and neurotransmitter system. Cytokine hypothesis of depression implies that increased pro-inflammatory cytokine such as -1, IL-6, IL-12, TNF-${\alpha}$, and IFN-${\gamma}$ in major depression, acting neuromodulators, play a key role in the mediation of behavioral, neuroendocrine, and neurochemical disturbances in depression. Concerning the relation between cytokines and serotonin metabolism, pro-inflammatory cytokines have profound effects on the metabolism of brain serotonin through the enzyme indoleamine-2,3-dioxygenase(IDO) that metabolizes tryptophan, the precursor of 5-HT to neurodegenerative quinolinate and neuroprotective kynurenate. The neurodegeneration process is reinforced by the neurotoxic effect of the hypercortisolemia during depression. From this perspective, it is possible that efficacy of antidepressants in the treatment of depression may, at least in part, rely on downregulation of pro-inflammatory cytokine synthesis. So, the use of cytokine synthesis inhibitors or cytokine antagonists may be a new treatment approach in depression. However, at present the question whether cytokines play a causal role in the onset of depression or are mere epiphenomena sustaining depressive symptoms remains to be elucidated. Nevertheless, cytokine hypothesis has created new perspectives in the study of psychological and pathophysiological mechanism that are associated with major depression, as well as the prospect for developing a new generation antidepressants.

• 동의생리병리학회지
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• 제21권6호
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• pp.1491-1498
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• 2007

NC/Nga mice with contact dermatitis induced using DNCB were applied with GJHB(祛風燥濕解毒方), and its influence on the expressions of IgE, immune related cytokines, and immunoglobulins were tested. The results were obtained as follows ; GJHB significantly redued the production of IgE compared to the control. GJHB significantly reduced the amount of IL-4 within the suspension of spleen cells, but significantly induced the production of $IFN-{\gamma}$, compared to the control. GJHB significantly reduced the production of IL-6 and $TNF-{\alpha}$ in the serum compared to the control. GJHB significantly suppressed the concentration of IgM, IgG2a, IgG2b in the serum. However, no significant decrease of IgG1 was observed. From the results above, GJHB suppressed the intermediate factors during the hypersensitive immune response as well as suppressing the generation of inflammation related cytokines. Therefore, anti-allergic effect of GJHB on the contact dermatitis through immune modulation was confirmed.

• 대한약침학회지
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• 제18권3호
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• pp.32-41
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• 2015

Objectives: Condurango (Gonolobus condurango) extract is used by complementary and alternative medicine (CAM) practitioners as a traditional medicine, including homeopathy, mainly for the treatment of syphilis. Condurango bark extract is also known to reduce tumor volume, but the underlying molecular mechanisms still remain unclear. Methods: Using a cervical cancer cell line (HeLa) as our model, the molecular events behind condurango extract's (CE's) anticancer effect were investigated by using flow cytometry, immunoblotting and reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR). Other included cell types were prostate cancer cells (PC3), transformed liver cells (WRL-68), and peripheral blood mononuclear cells (PBMCs). Results: Condurango extract (CE) was found to be cytotoxic against target cells, and this was significantly deactivated in the presence of N-acetyl cysteine (NAC), a scavenger of reactive oxygen species (ROS), suggesting that its action could be mediated through ROS generation. CE caused an increase in the HeLa cell population containing deoxyribonucleic acid (DNA) damage at the G zero/Growth 1 (G0/G1) stage. Further, CE increased the tumor necrosis factor alpha ($TNF-{\alpha}$) and the fas receptor (FasR) levels both at the ribonucleic acid (RNA) and the protein levels, indicating that CE might have a cytotoxic mechanism of action. CE also triggered a sharp decrease in the expression of nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells ($NF-{\kappa}B$) both at the RNA and the protein levels, a possible route to attenuation of B-cell lymphoma 2 (Bcl-2), and caused an opening of the mitochondrial membrane's permeability transition (MPT) pores, thus enhancing caspase activities. Conclusion: Overall, our results suggest possible pathways for CE mediated cytotoxicity in model cancer cells.

• 한국식품영양과학회지
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• 제37권9호
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• pp.1126-1135
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• 2008

본 연구에서는 내독소인 LPS로 산화적 스트레스를 유발시킨 BALB/c mice에 genistein을 투여하였을 때 TNF-$\alpha$, TBARS, superoxide anion 농도와 GSH, 항산화 효소계 활성, 그리고 NF-${\kappa}B$ transactivation에 미치는 영향을 조사하여 genistein이 내독소에 의한 산화적 스트레스와 염증반응을 억제하는 효과가 있는지 알아보고자 하였다. 평균체중 20 g인 BALB/c mice 암컷 120수를 30수씩 완전임의배치로 4군으로 분류하여 PBS군(대조군)은 PBS를 복강 속으로 투여 후 30분경과 후에 다시 PBS를 투여하였으며, genistein군은 genistein을 체중 kg당 200 mg으로 투여한 30분 후 PBS를 투여하였다. LPS군은 LPS를 처리한 군으로 PBS 투여 30분 후 LPS를 체중 kg당 100 mg 농도로 복강 투여하였고, genistein+LPS군은 체중 kg당 genistein 200 mg을 투여 30분 후 LPS를 체중 kg당 100 mg을 투여하였다. 마지막 투여 1시간, 4시간, 8시간 경과 후 mouse의 안와정맥으로부터 혈액을, 복강으로부터 복강대식세포와 간을 취하였다. LPS 투여 8시간 경과 후 LPS군의 ${O_2}^-$ 생성량은 현저하게 증가하였으며 geinstein+LPS군은 genistein 대조군, PBS군과 비슷한 수준을 유지하였다. 반면 SOD 활성은 geinstein+LPS군이 LPS군에 비해 유의적으로 높은 수준이었다. 혈장에서의 TNF-$\alpha$ 수준은 LPS 투여 8시간 후 genstein+LPS군이 LPS군보다 유의적으로 낮은 수준을 보였다. LPS 투여는 항산화 효소계 활성과 GSH의 수준을 감소하였으나, genistein을 투여한 genistein+LPS군은 LPS군에 비해 GSH 농도와 catalase, GSH-px, GSH-reductase 활성이 모두 유의적으로 증가하는 결과를 보였다. 간에서의 NF-${\kappa}B$ transactivation 정도는 LPS 투여 후 1시간, 4시간 경과 후에 PBS군에 비해 LPS군과 genistein+LPS군에서 유의적으로 높은 수준이었으나 8시간 경과 후 LPS군은 증가하는 반면 genistein+LPS군은 변화하지 않았다. 이상의 결과를 요약해보면 LPS의 투여는 혈장과 간의 산화적 스트레스와 염증반응을 촉진하는 것으로 나타났으며 LPS 투여 전 공급한 genistein은 LPS로 유도된 산화적 스트레스와 염증반응을 항산화 효소계 활성 증가와 NF-${\kappa}B$ transactivation 억제, TNF-$\alpha$ 생성 저하 등의 기작으로 세포내의 과산화수준을 수준을 낮추고 GSH를 증가시켜 산화적 스트레스를 억제하는 것으로 사료된다.

• 공업화학
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• 제30권5호
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• pp.569-579
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• 2019

본 연구는 송화분을 probe sonicator (PS)로 초음파 파쇄하여 water, 70% ethanol, ethanol로 추출하여 항산화, 항염증, 간 보호 효과를 측정한 연구이다. 항염증 효과는 lipopolysaccharide (LPS)로 유도된 RAW264.7 세포에서 nitric oxide(NO) 및 cytokine 생성을 측정하였다. 70% ethanol-PS군에서 NO 저해율이 $85.99{\pm}0.12%$로 가장 높게 나타났고 염증 관련 cytokine인 $interlukin-1{\beta}$ ($IL-1{\beta}$), tumor necrosis $factor-{\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$)의 결과에서도 control군에 비해 약 63, 22%로 저해율로 우수한 효능을 보였다. 간 보호 효능은 HepG2 세포에 타크린을 처리하여 glutamic oxaloacetic transaminase (GOT), lactate dehydrogenase (LDH) 생성을 측정하였다. 70% ethanol-PS군에서 GOT, LDH의 결과에서 negative control군에 비해 약 28, 13%의 높은 저해율을 나타냈다. 따라서 송화분을 70% ethanol로 초음파 파쇄하여 추출하였을 때 항산화, 항염증, 간 보호 효과가 있는 기능성 식품 소재로서의 개발 가능성이 있을 것으로 사료된다.

• 생명과학회지
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• 제27권5호
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• pp.509-516
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• 2017

들깨(Perilla frutescents (L.) Britton var.) 새싹은 꿀풀과에 속하는 1년생 초본이다. 본 연구의 목적은 들깨 새싹 에탄올 추출물이 사이토카인으로 유도된 췌장 베타 세포 손상에 대한 예방 효과를 평가하기 위함이다. 췌장 소도 주위에 염증 세포 침습으로 의해 분비되는 사이토카인은 1형 당뇨병의 발병원인에 해당된다. 인터루킨-$1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$), 인터페론-${\gamma}$ (IFN-${\gamma}$), 종양괴사인자-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) 등의 사이토카인은 활성산소 형성을 유도한다. 세포 내 활성산소 축적은 췌장 베타 세포 기능장애와 세포사멸을 이끈다. 들깨 새싹 추출물은 항산화 효과를 증가 시켰으며 활성산소 생성을 억제하였다. 사이토카인은 세포생존율을 감소시켰고, iNOS와 COX-2의 발현을 증가시키고 산화질소 생성을 유도하였다. 들깨 새싹 추출물은 사이토카인으로 유도된 세포생존을 농도 의존적으로 예방하였다. 또한, 사이토카인에 의한 산화질소 생성과 iNOS와 COX-2의 단백질 발현 증가를 억제하였다. 더 나아가 들깨 새싹 추출물은 췌장 베타 세포주(RIN-m5F)에서 $I{\kappa}B{\alpha}$ 인산화 억제를 통해서 NF-${\kappa}B$의 활성화를 상당히 감소시켰다. 요약하자면, 본 연구 결과는 들깨 새싹 추출물이 사이토카인으로 유도된 췌장 베타 세포 손상에 대한 보호 효과를 가지고 있다는 것이 확인되었다. 결과적으로 들깨 새싹은 혈당 증가에 의한 산화 스트레스와 염증성 사이토카인에 의한 베타 세포 손상을 완화하여 당뇨에 유익할 것으로 사료된다.

• 생명과학회지
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• 제23권5호
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• pp.682-688
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• 2013

꾸지뽕(Cudrania tricuspidata) 열매의 면역증강 작용을 검토하기 위하여 유산균을 이용하여 발효한 후 70% 에탄올 추출하여 그 추출물을 마우스 비장세포에 작용한 후 분비되는 cytokine으로 면역활성을 조사하였다. 그 결과 발효에 의해 성분의 변화로 총 페놀함량을 측정한 결과 발효에 의해 폴리페놀 함량이 약 47% 증가하였으며, 면역활성에서는 발효 꾸지뽕 열매에서 cytokine IL-2와IL-4의 분비량이 증가하였다. 그리고 LPS 자극제와 함께 처리하였을 때, Th1 cell 유도 cytokine인 IL-2, IL-12, TNF-${\alpha}$의 분비는 억제되었으나, Th2 cell 유도 cytokine인 IL-4, IL-5, IL-6, IL-10의 분비량이 유의적으로 증가하였다. 이는 발효 꾸지뽕 나무 열매 추출물이 Th1 cell의 발현에 의해 유도되는 세포성 면역작용 반응은 억제하며, B 림프구에 의한 항체생성과 관련된 체액성 면역작용을 유도하는 Th2 cell의 발현을 활성화 하는 것으로 사료된다.